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乳牛乳腺炎病原菌的质粒提取及其四环素耐药基因的扩增
引用本文:代敏,王雄清,彭成,陈希文,杨丽红,王利. 乳牛乳腺炎病原菌的质粒提取及其四环素耐药基因的扩增[J]. 中国兽医科学, 2009, 39(4)
作者姓名:代敏  王雄清  彭成  陈希文  杨丽红  王利
作者单位:1. 绵阳师范学院,动物应用技术研究所,分子生物学与生物制药重点实验室,四川,绵阳,621000;成都中医药大学,药学院,四川,成都,610075
2. 绵阳师范学院,动物应用技术研究所,分子生物学与生物制药重点实验室,四川,绵阳,621000
3. 成都中医药大学,药学院,四川,成都,610075
4. 西南民族大学,生命科学与技术学院,四川,成都,610041
基金项目:四川省教育厅自然科学重点课题 
摘    要:采用碱裂解法、改良碱裂解法、大质粒简易提取法、试剂盒法和SDS法共5种方法对分离于绵阳市奶牛场的乳腺炎病原菌共50株进行了质粒DNA的提取,并用琼脂糖凝胶电泳对提取质粒进行了电泳分析.结果表明,5种质粒提取方法中SDS法的提取率较高(88%),电泳检测时质粒条带清晰,绝大部分菌株含有大小约20 kb的一种质粒;其他4种方法的提取率都较低,且以弥散性质粒条带为主.以提取的质粒DNA为模板,对其四环素耐药基因tetM、tetK和tetC进行了PCR扩增.结果表明,仅4株扩增出了tetM基因的特异性产物,未能扩增出tetK基因和tetC基因.

关 键 词:质粒提取  聚合酶链式反应  四环素耐药基因  乳腺炎病原菌  乳牛

Plasmid DNA extraction and amplification of tetracycline resistance gene from pathogenic bacteria isolated from dairy cow with mastitis
DAI Min,WANG Xiong-qing,PENG Cheng,CHEN Xi-wen,YANG Li-hong,WANG Li. Plasmid DNA extraction and amplification of tetracycline resistance gene from pathogenic bacteria isolated from dairy cow with mastitis[J]. Chinese Veterinary Science, 2009, 39(4)
Authors:DAI Min  WANG Xiong-qing  PENG Cheng  CHEN Xi-wen  YANG Li-hong  WANG Li
Abstract:
Keywords:
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