| 赤羽病病毒N基因硫氧还蛋白融合表达载体的构建与表达 |
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| 引用本文： | 花群义,杨云庆,董俊,杨晶焰,贾建军,周晓黎,徐自忠. 赤羽病病毒N基因硫氧还蛋白融合表达载体的构建与表达[J]. 中国兽医科学, 2003, 33(10): 7-14 |
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| 作者姓名： | 花群义 杨云庆 董俊 杨晶焰 贾建军 周晓黎 徐自忠 |
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| 作者单位： | 云南出入境检验检疫局技术中心,云南,昆明,650228 |
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| 基金项目： | 云南省计委科技攻关重点项目 (98 6 36 ) |
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| 摘 要： | 为获得赤羽病病毒 (Akabanevirus ,AKAV )的核蛋白重组抗原 ,根据其基因序列(SmRNA)设计合成了 1对特异性引物 ,对AKAVN基因进行RT PCR扩增 ,产物大小约为 6 96bp ,回收纯化后 ,将其克隆至 pMD18 T质粒载体中 ,经核苷酸序列分析 ,与已报道的多株AKAV编码核衣壳蛋白N的SmRNA基因比较后发现 ,所测定毒株的核苷酸序列与TIN毒株的同源性高达 98.3% ,推测的氨基酸同源性为 97.6 % ,证实为AKAV的N基因。将该基因片段亚克隆插入pBAD/ThioTOPO表达载体 ,转化TOP10细胞 ,成功地构建了AKAVN基因重组表达载体。经L araboinose诱导表达 ,可稳定、高效地表达AKAV核蛋白抗原。表达蛋白为融合蛋白 ,分子质量约 4 2 .5ku ,其表达产量约占菌体总蛋白的 2 8% ,融合蛋白中含有AKAV特异性核蛋白抗原 ,可作为ELISA包被抗原
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| 关 键 词： | 赤羽病病毒 核蛋白基因 表达 ELISA |
| 文章编号： | 1000-6419(2003)10-0007-08 |
| 修稿时间： | 2003-07-21 |
Construction and prokaryotic expression of Akbane virus fusion N protein and its preliminary use in ELISA |
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| HUA Qun yi,YANG Yun qing,DONG jun,YANG Jing yan,JIA Jian jun,ZHOU Xiao li,XU Zi zhong. Construction and prokaryotic expression of Akbane virus fusion N protein and its preliminary use in ELISA[J]. Chinese Veterinary Science, 2003, 33(10): 7-14 |
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| Authors: | HUA Qun yi YANG Yun qing DONG jun YANG Jing yan JIA Jian jun ZHOU Xiao li XU Zi zhong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Akabane virus nucleocapsid protein gene expression ELISA |
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