| 口蹄疫病毒结构蛋白VP1基因的克隆及其在大肠埃希氏菌中的表达 |
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| 引用本文： | 杨彬,刘在新,胡永浩,谢庆阁. 口蹄疫病毒结构蛋白VP1基因的克隆及其在大肠埃希氏菌中的表达[J]. 中国兽医科学, 2003, 33(3): 3-8 |
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| 作者姓名： | 杨彬 刘在新 胡永浩 谢庆阁 |
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| 作者单位： | 1. 中国农业科学院,兰州兽医研究所,甘肃,兰州,730046
2. 甘肃农业大学动物医学院,甘肃,兰州,730070 |
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| 基金项目： | 国家“973”项目子专题部分内容 (1 9990 1 190 3) |
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| 摘 要： | 利用RT PCR技术 ,用包容口蹄疫病毒完整VP1基因的引物从口蹄疫分离株 (China/99 2 )中扩增得到一约 75 0bp的DNA片段 ,克隆后 ,经对该片段的核苷酸序列进行测序和同源性比较 ,显示其与国外同源参考序列 (O1K/66)的同源性为 80 .44% ,与国内同型参考株 (HB/WH/99)的核苷酸序列的同源性达 99.0 6%。随后以重组质粒pGEM VP1为模板 ,用特异性表达引物扩增得到目的基因VP1 (65 0bp) ,对目的基因和表达载体 pGEX 4T 1分别以相同的限制性内切酶酶切后构建成重组表达载体 ,转化宿主菌BL2 1 (DE3 )后得到重组质粒pGEX VP1 ,经酶切及PCR鉴定筛选出阳性克隆 ,测序证明目的基因正确插入到表达载体。用IPTG诱导VP1基因的表达 ,收集不同时间的菌液进行SDS PAGE电泳、Western blotting分析检测。结果表明 ,结构蛋白VP1基因可在大肠埃希氏菌中表达 ,表达产物的分子量约为 5 3ku ,并能被口蹄疫阳性血清所识别。经薄层扫描分析 ,表达蛋白约占菌体蛋白总量的 2 0 .0 0 %。证明口蹄疫病毒结构蛋白VP1基因可在大肠埃希氏菌中高效表达 ,且表达产物有一定的生物学活性
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| 关 键 词： | 口蹄疫病毒 结构蛋白 VP1基因 克隆 表达 |
| 文章编号： | 1000-6419(2003)03-0003-06 |
| 修稿时间： | 2002-11-26 |
Cloning of structural protein VP1 gene of foot and mouth disease virus and its expression in Escherichia coli |
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| YANG Bin ,LIU Zai xin ,HU Yong hao ,XIE Qing ge. Cloning of structural protein VP1 gene of foot and mouth disease virus and its expression in Escherichia coli[J]. Chinese Veterinary Science, 2003, 33(3): 3-8 |
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| Authors: | YANG Bin LIU Zai xin HU Yong hao XIE Qing ge |
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| Affiliation: | YANG Bin 1,LIU Zai xin 1,HU Yong hao 2,XIE Qing ge 1 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | FMDV structrural protein VP1 gene clone expression |
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