| 藏绵羊朊蛋白基因的原核表达 |
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| 引用本文： | 陈豪泰,吴润,刘湘涛,谢庆阁.藏绵羊朊蛋白基因的原核表达[J].中国兽医科学,2006,36(11):859-863. |
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| 作者姓名： | 陈豪泰 吴润 刘湘涛 谢庆阁 |
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| 作者单位： | 1. 中国农业科学院,兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,农业部畜禽病毒学重点实验室,甘肃,兰州,730046
2. 甘肃农业大学,动物医学院,甘肃,兰州,730070 |
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| 基金项目： | 农业部重点实验室基金;兰州兽医研究所所长基金 |
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| 摘 要： | 从藏绵羊全血中提取基因组总DNA,用所设计的引物以聚合酶链式反应扩增出细胞型朊蛋白(PrPc)基因。测序分析表明,所克隆的羊PrPc基因片段大小为771 bp,包含了羊朊蛋白基因的完整编码区序列,其与国内外报道的序列基本相同。将目的基因与经EcoRⅠ和XhoⅠ酶切的载体pGEX-4T-1连接后转化宿主菌BL21(DE3),挑选重组阳性菌用IPTG诱导表达,收集不同培养时间的菌液进行SDS-PAGE和Western-blotting。结果表明,PrP基因在大肠杆菌中成功表达,并能被抗牛PrPc单抗4C11识别。凝胶薄层扫描结果显示,表达蛋白约占菌体总蛋白的30%~45%,目的蛋白以包涵体的形式存在,包涵体经变性裂解、纯化和复性后得到具有一定生物学活性的目的蛋白。
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| 关 键 词： | 重组朊蛋白 藏绵羊 原核表达 |
| 文章编号： | 1673-4696(2006)11-0859-05 |
| 修稿时间： | 2006年6月13日 |
Prokaryotic expression of prion protein gene of Tibet sheep |
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| CHEN Hao-tai,WU Run,LIU Xiang-tao,XIE Qing-ge.Prokaryotic expression of prion protein gene of Tibet sheep[J].Veterinary Science in China,2006,36(11):859-863. |
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| Authors: | CHEN Hao-tai WU Run LIU Xiang-tao XIE Qing-ge |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | recombinant prion protein Tibet sheep prokaryotic expression |
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