| 牛病毒性腹泻病毒玛纳斯株E2基因的克隆及其主要抗原表位区的分段表达 |
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| 引用本文： | 黄新,王新华,钟发刚. 牛病毒性腹泻病毒玛纳斯株E2基因的克隆及其主要抗原表位区的分段表达[J]. 中国兽医科学, 2009, 39(4) |
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| 作者姓名： | 黄新 王新华 钟发刚 |
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| 作者单位： | 新疆生产建设兵团,绵羊繁育生物技术重点实验室,新疆,石河子,832000 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展规划(973计划) |
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| 摘 要： | 应用RT-PCR方法扩增了牛病毒性腹泻病毒(BVDV)新疆玛纳斯分离株的E2基因,应用软件对序列进行分析,预测了可能存在的抗原表位;分别扩增了包含预测抗原位点的片段(1～118)-(144～340)-(100～300)-(1～345),并将其克隆到pMD18-T Simple载体中;将重组质粒pMD-(1～118)、pMD-(144～340)、pMD-(100～300)、pMD-(1～345)的HindⅢ+Bam H Ⅰ双酶切产物分别插入pET28a(+),构建了原核表达载体pET-(1～118)、pET-(144～340)、pET-(100～300)、pET-(1～345).将这些原核表达载体分别导入BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达,收集菌液进行SDS-PAGE分析,结果显示,4个重组质粒在BL21(DE3)中均成功表达,表达融合蛋白的分子质量分别为18.6、28.2、29.2和43.9 ku,与预测蛋白质分子质量一致,Western-blot分析结果表明,28.2、29.2和43.9 ku的融合蛋白可被牛抗BVDV阳性血清识别.
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| 关 键 词： | 牛病毒性腹泻病毒 E2基因 克隆 抗原表位 表达 |
Cloning of E2 gene of bovine viral diarrhea virus Manasi strain and expression of its major epitope domains in Escherichia coli |
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| HUANG Xin,WANG Xin-hua,ZHONG Fa-gang. Cloning of E2 gene of bovine viral diarrhea virus Manasi strain and expression of its major epitope domains in Escherichia coli[J]. Chinese Veterinary Science, 2009, 39(4) |
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| Authors: | HUANG Xin WANG Xin-hua ZHONG Fa-gang |
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