| 鸭疫里氏杆菌外膜微孔蛋白基因的克隆和序列分析及PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 么乃全,王全凯,姜秀云,徐凤宇,于丹,孟轲音,高云航.鸭疫里氏杆菌外膜微孔蛋白基因的克隆和序列分析及PCR检测方法的建立[J].中国兽医科学,2013(7):723-727. |
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| 作者姓名： | 么乃全 王全凯 姜秀云 徐凤宇 于丹 孟轲音 高云航 |
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| 作者单位： | 吉林农业大学动物科技学院;长春市动物疫病预防控制中心;军事医学科学院军事兽医研究所 |
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| 基金项目： | 吉林省教育厅“十二五”科学技术研究项目(201372);吉林省科技发展计划项目(20110221);国家现代农业产业技术体系建设专项(CARS-43);国家星火计划项目(2012GA660003) |
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| 摘 要： | 根据GenBank中的鸭疫里氏杆菌(RA)外膜磷酸盐选择性微孔蛋白(Porin)基因序列设计特异性引物,以血清1、2、6、10、11、13、14和17型RA菌株的基因组DNA为模板均扩增出大小为1 212bp的目的片段,序列比对显示该基因在8种血清型菌株间同源性均大于99.6%。针对保守性最高的357bp片段设计特异性引物,建立了PCR检测方法,对鸭致病性大肠杆菌、鼠伤寒沙门菌、鸭巴氏杆菌及鸭肝炎病毒均未扩增出目的条带,表明该方法具有较高的特异性;敏感性试验显示最小检出量为73.96pg的基因组。应用建立的PCR方法对分离自吉林、河北及北京的8个菌株进行扩增,均在357bp处扩增出清晰的目的条带,与细菌分离鉴定的符合率达100%。本研究为RA的鉴定提供了新方法,为RA外膜微孔蛋白的后续研究提供了理论依据。
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| 关 键 词： | 鸭疫里氏杆菌 微孔蛋白 聚合酶链式反应 检测方法 |
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