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相似文献
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1.
用物理方法纯化猪附红细胞体抗原,用纯化抗原免疫兔制备超免疫血清,以辣根过氧化物酶标记葡萄球菌A蛋白作为二抗,建立了辣根过氧化物酶标记葡萄球菌A蛋白的酶联免疫吸附试验(PPA ELISA)检测方法。结果显示,用PPA ELISA方法检测猪血液中的附红细胞体,具有很高的敏感性和特异性,重复性良好,完全适用于猪附红细胞体病的实验室诊断。  相似文献   

2.
为评价金黄色葡萄球菌黏附素蛋白FnBPA A和FnBPA D基因表达产物的免疫原性,分别用纯化的重组原核表达蛋白FnBPA A和FnBPA D免疫新西兰白兔,通过ELISA方法检测免疫家兔血清的抗体效价,用双抗体夹心法检测细胞因子的表达水平及进行全血调理吞噬试验。结果显示,在三免后第7天抗体水平分别可达1∶12 800(FnBPA A)、1∶25 600(FnBPA D),并且FnBPA A免疫组的全血杀菌能力优于FnBPA D免疫组;同时,两者均能提高家兔体内IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ的表达水平,且FnBPA D组显著高于FnBPA A组(P0.05)。结果表明,FnBPA D基因较FnBPA A基因更适合作为奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌基因工程亚单位疫苗的候选基因。  相似文献   

3.
用光敏生物素标记从兔抗羊接触传染性脓疱性皮炎病毒超免疫血清中提取纯化的IgG ,把从蔗糖密度梯度离心纯化的病毒用 2 ME和NP4 0裂解后与重组转化菌 pGRL 4A和pGRH 3A一起进行SDS PAGE ,并进行转移电泳。对用光敏生物素标记的IgG进行Western blot ting印迹杂交检测。结果 ,检测到产生IgG的病毒囊膜蛋白有 5条 ,分子量分别为 12 5 .0、96 .0、83.0、5 6 .3和 4 2 .0ku ;检测到重组菌 pGRL 4A和 pGRH 3A可表达分泌其中的 3条囊膜蛋白 ,其分子量分别为 83.0、5 6 .3和 4 2 .0ku ;pGRL 4A的表达较强 ,对 4 2 .0ku蛋白的分泌量最高。所重组的病毒DNAHindⅢ /A片段中含有该病毒囊膜蛋白抗原基因  相似文献   

4.
通过生物信息学软件分析金黄色葡萄球菌转铁蛋白结合蛋白(StbA)的主要抗原表位区,PCR扩增StbA主要抗原表位区的编码序列;将该序列插入表达载体pGEX-4T-1中,测序验证后转化大肠杆菌BL21(DE3)进行IPTG诱导表达。结果表明,重组菌能表达出分子质量约为54 000u的重组融合蛋白。表达产物经亲和层析纯化后可获得较高纯度的目的蛋白。Western-blot检测证实该重组蛋白能与乳腺炎患病奶牛恢复期血清发生阳性反应。ELISA结果显示,重组蛋白免疫新西兰大白兔能产生高效价的抗血清,提示StbA主要抗原表位区能刺激机体产生强大的免疫应答,StbA是一个有潜力的保护性抗原候选分子。  相似文献   

5.
马流感病毒NP基因的原核表达及其抗原性分析   总被引:1,自引:0,他引:1  
采用RT-PCR方法从马流感病毒中国分离株A/马/新疆/07(H3N8)中扩增了NP基因片段,将其克隆到表达载体pET-30a(+)中,测序验证后转化入表达宿主菌Rosetta(DE3)中进行IPTG诱导表达。结果表明,重组菌表达出约64ku、以可溶性形式存在的重组融合蛋白,且在0.2mmol/L IPTG条件下诱导6h表达效果最好。表达产物经镍柱纯化后得到纯度较高的目的蛋白。经Western-blot和间接ELISA分析,纯化的蛋白只与抗马流感病毒阳性血清发生特异性反应,证实该蛋白具有良好的反应原性和特异性。  相似文献   

6.
鹅细小病毒野毒株VP3基因的原核表达及抗原性检测   总被引:4,自引:2,他引:2  
根据发表的鹅细小病毒(GPV)基因序列设计合成了2对检测GPV的特异性引物,用其对疑似小鹅瘟的病料进行PCR检测,经序列比对后确定为GPV感染;利用引物Gs/Ga扩增获得的GPV野毒株VP3基因,测序后将VP3基因连接到原核表达载体pET-30a上,获得重组质粒pET-30a-VP3,将其转化感受态菌Rosetta(DE3)pLysS中,经IPTG诱导,SDS-PAGE分析.结果显示,重组菌可表达出分子质量约为66 000 u的重组融合蛋白,表达的蛋白以包涵体形式存在于菌体中.表达产物经Ni2+亲和层析柱纯化,获得了纯度较高的目的蛋白.Western-blot分析结果显示,纯化的蛋白能与GPV阳性血清发生特异性反应,证实表达的蛋白具有较好的抗原性.  相似文献   

