马流感病毒NP基因的原核表达及其抗原性分析 |
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摘 要: | 采用RT-PCR方法从马流感病毒中国分离株A/马/新疆/07(H3N8)中扩增了NP基因片段,将其克隆到表达载体pET-30a(+)中,测序验证后转化入表达宿主菌Rosetta(DE3)中进行IPTG诱导表达。结果表明,重组菌表达出约64ku、以可溶性形式存在的重组融合蛋白,且在0.2mmol/L IPTG条件下诱导6h表达效果最好。表达产物经镍柱纯化后得到纯度较高的目的蛋白。经Western-blot和间接ELISA分析,纯化的蛋白只与抗马流感病毒阳性血清发生特异性反应,证实该蛋白具有良好的反应原性和特异性。
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Prokaryotic expression of equine influenza virus NP gene and antigenicity of its expressed product |
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