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牛巴贝斯虫巢式PCR检测方法的建立
引用本文:孙明,王锦明,刘爱红,刘志杰,聂英,魏华,李玉峰,殷宏,关贵全,罗建勋.牛巴贝斯虫巢式PCR检测方法的建立[J].中国兽医科学,2019(2):183-189.
作者姓名:孙明  王锦明  刘爱红  刘志杰  聂英  魏华  李玉峰  殷宏  关贵全  罗建勋
作者单位:中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室;民勤县动物疫病预防控制中心;江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心
基金项目:国家重点研发计划项目(2017YFD0501200);农业科技创新工程项目(ASTIP);国家肉牛牦牛产业技术体系项目(NBCIS;CARS-37)
摘    要:为建立一种适用于基层兽医实验室特异、敏感、快速检测牛巴贝斯虫感染的方法,以牛巴贝斯虫球状体蛋白4(SBP4)基因为靶基因设计引物,建立检测牛巴贝斯虫的巢式PCR方法。结果表明,该方法可特异性地检测牛巴贝斯虫感染,与14种动物梨形虫无交叉反应。该方法能够检测到1 copy的SBP4基因,其敏感性分别是对应的内、外引物普通PCR的10倍和1 000倍。应用该巢式PCR方法,对田间随机采集的136份野外样品进行检测,检出阳性样品9份,显著高于AbouLaila等报道的方法(5份)。这些数据表明,建立的巢式PCR方法可用于基层兽医实验室敏感、准确地检测牛巴贝斯虫感染。

关 键 词:牛巴贝斯虫  巢式PCR  SBP4基因

Development of a nested PCR assay for detection of Babesia bovis
SUN Ming,WANG Jin-ming,LIU Ai-hong,LIU Zhi-jie,NIE Ying,WEI Hua,LI Yu-feng,YIN Hong,GUAN Gui-quan,LUO Jian-xun.Development of a nested PCR assay for detection of Babesia bovis[J].Veterinary Science in China,2019(2):183-189.
Authors:SUN Ming  WANG Jin-ming  LIU Ai-hong  LIU Zhi-jie  NIE Ying  WEI Hua  LI Yu-feng  YIN Hong  GUAN Gui-quan  LUO Jian-xun
Institution:(State Key Laboratory of Veterinary Etiological Biology/Key Laboratory of Veterinary Parasitology of Gansu Province/ Lanzhou Veterinary Research Institute,Chinese A cademy of Agricultural Sciences ,Lanzhou 730046,China;Center for Animal Disease Control of Minqin County,Wuwei 733300,China;Jiangsu Co-innovation Center for the Prevention and Control of Important Animal Infectious Diseases and Zoonoses,Yangzhou 225009,China)
Abstract:SUN Ming;WANG Jin-ming;LIU Ai-hong;LIU Zhi-jie;NIE Ying;WEI Hua;LI Yu-feng;YIN Hong;GUAN Gui-quan;LUO Jian-xun(State Key Laboratory of Veterinary Etiological Biology/Key Laboratory of Veterinary Parasitology of Gansu Province/ Lanzhou Veterinary Research Institute,Chinese A cademy of Agricultural Sciences ,Lanzhou 730046,China;Center for Animal Disease Control of Minqin County,Wuwei 733300,China;Jiangsu Co-innovation Center for the Prevention and Control of Important Animal Infectious Diseases and Zoonoses,Yangzhou 225009,China)
Keywords:Babesia bovis  nested PCR  SBP4 gene
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