甲泼尼龙对鸡关节软骨细胞自噬的影响

为探究甲泼尼龙(MP)对关节软骨细胞自噬的影响,机械分离肉鸡膝关节软骨组织,剪碎后,0.25%胰蛋白酶消化30 min,在0.1%的透明质酸酶和0.2%的Ⅱ型胶原酶中消化12 h,于含10%胎牛血清的培养液中进行细胞培养。采用甲苯胺蓝、阿利新蓝染色法和PCR扩增鉴定关节软骨细胞,采用MP和三甲基腺嘌呤(3-MA)处理鸡关节软骨细胞。结果显示,MP促进软骨细胞自噬相关基因的显著表达,并降低细胞活性,3-MA对MP诱导的关节软骨细胞自噬有保护作用。本研究建立了原代肉鸡关节软骨细胞培养方法,初步揭示了MP及3-MA对软骨细胞自噬的作用机理。