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猪圆环病毒2型实时荧光定量PCR检测标准阳性模板的构建
引用本文:张福良,靳玉芬,郝贵增,宋长绪,朱道中. 猪圆环病毒2型实时荧光定量PCR检测标准阳性模板的构建[J]. 中国兽医科学, 2007, 37(1): 49-53
作者姓名:张福良  靳玉芬  郝贵增  宋长绪  朱道中
作者单位:1. 安阳工学院,河南,安阳,455000;广东省农业科学院兽医研究所,广东,广州,510640
2. 安阳工学院,河南,安阳,455000
3. 广东省农业科学院兽医研究所,广东,广州,510640
4. 广州出入境检验检疫局,广东,广州,510623
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划);广东省农业科技攻关项目
摘    要:采用PCR方法克隆了猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2基因,将构建的重组质粒pMD-ORF2作为PCV2实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测的标准阳性模板,并对该模板进行了酶切及测序鉴定。结果显示,此模板特异性强,稳定性好,-20℃保存20 d无显著变化;对起始浓度为1.0×106、1.0×105、1.0×104拷贝/μL的pMD-ORF2标准品的最终实际测得值分别为1.000×106、0.935×105和0.987×104,其变异系数分别为2.527%、2.067%和2.092%。表明,以此模板进行FQ-PCR具有良好的准确性和重现性。该模板的检测线性范围宽,当稀释度为1.0×109~1.0×105拷贝/μL时,相关系数r=-0.989。

关 键 词:猪圆环病毒2型  实时荧光定量PCR  模板
文章编号:1673-4696(2007)01-0049-05
修稿时间:2006-09-19

Construction of standard positive template of the real-time fluorescent quantitative PCR assay for detection of porcine circovirus serotype 2
ZHANG Fu-liang,JIN Yu-fen,HAO Gui-zeng,SONG Chang-xu,ZHU Dao-zhong. Construction of standard positive template of the real-time fluorescent quantitative PCR assay for detection of porcine circovirus serotype 2[J]. Chinese Veterinary Science, 2007, 37(1): 49-53
Authors:ZHANG Fu-liang  JIN Yu-fen  HAO Gui-zeng  SONG Chang-xu  ZHU Dao-zhong
Abstract:
Keywords:porcine circovirus serotype 2  real-time fluorescent quantitative PCR  template
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