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| 山羊关节炎脑炎病毒SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法的建立及应用 | |
| 作者姓名： | 汪伟 杜倩 韩知晓 辛佳亮 闫修魁 梁莹莹 朱远致 曹亮 孙文超 胡传活 郑敏 |
| 作者单位： | 广西大学动物科学技术学院;广西壮族自治区动物疫病预防控制中心;军事科学院军事兽医研究所;温州大学病毒学研究所 |
| 基金项目： | 广西自然科学基金项目(2012GXNSFAA053073);浙江省青年基金项目(LQ19C180001)。 |
| 摘 要： | 为建立检测山羊关节炎脑炎病毒(caprine arthritis-encephalitis virus,CAEV)的快速诊断方法,本研究根据CAEV甘肃株Gag基因设计1对引物,并以含有CAEV甘肃株全基因组序列的质粒pUC57-CAEV为模板,建立CAEV的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法,并验证其特异性、灵敏性和重复性。结果显示,本研究所建立的SYBRGreenⅠ荧光定量PCR检测方法的Ct值与标准品模板在1.19×109~1.19×10^1 copies/μL范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.997,斜率为-3.74,检测下限为1.19×10^1 copies/μL,且对痘苗病毒、山羊痘病毒均无扩增。重复性试验结果显示,批间与批内变异系数均小于1%,重复性好。本研究首次建立了CAEVGag基因的SYBRGreenⅠ荧光定量PCR检测方法,为CAEV的快速检测和病毒感染预防提供了技术手段。 |
| 关 键 词： | 山羊关节炎脑炎病毒 SYBR GreenⅠ 荧光定量PCR GAG基因 |
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