7.
采用RT-PCR方法从鸭源呼肠孤病毒DRV-GZ株中扩增出了S2基因片段,将其克隆到表达载体pET-28a( )中,测序验证后转化入表达宿主茵RosettaTM2(DE3)plysS,进行IPTG诱导表达.结果表明,重组菌可表达出相对分子质量约为50000的重组融合蛋白,在浓度为0.6 mmol/L的IPTG诱导4 h的情况下表达效果最好.表达的蛋白以包涵体的形式存在于菌体中.表达产物经Ni柱纯化后可得到纯度较高的目的蛋白.经Western-blot分析,所纯化的蛋白能与抗呼肠孤病毒DRV-GZ株阳性血清进行特异性的免疫印迹反应,证实表达的蛋白具有较好的反应原性.  相似文献   

8.
提取微小隐孢子虫鼠基因型卵囊总RNA,用RT-PCR扩增微小隐孢子虫子孢子表面抗原CP15/60基因并克隆到pMD18-T载体中.将鉴定正确的序列亚克隆于原核表达载体pET-28b(+),转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE和Western-blot分析,同时将重组蛋白免疫动物后检测血清抗体.结果显示,克隆的目的基因核苷酸序列与GenBank登录的序列的同源性为98.66%.目的基因在大肠杆菌中以可溶形式高效表达.表达的重组蛋白占菌体可溶性总蛋白的57.5%,纯化的重组蛋白纯度达95.2%.重组蛋白可被兔抗微小隐孢子虫血清特异性识别,用重组蛋白免疫3次后,兔血清特异性抗体达到较高水平.表明,该重组蛋白具有较好的反应原性和免疫原性.  相似文献   

9.
为研制葡萄球菌蛋白A(staphylococcal protein A,SPA)的相关免疫试剂盒,设计了1对引物,从金黄色葡萄球菌基因组中扩增出了876bp的细胞壁结合蛋白SPA基因,该基因编码292个氨基酸,包含了E、D、A、B、C 5个IgG结合结构域。构建了原核表达载体pET28a(+)-SPA,经IPTG诱导,表达出分子质量约35.0ku的SPA蛋白,并应用亲和层析柱纯化了SPA蛋白,Western-blot分析表明纯化的SPA蛋白具有生物学活性。  相似文献   

10.
非洲猪瘟病毒P54基因原核表达载体的构建与表达   总被引:1,自引:0,他引:1  
根据GenBank中非洲猪瘟病毒(ASFV)P54基因序列,设计合成了2对引物,采用PCR方法从ASFV DNA中分别扩增出了P54基因片段和经过改造的跨膜信号肽缺失的P54基因,将其克隆到表达载体pET28b中,构建了重组质粒pET-P54和pET-P54q,测序验证后转化入表达宿主菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE,Western-blotting检测.结果显示,经过改造的信号肽缺失的重组菌pET-P54q可表达出分子质量约24.5 ku的重组融合蛋白,表达的蛋白以可溶形式存在于菌体中,经镍柱亲和层析纯化可获得纯度较高的目的蛋白.纯化的蛋白能与ASFV阳性血清发生特异性的免疫印迹反应,证实,表达的蛋白具有较好的反应原性.  相似文献   

11.
The purpose of this article is to examine the relationship between per capita income and democracy. Namely, do increases in income per capita affect a regime’s level of democracy? The scholarly tradition has investigated this question over many years, and what we have learned about the actual association between these variables remains inconclusive. As opposed to producing yet another empirical analysis of this hypothesized relationship, this article sets forth to examine it via a new methodological approach. Applying the tools of meta-regression analysis to 33 individual empirical studies that investigate the relationship between income and democracy, this article finds that income has no statistically significant, quantitatively meaningful effect on democracy (understanding the latter as a graded concept). I also show that there is no theoretical or empirical reason to believe that this field of research is “haunted” by publication selection bias. Moreover, I identify a variety of systematic differences between these studies, that is, study heterogeneity, which explain why it is the case that after 60 years of research we still have not reached a consensus.  相似文献   

12.
《恐怖主义与石油》一书观点简介   总被引:1,自引:0,他引:1  
“9·11”事件拉开了战争史上新时代的序幕,国际恐怖分子将无孔不入,以各种手段制造无限大的恐怖和破坏效应。鉴于石油在当前世界经济与政治中的重要地位,针对世界石油供应的恐怖行动已不再是可能与否的问题,而是一个迟早的问题,国际社会应予以高度警惕。  相似文献   

