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新城疫病毒cDNA文库的构建研究
引用本文:陈书琨,何云生,李观娣,钟安清. 新城疫病毒cDNA文库的构建研究[J]. 中国兽医科学, 1993, 0(2)
作者姓名:陈书琨  何云生  李观娣  钟安清
作者单位:深圳动植物检疫局 518001(陈书琨,何云生,李观娣),深圳动植物检疫局 518001(钟安清)
摘    要:本文报道了用人工合成的28聚寡核苷酸为“引物”,以强毒株新城疫 病毒(NDV)基因组PNA为模板,在逆转录酶作用下成功地合成了NDV- cDNA。后者经琼脂糖凝胶电泳观察,其大小约为0.5~14kb。从凝胶上收集 大于1.0kb以上的cDNA,用Hpa Ⅰ对其进行限制性酶切,然后将酶切片段克隆到pBR322的ScaI位点上,得到的克隆产物即为构建的NDV-cDNA文库。经用少量文库转化E.Coli HB101,得到氨苄青霉素敏感而四环素抗性的转化菌落(Amp基因因外源DNA的插入而失活)。从随机挑出的5个转化菌株中提取重组质粒,经琼脂糖凝胶电泳检测,其插入片段的大小分别为0.8~3.0kb不等。说明所构建的NDV-cDNA文库有效。

关 键 词:新城疫病毒  分子克隆  基因文库

Establishment of cDNA library of newcastale disease virus
[Ch]/Chen Shukun.... Establishment of cDNA library of newcastale disease virus[J]. Chinese Veterinary Science, 1993, 0(2)
Authors:[Ch]/Chen Shukun...
Abstract:
Keywords:NDV   molecular clone   gene library
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