抗病毒单克隆抗体的生产技术和应用(续)

杂交瘤的移植及克隆化:将每一个培养孔中有抗体产生的阳性初生杂交瘤,移植到一块新的96孔培养板的两个培养孔中。先用巴氏滴管或其它塑料吸管在原培养孔内吹打,使1°Hy悬浮,而后移植;同时在记录纸上注明培养孔位置第几排第几孔(即杂交瘤标号)。这时向两个新培养孔中各补饲0.1毫升H—T培养液,也向原来培养孔中补饲0.2毫升H—T培养液,继续放入CO_2温箱培养(留作1°备用培养物)。定时检查1°Hy的生长,一旦生长中的细胞使培养液变橙黄色,则可混合两孔的活细胞到—新的24孔微量培养板的培养孔中,并另外加入H—T培养液每孔0.3毫升。原来的两块96孔培养板的孔中继续各补饲0.2毫升H—T培养液(留作2°备用培养物)。当24孔培养板的各孔培养液再开始变黄时,各孔再分别补饲0.5毫升DMEM—F(防霉维持液)。这时,原始培养板即1~＃备用培养物可以淘汰。