| 牛病毒性腹泻病毒单克隆抗体的制备及其应用 |
| |
| 引用本文： | 赵洪哲,范峻豪,李新培,王昊,关平原,温永俊. 牛病毒性腹泻病毒单克隆抗体的制备及其应用[J]. 中国兽医科学, 2019, 0(3): 287-293 |
| |
| 作者姓名： | 赵洪哲 范峻豪 李新培 王昊 关平原 温永俊 |
| |
| 作者单位： | 内蒙古农业大学兽医学院农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室;中国农业科学院特产研究所 |
| |
| 基金项目： | 内蒙古农业大学高层次人才引进项目(NDGCC2016-22) |
| |
| 摘 要： | 为制备牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)单克隆抗体(MAb)及其直接荧光标记抗体,本试验用纯化的牛病毒性腹泻病毒Ht01株免疫雌性BALB/c小鼠。间接ELISA测其血清效价,取抗体效价达标小鼠的脾细胞与SP2/0细胞融合。用间接ELISA筛选阳性细胞株并进行2次亚克隆后注射入小鼠腹腔制备单抗腹水。利用辛酸-硫酸铵沉淀法纯化腹水,用间接免疫荧光试验测定其活性,用SDS-PAGE试验测定其纯度。经活性、纯度检测合格后,采用搅拌法与异硫氰酸荧光素(FITC)偶联;用葡聚糖G-25 Medium介质进行分离纯化。结果,本研究共获得2株能够稳定分泌IgG1类型的阳性杂交瘤细胞株和一种直接荧光抗体,分别被命名为BMAb11、BMAb20、DB11。稳定性试验表明,杂交瘤细胞分泌的抗体稳定性好。ELISA、间接免疫荧光试验和直接免疫荧光试验表明,单克隆抗体和直标荧光抗体均与BVDV发生特异性反应,说明它们的特异性较好。经ELISA鉴定,腹水抗体效价达到1∶12 800。直接荧光抗体荧光素与蛋白的摩尔比(F/P)为3.34,标准值在2.0～4.0之间,符合标准。上述研究结果表明,本研究制备的单克隆抗体和直标荧光抗体可用于BVDV的检测,为BVDV的临床诊断奠定了基础。
|
| 关 键 词： | 牛病毒性腹泻病毒(BVDV) 杂交瘤细胞 单克隆抗体(MAb) 直标荧光抗体 |
Preparation and application of monoclonal antibodies against bovine viral diarrhea virus |
| |
| ZHAO Hong-zhe,FAN Jun-hao,LI Xin-pei,WANG Hao,GUAN Ping-yuan,WEN Yong-jun. Preparation and application of monoclonal antibodies against bovine viral diarrhea virus[J]. Chinese Veterinary Science, 2019, 0(3): 287-293 |
| |
| Authors: | ZHAO Hong-zhe FAN Jun-hao LI Xin-pei WANG Hao GUAN Ping-yuan WEN Yong-jun |
| |
| Affiliation: | (Key Laboratory of Clinical Diagnosis and Treatment Technology in Animal Diseases,the Ministry of Agriculture,College of Veterinary Medicine dinner Mongolia Agricultural University,Hohhot 010018,China;Institute of Special Products,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Changchun 1301121 China) |
| |
| Abstract: | ZHAO Hong-zhe;FAN Jun-hao;LI Xin-pei;WANG Hao;GUAN Ping-yuan;WEN Yong-jun(Key Laboratory of Clinical Diagnosis and Treatment Technology in Animal Diseases,the Ministry of Agriculture,College of Veterinary Medicine dinner Mongolia Agricultural University,Hohhot 010018,China;Institute of Special Products,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Changchun 1301121 China) |
| |
| Keywords: | bovine viral diarrhea virus(BVDV) hybridoma cell monoclonal antibody(MAb) direct fluorescent antibody |
| 本文献已被 CNKI 维普 等数据库收录！ |
|
