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柔嫩艾美球虫杨凌株表面抗原SAG10基因的克隆与原核表达
引用本文:麦博,覃宗华,于三科,余劲术,吕敏娜,吴彩艳,林青,蔡建平. 柔嫩艾美球虫杨凌株表面抗原SAG10基因的克隆与原核表达[J]. 中国兽医科学, 2007, 37(9): 751-755
作者姓名:麦博  覃宗华  于三科  余劲术  吕敏娜  吴彩艳  林青  蔡建平
作者单位:1. 西北农林科技大学,动物科技学院,陕西,杨凌,712100;广东省农业科学院,兽医研究所,广东省兽医公共卫生公共实验室,广东,广州,510640
2. 广东省农业科学院,兽医研究所,广东省兽医公共卫生公共实验室,广东,广州,510640
3. 西北农林科技大学,动物科技学院,陕西,杨凌,712100
摘    要:从柔嫩艾美球虫第二代裂殖子总RNA中扩增EtSAG10基因,与pGEM-T Easy载体连接后转化大肠杆菌(E.coli)DH5α,筛选阳性克隆,扩增不含N端信号肽的编码序列,分别插入表达载体pET-32a( )和pMAL-c2X,转化至E.coliRosetta,以IPTG诱导表达。结果表明,pET-32a( )-EtSAG10在E.coliRosetta中的表达产物约占菌体总蛋白的43%,融合蛋白分子质量约为47 ku,以包涵体形式存在;而pMAL-c2X-EtSAG10在E.coliRosetta中表达的重组蛋白为可溶性,表达产物约占菌体总蛋白的35%,融合蛋白分子质量约为69 ku。以表达的可溶性EtSAG10重组蛋白100μg/只肌肉注射免疫雏鸡,攻虫后以盲肠病变计分、盲肠卵囊数(OPG)、相对增重率和抗球虫指数(ACI)评价,免疫组相对盲肠卵囊产量为47.7%,抗球虫指数由86.79提高至152.13。提示,重组表达的EtSAG10可诱导雏鸡产生一定的抗球虫免疫保护。

关 键 词:柔嫩艾美球虫  表面抗原10  基因克隆  表达  免疫
文章编号:1673-4696(2007)09-0751-05
修稿时间:2007-06-07

Cloning and prokaryotic expression of the SAG10 gene encoding surface antigen 10 of Eimeria tenella Yangling strain
MAI Bo,QIN Zong-hua,YU San-ke,YU Jin-shu,L Min-na,WU Cai-yan,LIN Qing,CAI Jian-ping. Cloning and prokaryotic expression of the SAG10 gene encoding surface antigen 10 of Eimeria tenella Yangling strain[J]. Chinese Veterinary Science, 2007, 37(9): 751-755
Authors:MAI Bo  QIN Zong-hua  YU San-ke  YU Jin-shu  L Min-na  WU Cai-yan  LIN Qing  CAI Jian-ping
Affiliation:MAI Bo,QIN Zong-hua,YU San-ke,YU Jin-shu,L(U) Min-na,WU Cai-yan,LIN Qing,CAI Jian-ping
Abstract:
Keywords:Eimeria tenella  surface antigen 10  gene cloning  prokaryotic expression  vaccination
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