| 截短腐败梭菌α毒素的表达及其免疫原性评价 |
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| 引用本文： | 彭国瑞,彭小兵,李旭妮,蒋玉文. 截短腐败梭菌α毒素的表达及其免疫原性评价[J]. 中国兽医科学, 2019, 0(2): 220-225 |
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| 作者姓名： | 彭国瑞 彭小兵 李旭妮 蒋玉文 |
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| 作者单位： | 中国兽医药品监察所 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划项目--牛羊重要细菌病新型疫苗及其工艺研究(2017YFD0500905) |
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| 摘 要： | 为了获得截短腐败梭菌α毒素并评价其毒性、反应原性和免疫原性,根据腐败梭菌α毒素的结构与功能,设计2对引物分别扩增含有穿孔活性区和受体结合区的α毒素基因csaN和csaC,克隆至pET-28a(+)质粒,构建截短α毒素表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),诱导csaN和csaC表达,鉴定产物的反应原性和毒性,将经过诱导表达的工程菌灭活制成铝佐剂疫苗免疫家兔1次,通过血清中和试验和攻毒保护试验评价免疫效力,设立重组α全毒素rcsa免疫组作为阳性对照。结果显示,2个截短α毒素在大肠杆菌BL21(DE3)中均获得表达,产物能够与腐败梭菌抗毒素血清发生特异性反应,但失去了小鼠致死毒性。免疫家兔血清中和试验结果显示,csaN组血清的中和效价为1 MLD/0.1 mL,达到《中华人民共和国兽药典三部(2015年版)》效力检验的最低标准,csaC组为0,rcsa组为8 MLD/0.1 mL;csaN和csaC组家兔用1 MLD毒素攻击均未获得保护,而rcsa组家兔4/4获得保护。结果表明,截短α毒素与全毒素相比,失去了毒性但保留了反应原性,仅含穿孔活性结构区的截短部分具有较弱的免疫原性。
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| 关 键 词： | 腐败梭菌 截短α毒素 毒性 免疫原性 |
Expression and immunogenicity evaluation of two truncated alpha toxins of Clostridium septicum |
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| PENG Guo-rui,PENG Xiao-bing,LI Xu-ni,JIANG Yu-wen. Expression and immunogenicity evaluation of two truncated alpha toxins of Clostridium septicum[J]. Chinese Veterinary Science, 2019, 0(2): 220-225 |
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| Authors: | PENG Guo-rui PENG Xiao-bing LI Xu-ni JIANG Yu-wen |
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| Affiliation: | (China Institute of Veterinary Drug Control,Beijing 100081,China) |
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| Abstract: | PENG Guo-rui;PENG Xiao-bing;LI Xu-ni;JIANG Yu-wen(China Institute of Veterinary Drug Control,Beijing 100081,China) |
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| Keywords: | Clostridium septicum truncated alpha toxin toxicity immunogenicity |
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