| 非洲猪瘟病毒P54基因原核表达载体的构建与表达 |
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| 引用本文： | 侯艳梅,董志珍,赵祥平,李琳,肖妍,陈本龙,蔡国瑞,栾慎顺,王建华. 非洲猪瘟病毒P54基因原核表达载体的构建与表达[J]. 中国兽医科学, 2009, 39(4) |
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| 作者姓名： | 侯艳梅 董志珍 赵祥平 李琳 肖妍 陈本龙 蔡国瑞 栾慎顺 王建华 |
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| 作者单位： | 1. 天津出入境检验检疫局,天津,300456
2. 天津大学,农业与生物工程学院,天津,300072 |
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| 基金项目： | 进出境重大动物疫病预警、检测和处理技术研究项目 |
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| 摘 要： | 根据GenBank中非洲猪瘟病毒(ASFV)P54基因序列,设计合成了2对引物,采用PCR方法从ASFV DNA中分别扩增出了P54基因片段和经过改造的跨膜信号肽缺失的P54基因,将其克隆到表达载体pET28b中,构建了重组质粒pET-P54和pET-P54q,测序验证后转化入表达宿主菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE,Western-blotting检测.结果显示,经过改造的信号肽缺失的重组菌pET-P54q可表达出分子质量约24.5 ku的重组融合蛋白,表达的蛋白以可溶形式存在于菌体中,经镍柱亲和层析纯化可获得纯度较高的目的蛋白.纯化的蛋白能与ASFV阳性血清发生特异性的免疫印迹反应,证实,表达的蛋白具有较好的反应原性.
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| 关 键 词： | 非洲猪瘟病毒 P54基因 原核表达 |
Prokaryotic expression of African swine fever virus P54 gene |
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| HOU Yan-mei,DONG Zhi-zhen,ZHAO Xiang-ping,LI Lin,XIAO Yan,CHEN Ben-long,CAI Guo-rui,LUAN Shen-shun,WANG Jian-hua. Prokaryotic expression of African swine fever virus P54 gene[J]. Chinese Veterinary Science, 2009, 39(4) |
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| Authors: | HOU Yan-mei DONG Zhi-zhen ZHAO Xiang-ping LI Lin XIAO Yan CHEN Ben-long CAI Guo-rui LUAN Shen-shun WANG Jian-hua |
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