| 四种血清型胸膜肺炎放线杆菌多重PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 陈华美,曹三杰,文心田,肖国生. 四种血清型胸膜肺炎放线杆菌多重PCR检测方法的建立[J]. 中国兽医科学, 2008, 38(10) |
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| 作者姓名： | 陈华美 曹三杰 文心田 肖国生 |
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| 摘 要： | 根据胸膜肺炎放线杆菌(APP)外膜蛋白OmlA序列设计种特异性引物,根据血清型1、2、6、7荚膜多糖(CPS)序列分别设计型特异性引物,通过优化PCR扩增条件,分别扩增出OmlA(952 bp)、CPS1(630bp)、CPS2(504 bp)、CPS6(720 bp)、CPS7(389 bp)特异性片段,建立了既可对APP进行定性检测又可对APP 1、2、6、7进行定型检测的多重PCR.特异性试验表明,此多重PCR能从APP 1～4、6～10标准株中扩增出与引物相应的特异性片段;对猪副嗜血杆菌、猪肺炎霉形体、多杀性巴氏杆菌、肠炎沙门菌、猪链球菌、大肠杆菌和猪丹毒杆菌进行扩增,均未扩增出片段.敏感性试验表明,此多重PCR能够检测到DNA的量为10 pg.45头疑似病猪病料的细菌分离鉴定结果与此多重PCR的鉴定结果一致.上述结果表明,建立的多重PCR适合于APP 1、2、6、7的鉴别诊断及流行病学调查.
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| 关 键 词： | 胸膜肺炎放线杆菌 外膜蛋白基因 荚膜多糖基因 多重PCR 检测 |
Development of a multiplex PCR assay for detection of Actinobacillus pleuropneumoniae serotypes 1,2,6 and 7 |
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| CHEN Hua-mei,CAO San-jie,WEN Xin-tian,XIAO Guo-sheng. Development of a multiplex PCR assay for detection of Actinobacillus pleuropneumoniae serotypes 1,2,6 and 7[J]. Chinese Veterinary Science, 2008, 38(10) |
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| Authors: | CHEN Hua-mei CAO San-jie WEN Xin-tian XIAO Guo-sheng |
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