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| 猪传染性胃肠炎病毒TH-98株M蛋白基因的克隆及原核表达 | |
| 引用本文： | 吴凌,李一经,武心镇. 猪传染性胃肠炎病毒TH-98株M蛋白基因的克隆及原核表达[J]. 中国兽医科学, 2005, 35(11): 869-874 |
| 作者姓名： | 吴凌 李一经 武心镇 |
| 作者单位： | 1. 东北农业大学,动物医学院,黑龙江,哈尔滨,150030;黑龙江八一农垦大学,动物科技学院,黑龙江,大庆,163319 2. 东北农业大学,动物医学院,黑龙江,哈尔滨,150030 3. 大庆石油管理局,农工商牧业公司,黑龙江,大庆,163454 |
| 基金项目： | 黑龙江省科委“九五”攻关计划项目(GC01B510) |
| 摘 要： | 构建了TGEV TH-98株M基因序列的原核表达载体,利用RT-PCR方法从TGEVTH-98株中扩增出M蛋白基因,并亚克隆至原核表达载体pGEX-6P-1上,转化大肠埃希氏菌BL21(DE3)pLysS,用IPTG诱导重组菌株表达了融合蛋白。结果表明,从TGE TH-98株克隆到了M基因cDNA,该基因全长789 bp,与T014株、Purdue株、TFI株和96-1933株的M基因同源性分别为92.37%、98.35%、99.87%和96.96%。SDS-PAGE电泳结果显示,重组表达质粒获得了约57 ku的目的带,其中M蛋白的分子质量约为31 ku,与预期的结果一致;Western-blotting分析表明,融合表达产物可与TGEV全病毒制备的阳性血清发生反应。证实,TGEV的M基因高度保守,构建的M基因原核表达载体pGEX-6P-TM能在大肠埃希氏菌中获得高效表达。 |
| 关 键 词： | 传染性胃肠炎病毒 猪 M基因 克隆 测序 原核表达 |
| 文章编号： | 1000-6419(2005)11-0869-06 |
| 修稿时间： | 2005-05-17 |
Cloning and expression of membrane protein gene of TGEV TH-98 strain in Escherichia coli |
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| WU Ling,LI Yi-jing,WU Xin-zhen. Cloning and expression of membrane protein gene of TGEV TH-98 strain in Escherichia coli[J]. Chinese Veterinary Science, 2005, 35(11): 869-874 | |
| Authors: | WU Ling LI Yi-jing WU Xin-zhen |
| Abstract: | |
| Keywords: | TGEV swine M gene cloning sequence analysis prokaryotic expression |
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