| 鸭瘟病毒UL51基因在COS-7细胞中的瞬时表达 |
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| 引用本文： | 沈婵娟,程安春,汪铭书,郭宇飞,信洪一,徐超,贾仁勇,韩新峰. 鸭瘟病毒UL51基因在COS-7细胞中的瞬时表达[J]. 中国兽医科学, 2009, 39(10) |
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| 作者姓名： | 沈婵娟 程安春 汪铭书 郭宇飞 信洪一 徐超 贾仁勇 韩新峰 |
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| 作者单位： | 沈婵娟,信洪一,徐超,贾仁勇,韩新峰(四川农业大学动物医学院禽病防治研究中心,四川,雅安,625014);程安春,汪铭书,郭宇飞(四川农业大学动物医学院禽病防治研究中心,四川,雅安,625014;动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川,雅安,625014) |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目，教育部"长江学者和创新团队发展计划"创新团队项目，现代农业产业技术体系建设专项 |
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| 摘 要： | 为阐明鸭瘟病毒(DPV)UL51基因的特性和功能,根据DPV UL51基因序列设计了1对特异性引物,用PCR方法扩增UL51基因,并将其克隆至pMD18-T栽体上,经双酶切和测序鉴定后,再将该目的片段亚克隆到pcDNA3.1(+)真核表达载体上,得到重组质粒pcDNA3.1-UL51,通过脂质体介导将其转入COS-7细胞;应用实时荧光RT-PCR、Western-blotting和间接免疫荧光法检测UL51基因在COS-7细胞中的转录、表达和定位情况.结果表明,UL51基因在转染后6 h即已开始转录,12 h开始表达,24 h时转录和表达量均达最高峰,之后逐渐降低.该基因在COS-7细胞中表达蛋白的分子质量为33 ku.比预测的分子质量(约27.1 ku)大.间接免疫荧光法显示,该基因产物早期聚集于COS-7细胞的近核区域,晚期位于胞浆和胞核中.
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| 关 键 词： | 鸭瘟病毒 UL51基因 真核表达载体 COS-7细胞 实时荧光RT-PCR 免疫印迹 问接免疫荧光法 |
Transient expression of duck plague virus UL51 gene in COS-7 cells |
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