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牛分枝杆菌PPE68与Mb1230以及PPE57和PE-PGRS35的表达纯化及其在牛结核病血清学诊断中的初步应用
引用本文:李明,张雅娜,林伟东,隋修锟,贾红,侯绍华,姜一曈,房立春,朱鸿飞,鑫婷. 牛分枝杆菌PPE68与Mb1230以及PPE57和PE-PGRS35的表达纯化及其在牛结核病血清学诊断中的初步应用[J]. 中国兽医科学, 2019, 0(1): 20-28
作者姓名:李明  张雅娜  林伟东  隋修锟  贾红  侯绍华  姜一曈  房立春  朱鸿飞  鑫婷
作者单位:中国农业科学院北京畜牧兽医研究所;比利时列日大学让布鲁农学院分子生物学实验室;北京信和翔科技有限责任公司
基金项目:国家自然科学基金项目(31602086);“十三五”国家重点研发计划项目(2016YFD0500902,2017YFD0500906);北京市自然科学基金项目(6164039)
摘    要:为筛选和评估牛分枝杆菌毒力菌株与卡介苗(BCG)基因差异区域(region of differences,RD)蛋白在牛结核病诊断中的效果,本研究表达了牛分枝杆菌RD1区的PPE68、RD9区的Mb1230、R11区的PPE57和RD2区的PE-PGRS35,并纯化得到纯度大于90%的重组蛋白。通过优化条件建立了间接ELISA检测方法,并采用该方法检测了结核病阳性牛和健康牛血清中针对PPE68、Mb1230、PPE57和PE-PGRS35的IgM和IgG抗体水平,评价其在牛结核病血清学诊断中的潜力。结果显示,在结核病阳性牛中,针对PPE68、Mb1230、PPE57和PE-PGRS35的IgG抗体检出率分别为13.3%、43%、50%和30%,IgM抗体检出率分别为30%、10%、36%和33%。结果表明,R11区的PPE57和RD2区的PE-PGRS35有潜力作为牛结核病血清学检测的候选抗原,用于牛结核病的诊断。

关 键 词:牛分枝杆菌  血清学检测  重组蛋白  IgG  IGM

Expression and purification of Mycobacterium bovis PPE68,Mb1230,PPE57 and PE-PGRS35 and their preliminary application in the serodiagnosis of bovine tuberculosis
LI Ming,ZHANG Ya-na,LIN Wei-dong,SUI Xiu-kun,JIA Hong,HOU Shao-hua,JIANG Yi-tong,FANG Li-chun,ZHU Hong-fei,XIN Ting. Expression and purification of Mycobacterium bovis PPE68,Mb1230,PPE57 and PE-PGRS35 and their preliminary application in the serodiagnosis of bovine tuberculosis[J]. Chinese Veterinary Science, 2019, 0(1): 20-28
Authors:LI Ming  ZHANG Ya-na  LIN Wei-dong  SUI Xiu-kun  JIA Hong  HOU Shao-hua  JIANG Yi-tong  FANG Li-chun  ZHU Hong-fei  XIN Ting
Affiliation:(Institute of A nimal Sciences,Chinese Academy of A gricultural Sciences ,Beijing 100193,China;Molecular Biology, Gembloux Agro-Bio Tech,University of Liege ,Liege 4000,Belgium;Beijing Xinhexiang Technology Co.,Ltd., Beijing 100085,China)
Abstract:LI Ming;ZHANG Ya-na;LIN Wei-dong;SUI Xiu-kun;JIA Hong;HOU Shao-hua;JIANG Yi-tong;FANG Li-chun;ZHU Hong-fei;XIN Ting(Institute of A nimal Sciences,Chinese Academy of A gricultural Sciences ,Beijing 100193,China;Molecular Biology, Gembloux Agro-Bio Tech,University of Liege ,Liege 4000,Belgium;Beijing Xinhexiang Technology Co.,Ltd., Beijing 100085,China)
Keywords:Mycobacterium bovis  serodiagnosis  recombinant protein  IgG  IgM
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