| 牛分枝杆菌CFP-10基因的原核表达及其表达产物的变态反应原性的鉴定 |
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| 引用本文： | 刘洪涛,宋 林,张海丽,尹 尧,邵建伟,高明春,王君伟.牛分枝杆菌CFP-10基因的原核表达及其表达产物的变态反应原性的鉴定[J].中国兽医科学,2014(4):346-350. |
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| 作者姓名： | 刘洪涛 宋 林 张海丽 尹 尧 邵建伟 高明春 王君伟 |
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| 作者单位： | 东北农业大学动物医学学院;哈药集团生物疫苗有限公司;国家奶牛产业技术体系; |
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| 基金项目： | 黑龙江省科技攻关项目(GA09B302);现代农业(奶牛)产业技术体系项目(CARS-37);国家科技支撑计划项目(2012BAD12B05,2012BAD12B03-3) |
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| 摘 要： | 以牛分枝杆菌基因组为模板,PCR扩增获得CFP-10基因,并连入pET-32a(+)载体,获得了重组质粒pET-32a-CFP-10。将重组质粒转入宿主菌大肠杆菌Rosetta,经IPTG诱导后,重组蛋白rCFP-10以可溶形式表达并被纯化,将rCFP-10在致敏豚鼠皮内做迟发型变态反应(DTH)检测,并以PPD作为阳性对照。结果显示,测得rCFP-10组豚鼠皮肤红斑直径平均值为10mm,接近于PPD组(13mm)。结果证明,以pET-32a(+)为载体进行原核表达,获得的重组蛋白rCFP-10依然具有较强的迟发型变态反应原性,同时也证明了CFP-10具有作为皮试诊断试剂抗原的潜力,这一结果为牛结核病新型DTH皮试诊断的研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | CFP- 迟发型变态反应 牛结核病 原核表达 |
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