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| 猪传染性胃肠炎病毒聚合酶基因反义RNA对病毒的抑制作用 | |
| 引用本文： | 于晓龙,张海峰,李一经.猪传染性胃肠炎病毒聚合酶基因反义RNA对病毒的抑制作用[J].中国兽医科学,2006,36(2):85-88. |
| 作者姓名： | 于晓龙 张海峰 李一经 |
| 作者单位： | 1. 黑龙江省农业科学院博士后工作站,黑龙江,哈尔滨,150086;黑龙江省农业科学院,畜牧研究中心,黑龙江,哈尔滨,150086 2. 黑龙江省农业科学院,畜牧研究中心,黑龙江,哈尔滨,150086 3. 东北农业大学,动物医学院,黑龙江,哈尔滨,150030 |
| 摘 要： | 通过PCR扩增出猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)聚合酶部分片段,反向插入逆转录病毒表达载体pLXSN中,用脂质体法将重组质粒plxas-pol转染PA317细胞,经抗生素G418筛选出稳定的产毒细胞克隆,分别扩大培养后,取其上清液感染小鼠成纤维细胞NIH3T3,细胞克隆产生的重组病毒效价达9.0×105CFU/mL。用高效价假病毒感染IBRS2细胞,再经抗生素G418筛选,提取细胞克隆总RNA,经RT-PCR证明plxas-pol整合入IBRS2细胞。以TGEV感染IBRS2细胞和具有抗性的IBRS2细胞所产生的细胞病变为指标,证明该反义RNA对病毒有明显抑制作用,抑制率约为80%。用2×103和4×102TCID50/mL剂量的TGEV感染时,引起细胞死亡的时间分别为21 h和27 h,与对照组相比,抗性细胞系可明显延迟因病毒感染引起细胞死亡的时间。 |
| 关 键 词： | 猪传染性胃肠炎病毒 反义RNA 逆转录病毒表达载体 |
| 文章编号： | 1673-4696(2006)02-0085-04 |
| 修稿时间： | 2005年9月29日 |
Inhibition of TGEV in cells expressing antisense RNA targeted against virus RNA polymerase gene |
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| YU Xiao-long,ZHANG Hai-feng,LI Yi-jing.Inhibition of TGEV in cells expressing antisense RNA targeted against virus RNA polymerase gene[J].Veterinary Science in China,2006,36(2):85-88. | |
| Authors: | YU Xiao-long ZHANG Hai-feng LI Yi-jing |
| Abstract: | |
| Keywords: | transmissible gastroenteritis virus antisense RNA retrovirus vector |
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