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| 牛分枝杆菌融合基因hsp65-esat6的原核表达及产物的纯化 | |
| 引用本文： | 迟磊,刘思国,宫强,王春来,赵昆,王勇,刘建东,刘慧芳,周媛媛,常月红,云孟克,赵福广.牛分枝杆菌融合基因hsp65-esat6的原核表达及产物的纯化[J].中国兽医科学,2007,37(3):223-226. |
| 作者姓名： | 迟磊 刘思国 宫强 王春来 赵昆 王勇 刘建东 刘慧芳 周媛媛 常月红 云孟克 赵福广 |
| 作者单位： | 1. 中国农业科学院,哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001;吉林农业大学,生命科学学院,吉林,长春,130118 2. 中国农业科学院,哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001 3. 吉林农业大学,生命科学学院,吉林,长春,130118 |
| 摘 要： | 以牛分枝杆菌ValleeⅢ株基因组DNA为模板扩增hsp65和esat6基因,采用重叠延伸剪接技术(SOE)获得了融合基因hsp65-esat6,将hsp65-esat6连接到原核表达载体pET32a(+)上,构建重组质粒pET65-E6,将其转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,以IPTG诱导(终浓度为1 mmol/L),表达产物进行SDS-PAGE分析。以Ni2+亲和层析柱纯化表达的融合蛋白和Western-blot分析该融合蛋白的免疫活性。结果表明:Hsp65-ESAT6融合蛋白以包涵体形式表达。表达的融合蛋白裂解为两部分,即58 ku和30ku,二者相加与预测大小88 ku相符。纯化的融合蛋白能与抗牛分枝杆菌阳性血清发生反应。 |
| 关 键 词： | 牛分枝杆菌 融合基因 原核表达 纯化 |
| 文章编号： | 1673-4696(2007)03-0223-04 |
| 修稿时间： | 2006年11月16 |
Prokaryotic expression of the fusion gene hsp65-esat6 of Mycobacterium bovis and purification of the expressed protein |
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| CHI Lei,LIU Si-guo,GONG Qiang,WANG Chun-lai,ZHAO Kun,WANG Yong,LIU Jian-dong,LIU Hui-fang,ZHOU Yuan-yuan,CHANG Yue-hong,YUN Meng-ke,ZHAO Fu-guang.Prokaryotic expression of the fusion gene hsp65-esat6 of Mycobacterium bovis and purification of the expressed protein[J].Veterinary Science in China,2007,37(3):223-226. | |
| Authors: | CHI Lei LIU Si-guo GONG Qiang WANG Chun-lai ZHAO Kun WANG Yong LIU Jian-dong LIU Hui-fang ZHOU Yuan-yuan CHANG Yue-hong YUN Meng-ke ZHAO Fu-guang |
| Abstract: | |
| Keywords: | Mycobacterium bovis fusion gene prokaryotic expression purification |
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