| 猪带绦虫TSO18基因真核表达载体的构建及其表达 |
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| 引用本文： | 袁改玲,才学鹏,景志忠,郑亚东,骆学农,郭爱疆. 猪带绦虫TSO18基因真核表达载体的构建及其表达[J]. 中国兽医科学, 2005, 35(7): 529-532 |
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| 作者姓名： | 袁改玲 才学鹏 景志忠 郑亚东 骆学农 郭爱疆 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院,兰州兽医研究所,甘肃,兰州,730046 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展规划(973)项目(G1999011906) |
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| 摘 要： | 采用PCR从重组克隆载体pGEMTSO18中扩增出猪带绦虫六钩蚴TSO18基因,与毕赤酵母分泌性表达载体pPIC9k相连接,构建重组表达载体pPIC9kTSO18,转化大肠埃希氏菌JM109,经测序证实,基因序列完全正确。制备重组质粒pPIC9kTSO18,用SalⅠ线性化,并电转化毕赤酵母(Pichiapastoris)GS115,使重组表达载体与酵母染色体发生同源整合。采用G418抗性梯度法筛选得到高拷贝重组菌株,以甲醇进行诱导表达,SDSPAGE和Westernblotting分析结果表明,诱导表达的培养上清中表达出具有反应活性的16ku重组蛋白,目的蛋白约占培养上清液中蛋白总量的80%以上,诱导72h目的蛋白表达量为0.5mg/mL。
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| 关 键 词： | 猪带绦虫 TSO18基因 毕赤酵母 诱导表达 |
| 文章编号： | 1000-6419(2005)07-0529-04 |
| 修稿时间： | 2005-03-21 |
Construction and expression of recombinant antigen TSO18 gene of Taenia solium |
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| YUAN Gai-ling,CAI Xue-peng,JING Zhi-zhong,ZHENG Ya-dong,LUO Xue-nong,GUO Ai-jiang. Construction and expression of recombinant antigen TSO18 gene of Taenia solium[J]. Chinese Veterinary Science, 2005, 35(7): 529-532 |
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| Authors: | YUAN Gai-ling CAI Xue-peng JING Zhi-zhong ZHENG Ya-dong LUO Xue-nong GUO Ai-jiang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Taenia solium TSO18 gene Pichia pastoris induction expression |
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