| 柔嫩艾美球虫扬州株SO7抗原基因表达条件的研究 |
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| 引用本文： | 许金俊,彭金彪,陶建平,王留. 柔嫩艾美球虫扬州株SO7抗原基因表达条件的研究[J]. 中国兽医科学, 2007, 37(1): 54-60 |
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| 作者姓名： | 许金俊 彭金彪 陶建平 王留 |
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| 作者单位： | 扬州大学,兽医学院,江苏,扬州,225009 |
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| 基金项目： | 扬州大学校科研和教改项目;扬州大学校科研和教改项目;江苏省高校自然科学基金 |
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| 摘 要： | 通过RT-PCR扩增柔嫩艾美球虫YZ株折光体SO7抗原基因,并进行克隆和测序。将不含信号肽编码区片段的SO7基因克隆入表达载体pGEX-6p-1谷胱甘肽-S-转移酶基因的下游,构建表达质粒pGEX-6p-1-SO7,转化宿主菌BL21,获得重组菌。通过建立生长曲线,对诱导条件的摸索,根据SDS-PAGE确定融合蛋白的最佳表达条件。通过融合蛋白切胶免疫小鼠制备超免疫血清,经间接ELISA检测其与E.tenella子孢子抗原反应的特异性。结果显示,诱导时机和诱导时间是影响表达的主要因素,诱导温度、IPTG浓度次之;诱导时机以3 h为最佳,诱导时间以4.5 h为最佳;诱导温度以37℃最佳,0.008~1.000mmol/L的IPTG对表达量的影响不大。在优化的表达条件下,表达产物主要以包涵体存在,表达量占菌体总蛋白的37.5%。间接ELISA结果表明融合蛋白具有一定的免疫原性,保留了天然蛋白的部分抗原性。
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| 关 键 词： | 柔嫩艾美球虫 重组SO7抗原 大肠杆菌 表达条件 |
| 文章编号： | 1673-4696(2007)01-0054-07 |
| 修稿时间： | 2006-06-03 |
Studies on expression conditions of SO7 gene of Eimeria teneila YZ strain in Escherichia coli |
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| XU Jin-jun,PENG Jin-biao,TAO Jian-ping,WANG Liu. Studies on expression conditions of SO7 gene of Eimeria teneila YZ strain in Escherichia coli[J]. Chinese Veterinary Science, 2007, 37(1): 54-60 |
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| Authors: | XU Jin-jun PENG Jin-biao TAO Jian-ping WANG Liu |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Eimeria tenella recombinant SO7 antigen Escherichia coli expression condition |
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