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流行性出血病病毒一步法RT-PCR检测方法的建立及应用
引用本文:杨振兴,朱建波,廖德芳,李占鸿,肖雷,高林,李楠,杨恒,李华春.流行性出血病病毒一步法RT-PCR检测方法的建立及应用[J].中国兽医科学,2019(3):280-286.
作者姓名:杨振兴  朱建波  廖德芳  李占鸿  肖雷  高林  李楠  杨恒  李华春
作者单位:云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室
基金项目:国家重点研发计划项目(2017YFC1200505);国家重点研发计划项目(2016YFD0500908);公益性行业(农业)科研专项(201303035)
摘    要:为建立流行性出血病病毒(EHDV)群特异性核酸检测方法,本研究根据GenBank中登录的EHDV毒株内衣壳结构蛋白VP7基因的保守区,设计并合成1对特异性引物,建立了一步法RT-PCR检测方法,并分别进行了特异性、敏感度和临床样品的检测试验。结果表明,该方法能特异性地检出不同地区分离的不同血清型EHDV,而对蓝舌病病毒(BTV)、中山病病毒(CHUV)和赤羽病病毒(AKAV)无交叉反应,具有较好的特异性;不同血清型的EHDV最低检出量级为1×10~2copies/uL。同时,该方法能有效地从临床抗凝血样品中检测出EHDV核酸,与病毒分离试验结果进行比较,符合率为100%。说明所建立的方法特异性强、敏感性高、可靠性好,可用于EHDV的快速检测、流行病学调查和试验研究。

关 键 词:流行性出血病病毒  一步RT-PCR  分子诊断

Development and application of one-step RT-PCR method for the detection of epizootic haemorrhagic disease virus
YANG Zhen-xing,ZHU Jian-bo,LIAO De-fang,LI Zhan-hong,XIAO Lei,GAO Lin,LI Nan,YANG Heng,LI Hua-chun.Development and application of one-step RT-PCR method for the detection of epizootic haemorrhagic disease virus[J].Veterinary Science in China,2019(3):280-286.
Authors:YANG Zhen-xing  ZHU Jian-bo  LIAO De-fang  LI Zhan-hong  XIAO Lei  GAO Lin  LI Nan  YANG Heng  LI Hua-chun
Institution:(Yunnan Tropical and Subtropical Animal Virus Disease Laboratory,Yunnan Veterinary and Animal Science Institute,Kunming 650224,China)
Abstract:YANG Zhen-xing;ZHU Jian-bo;LIAO De-fang;LI Zhan-hong;XIAO Lei;GAO Lin;LI Nan;YANG Heng;LI Hua-chun(Yunnan Tropical and Subtropical Animal Virus Disease Laboratory,Yunnan Veterinary and Animal Science Institute,Kunming 650224,China)
Keywords:epizootic haemorrhagic disease virus(EHDV)  one-step RT-PCR  molecular diagnostics
本文献已被 CNKI 维普 等数据库收录!
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