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| 犬新孢子虫AMA1基因重组真核表达质粒的构建及其在Vero细胞中的表达 | |
| 作者姓名： | 郭焕平 贾立军 薛书江 钱年超 张守发 |
| 作者单位： | 延边大学农学院动物医学系 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(31160501);吉林省青年科研基金项目(201201076);吉林省自然科学基金项目(201115230);延边大学科技发展计划项目(延大科合字2011第37号);博士科研启动基金(延大校发[2012]173号) |
| 摘 要： | 为构建犬新孢子虫AMA1基因的重组真核表达质粒,了解其在Vero细胞中的表达情况,采用RT-PCR方法扩增牛源犬新孢子虫吉林株AMA1全长基因,构建了重组真核表达质粒pVAX1-NcAMA1;利用脂质体介导转染法将该重组质粒转染至Vero细胞,应用间接免疫荧光方法(IFA)和Western-blot技术检测AMA1基因在Vero细胞中的表达情况。结果显示,扩增的牛源犬新孢子虫吉林株AMA1基因的长度为1 695bp,与GenBank中相应基因序列(AB265823.1)的同源性为99.9%。成功构建了重组真核表达质粒pVAX1-NcAMA1,IFA检测发现AMA1基因在Vero细胞中获得了瞬时表达,表达产物经Western-blot鉴定,其分子质量约为68ku,且具有较好的反应原性。本试验为新孢子虫病核酸疫苗的进一步研究奠定了基础。 |
| 关 键 词： | 犬新孢子虫 AMA1基因 真核表达 |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ | |