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麋鹿朊蛋白全基因的克隆及序列分析
引用本文:刘雨田,孙成友,李娟,迟田英,张鑫鑫,于小静,王志亮.麋鹿朊蛋白全基因的克隆及序列分析[J].中国兽医科学,2013(2):131-135.
作者姓名:刘雨田  孙成友  李娟  迟田英  张鑫鑫  于小静  王志亮
作者单位:中国动物卫生与流行病学中心;华南农业大学兽医学院;山东农业大学动物医学院;青岛农业大学动物科技学院
基金项目:国家公益性行业(农业)科研专项(200903037)
摘    要:为获得中国麋鹿朊蛋白(PRNP)的全基因,并利用DNAStar软件与已报道的其他动物的朊蛋白全基因序列进行同源性分析,根据GenBank中马鹿朊蛋白基因序列设计特异性引物,采用PCR方法从提取的总基因组中扩增得到麋鹿PRNP基因;将其连接到pGEM-T Easy载体中,获得克隆产物并测序。结果,成功扩增出了中国麋鹿PRNP基因,构建了重组质粒pGEM-T-ML;对克隆产物的序列分析表明,麋鹿PRNP基因的开放阅读框包含771bp,编码256个氨基酸的前体蛋白,前体蛋白的分子质量约为28 200u;与已报道的其他鹿科动物朊蛋白全基因的核苷酸及氨基酸序列的同源性均在98.8%以上,与几种非鹿科动物的同源性在96.5%~98.4%之间。结果表明,麋鹿PRNP基因的核苷酸和编码蛋白的氨基酸序列与其他鹿科动物的序列具有高度保守性,而与几种非鹿科动物间的同源性也较高,说明朊蛋白是一种古老的高度保守的蛋白。

关 键 词:麋鹿  朊蛋白全基因  克隆  序列分析  鹿慢性消耗性疾病

Cloning and sequencing of PRNP gene from Milu deer in China
LIU Yu-tian,SUN Cheng-you,LI Juan,CHI Tian-ying,ZHANG Xin-xin,YU Xiao-jing,WANG Zhi-liang.Cloning and sequencing of PRNP gene from Milu deer in China[J].Veterinary Science in China,2013(2):131-135.
Authors:LIU Yu-tian  SUN Cheng-you  LI Juan  CHI Tian-ying  ZHANG Xin-xin  YU Xiao-jing  WANG Zhi-liang
Institution:1(1.China Animal Health and Epidemiology Center,Qingdao 266032,China;2.College of Veterinary Medicine, Shandong Agricultural University,Tai’an 271018,China;3.College of Animal Science and Technology,Qingdao Agricultural University,Qingdao 266109,China;4.College of Veterinary Medicine,South China Agricultural University,Guangzhou 510642,China)
Abstract:
Keywords:
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