| 猪巨细胞病毒gB基因优势抗原表位区的原核表达及间接ELISA方法的建立 |
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| 引用本文： | 刘骁,廖珊,朱玲,周远成,周璐. 猪巨细胞病毒gB基因优势抗原表位区的原核表达及间接ELISA方法的建立[J]. 中国兽医科学, 2013, 0(2): 152-158 |
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| 作者姓名： | 刘骁 廖珊 朱玲 周远成 周璐 |
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| 作者单位： | 四川农业大学动物生物技术中心;动物疫病与人类健康四川省重点实验室 |
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| 基金项目： | 四川省青年科技基金项目(200930421) |
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| 摘 要： | 扩增了猪巨细胞病毒(PCMV)gB基因的优势抗原表位区,将构建成功的gB基因优势抗原表位区原核表达重组质粒(pET32a-gB)转化入表达菌Rosetta(DE3)中进行表达,以表达的重组蛋白作为包被抗原建立了一种检测PCMV抗体的间接ELISA方法,并对该间接ELISA检测方法进行了优化。结果显示,最佳抗原包被浓度为1.9μg/mL,最佳血清稀释度为1∶160,二抗最佳稀释度为1∶10 000;当样品D450nm≥0.26时判为阳性,当样品D450nm<0.215时判为阴性,介于两者之间时判为可疑。用该间接ELISA方法对138份PCMV阴性血清与240份PCMV阳性血清进行检测的结果显示,它的特异性为97.83%,敏感性为97.9%,变异系数均小于10%。用该ELISA方法和Western-blot对184份临床样品进行检测,结果二者的符合率为92.4%。结果表明,该间接ELISA方法简便快捷,具有良好的特异性、敏感性及重复性,适用于对PCMV抗体的大规模检测。
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| 关 键 词： | 猪巨细胞病毒 原核表达 gB基因优势抗原表位区蛋白 间接ELISA |
Prokaryotic expression of immunodominant region of PCMV gB gene and development of an indirect ELISA for detecting antibodies against porcine cytomegalovirus |
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| LIU Xiao,LIAO Shan,ZHU Ling,ZHOU Yuan-cheng,ZHOU Lu. Prokaryotic expression of immunodominant region of PCMV gB gene and development of an indirect ELISA for detecting antibodies against porcine cytomegalovirus[J]. Chinese Veterinary Science, 2013, 0(2): 152-158 |
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| Authors: | LIU Xiao LIAO Shan ZHU Ling ZHOU Yuan-cheng ZHOU Lu |
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| Affiliation: | 1(1.Animal Biotechnology Center,Sichuan Agricultural University,Ya’an 625014,China;2.Key Laboratory of Animal Diseases and Human Health of Sichuan Province,Ya’an 625014,China) |
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| Abstract: | |
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