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| 7种动物冠状病毒基因芯片同步检测的研究 | |
| 引用本文： | 李健,熊炜,陈沁,张建武,王权,王巧全,胡永强,李树清.7种动物冠状病毒基因芯片同步检测的研究[J].中国兽医科学,2007,37(7):557-562. |
| 作者姓名： | 李健 熊炜 陈沁 张建武 王权 王巧全 胡永强 李树清 |
| 作者单位： | 1. 上海出入境检验检疫局,上海,200135 2. 上海大学生命科学学院,上海,200444 3. 中国农业科学院上海兽医研究所,上海,200032 |
| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划) |
| 摘 要： | 根据发布的7种动物冠状病毒相关基因的序列,给每种病毒设计了4~17对引物,同时依据RNA聚合酶基因序列合成了1对兼并引物,利用TCV原毒和纯化浓缩的CCV、FCV、FIPV、TGEV、PRCV、BCV细胞毒,构建了89个基因片段的克隆。采用煮沸裂解法制备质粒DNA,进行特异引物PCR扩增,回收纯化产物,点制冠状病毒基因芯片。抽提病毒总RNA,利用Cy3-dCTP随机渗入反转录PCR标记,同时对BCV、CCV利用Cy3-dCTP随机渗入反转录标记,与芯片进行杂交检测。结果显示,BCV和TCV基因克隆间未见交叉,CCV、FCV、FIPV、TGEV、PRCV则存在广泛交叉。选择无交叉的特异克隆片段点制最终基因芯片,并与病毒多重PCR扩增产物杂交,芯片信号未见交叉,结果判断明确。表明,基因芯片检测法比传统PCR法敏感1 000倍。 |
| 关 键 词： | 冠状病毒 基因芯片 杂交 检测 |
| 文章编号： | 1673-4696(2007)07-0557-06 |
| 修稿时间： | 2007年3月6日 |
Simultaneous detection of seven animal coronaviruses by gene chip hybridization |
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| LI Jian,XIONG Wei,CHEN Qin,ZHANG Jian-wu,WANG Quan,WANG Qiao-quan,HU Yong-qiang,LI Shu-qing.Simultaneous detection of seven animal coronaviruses by gene chip hybridization[J].Veterinary Science in China,2007,37(7):557-562. | |
| Authors: | LI Jian XIONG Wei CHEN Qin ZHANG Jian-wu WANG Quan WANG Qiao-quan HU Yong-qiang LI Shu-qing |
| Abstract: | |
| Keywords: | coronavirus gene chip hybridization detection |
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