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猪圆环病毒2型TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立
引用本文:张丽丽,张志,任夫波,杨若松,张燕霞,李晓成,单虎. 猪圆环病毒2型TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立[J]. 中国兽医科学, 2010, 40(10)
作者姓名:张丽丽  张志  任夫波  杨若松  张燕霞  李晓成  单虎
作者单位:张丽丽,任夫波,ZHANG Li-li,REN Fu-bo(青岛农业大学动物科技学院,山东,青岛,266109;中国动物卫生与流行病学中心,山东,青岛,266032);张志,张燕霞,李晓成,ZHANG Zhi,ZHANG Yan-xia,LI Xiao-cheng(中国动物卫生与流行病学中心,山东,青岛,266032);杨若松,YANG Ruo-song(中国动物卫生与流行病学中心,山东,青岛,266032;西北农林科技大学动物医学院,陕西,杨凌,712100);单虎,SHAN Hu(青岛农业大学动物科技学院,山东,青岛,266109) 
摘    要:根据猪圆环病毒2型(PCV2)ORF1基因的保守序列,设计合成了1对特异引物和1条探针,以PCV2全基因阳性质粒作为标准品,经反应条件优化,建立了一种检测PCV2的荧光定量PCR方法。对该方法进行特异性、敏感性和重复性试验,结果显示,该方法可特异地检测PCV2,而与PCV1等猪病病毒不发生交叉反应;该方法的灵敏度可达1×102copies/μL,比常规PCR高100倍;3次重复检测的变异系数均小于5%。用建立的荧光定量PCR和常规PCR分别对94份临床样品进行检测,荧光定量PCR的阳性检出率为51.06%,而常规PCR的阳性检出率仅为38.30%。证实,建立的方法具有快速、特异、灵敏、重复性好、定量、安全等优点,可用于PCV2的临床检测。

关 键 词:猪圆环病毒2型  荧光定量聚合酶链反应  TaqMan探针

Development of TaqMan fluorescent quantitative PCR for detection of porcine circovirus type 2
ZHANG Li-li,ZHANG Zhi,REN Fu-bo,YANG Ruo-song,ZHANG Yan-xia,LI Xiao-cheng,SHAN Hu. Development of TaqMan fluorescent quantitative PCR for detection of porcine circovirus type 2[J]. Chinese Veterinary Science, 2010, 40(10)
Authors:ZHANG Li-li  ZHANG Zhi  REN Fu-bo  YANG Ruo-song  ZHANG Yan-xia  LI Xiao-cheng  SHAN Hu
Abstract:
Keywords:
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