Ⅰ群禽腺病毒抗体间接hexon-ELISA检测方法的建立 |
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作者姓名: | 罗思思 谢芝勋 刘加波 庞耀珊 邓显文 谢志勤 谢丽基 范晴 彭宜 |
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作者单位: | 广西兽医研究所广西畜禽疫苗新技术重点实验室 |
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基金项目: | 广西特聘专家专项经费资助项目(2011B020);广西科技项目(桂科攻0815009-3-6,2010GXNSFA013090,2010GXNSFA013089) |
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摘 要: | 为建立一种检测Ⅰ群禽腺病毒(FAVⅠ)抗体的间接ELISA方法,以FAVⅠhexon重组蛋白作为包被抗原,优化反应条件,建立了FAVⅠ抗体间接hexon-ELISA检测方法。抗原最佳包被浓度为10.0μg/mL,最适包被条件为37℃2h加4℃过夜;最佳封闭液为50g/L脱脂乳;血清最佳稀释度为1∶100,最佳作用时间为75min;酶标二抗最佳工作浓度为1∶2 000,最佳作用时间为45min;hexon-ELISA阴性、阳性临界值为0.379。用建立的hexon-ELISA方法检测100份鸡血清样品,阳性率为45%。结果表明,建立的hexon-ELISA方法简便、快捷,可大批量检测,具有良好的特异性、敏感性和重复性,适用于FAVⅠ的诊断、抗体水平监测及流行病学调查。
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关 键 词: | Ⅰ群禽腺病毒 六邻体 酶联免疫吸附试验 |
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