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| 猪圆环病毒2型实时荧光定量PCR检测标准阳性模板的构建 | |
| 引用本文： | 张福良,靳玉芬,郝贵增,宋长绪,朱道中.猪圆环病毒2型实时荧光定量PCR检测标准阳性模板的构建[J].中国兽医科学,2007,37(1):49-53. |
| 作者姓名： | 张福良 靳玉芬 郝贵增 宋长绪 朱道中 |
| 作者单位： | 1. 安阳工学院,河南,安阳,455000;广东省农业科学院兽医研究所,广东,广州,510640 2. 安阳工学院,河南,安阳,455000 3. 广东省农业科学院兽医研究所,广东,广州,510640 4. 广州出入境检验检疫局,广东,广州,510623 |
| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划);广东省农业科技攻关项目 |
| 摘 要： | 采用PCR方法克隆了猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2基因,将构建的重组质粒pMD-ORF2作为PCV2实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测的标准阳性模板,并对该模板进行了酶切及测序鉴定。结果显示,此模板特异性强,稳定性好,-20℃保存20 d无显著变化;对起始浓度为1.0×106、1.0×105、1.0×104拷贝/μL的pMD-ORF2标准品的最终实际测得值分别为1.000×106、0.935×105和0.987×104,其变异系数分别为2.527%、2.067%和2.092%。表明,以此模板进行FQ-PCR具有良好的准确性和重现性。该模板的检测线性范围宽,当稀释度为1.0×109~1.0×105拷贝/μL时,相关系数r=-0.989。 |
| 关 键 词： | 猪圆环病毒2型 实时荧光定量PCR 模板 |
| 文章编号： | 1673-4696(2007)01-0049-05 |
| 修稿时间： | 2006年9月19日 |
Construction of standard positive template of the real-time fluorescent quantitative PCR assay for detection of porcine circovirus serotype 2 |
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| ZHANG Fu-liang,JIN Yu-fen,HAO Gui-zeng,SONG Chang-xu,ZHU Dao-zhong.Construction of standard positive template of the real-time fluorescent quantitative PCR assay for detection of porcine circovirus serotype 2[J].Veterinary Science in China,2007,37(1):49-53. | |
| Authors: | ZHANG Fu-liang JIN Yu-fen HAO Gui-zeng SONG Chang-xu ZHU Dao-zhong |
| Abstract: | |
| Keywords: | porcine circovirus serotype 2 real-time fluorescent quantitative PCR template |
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