13.
14.
《国际相互影响》2012,38(1):39-52

International and intercultural communication and their respective cognate constructs, political international and cultural international communication, are redefined and interrelated in order to create a clearer definitional base for theory building in communication among nations and peoples. International communication is any symbolic interaction between people of different nation states. Political international communication is politically significant symbolic internation between nation states. Intercultural communication is communication between people of different cultures in which cultural values are an obvious factor in the nature of the interaction and/or determining the outcome of the interaction. Cultural international communication is intercultural communication between people of different nation states. There are four advantages of this model over existing constructs. The model: (1) unifies yet distinguishes among each different type of communication (2) focuses attention on political significance (3) separates cultural international from intercultural communication (4) argues that international communication is inherently persuasive and that intercultural communication is an interpersonal transaction.  相似文献   

15.
InFebruarythisyear,thedelegationofChineseAs-sociationforInternationalUnderstanding(CAFIU)headedbyMr.LuoHaocai,Vice-ChairmanoftheNationalCommitteeoftheChinesePeople'sPoliti-calConsultativeConference(CPPCC)andVice-PresidentofCAFIUattendedinThailandthe″Sem-inaronChina-ThailandCultureandEconomicProsperity″,followedbyavisittoMyanmar.Asamemberofthedelegation,thevisithasmadefineanddeepimpressiononme.1.ThailandandMyanmararesimilarinarea,natu-ralenvironmentandsizeofpopulation,andboth…  相似文献   

16.
张磊 《国际观察》2002,(5):20-25
本文通过对全球化的分析,揭示了全球化对主权国家的冲击,指出全球化并不意味着国家形式的终结,只不过是相互依存状态下国家间关系的一种新的整合的开始.因此笔者认为,在西方国际政治学界颇受推崇的全球主义观点存在极大的缺陷.  相似文献   

17.
美洲玻利瓦尔联盟谋求创造一种新型区域一体化模式,从而替代美洲自由贸易区,在解决贫困与社会排斥的基础上实现拉美的真正一体化。联盟是拉美反对新自由主义斗争的产物,是拉美一体化进程的产物,是拉美民族主义和反美主义相结合的产物。它的替代性表现在:强调国家的作用,主张内生发展,对不同发展水平的国家进行区别对待,强调公民社会参与一体化进程,明确把消除贫困和社会排斥作为远景目标。联盟成立以来在经济领域、社会领域和政治领域取得一系列合作成就和影响力,但它同时也面临着一系列挑战,如过于依赖委内瑞拉的石油经济、联盟凝聚力问题,联盟理论与实践的脱节等。  相似文献   

18.
《国际资料信息》2002,(9):46-46
表1单位:%年平均变化值商品贸易世界贸易量 5.7 10.0 10.4 6.4 10.6出界贸易额(美元) 2.1 2.6 9.3 —1.2 —6.3出界贸易额(SDR~) 一0.6 0.1 3.2 3.2 —1.1出口 工业国家 6.1 9.6 9.0 5.7 10.9 发展中国家 6.9 12.0 12.3 9.1 12.7 燃料出口国 5.8 3.1 16.7 6.8 5.0 非燃料出口国 7.5 15.1 11.0 9.7 15.1进口 工业国家 6.6 11.1 9.2 5.8 10.0 发展中国家4.6 8.2 20.0 9.6 10.2燃料出口国 .2.4 .11.3 71.2 7.7 14.1非燃料出口国 7.4 12.7 10.8 10.0 9.5 —0.9 17.5 0.8 7.2 8.9资料来源:M“World Economic Outlook”,P.168,April,2002注~20…  相似文献   

19.
老挝人民淳朴善良 ,生性活泼乐观 ,能歌善舞。在老挝各地广泛流行着“咔”和“喃”两种民歌曲调 ,“咔”和“喃”就包含了“歌”和“舞”的意思。人们形容“咔”和“喃”是一种歌中有舞、舞中有歌的表演艺术 ,歌与舞就像红花与绿叶一样相互映衬 ,相得益彰 ,使人们在动听的歌声和美妙的舞姿中得到艺术的享受。在农闲或节假日 ,老挝人喜欢用“咔”和“喃”这种载歌载舞的形式 ,抒发内心情感 ,表达对自由幸福生活的向往。实际上 ,“咔”和“喃”是说、唱、舞交替进行的一种表演形式 ,根据地区各民族的不同 ,老挝北方地区大多称“咔” ,而南方地…  相似文献   

20.
2004年的国际恐怖与反恐斗争形势综述   总被引:9,自引:0,他引:9  
2004年国际恐怖主义再掀高潮,重大恐怖事件频繁发生。据不完全统计,全年共发生国际恐怖事件336起,造成2421人死亡,6774人受伤。虽然恐怖事件比2003年的380起略有减少,但伤亡人数远高于2003年(1804人死亡,5354人受伤)。可以看到,国际恐怖活动呈现出一些新特点,对部分国家的政局产生冲击,并影响到许多国家安全战略与政策的调整和制定。国际恐怖与反恐斗争之所以出现“反恐、反恐,越反越恐”的现象,说明目前国际社会在打击与遏制恐怖主义方面尚无良策。一、国际重大恐怖事件接连不断2004年世界各地恐怖事件继续频繁密集发生,重大恐怖事件尤为突…  相似文献   

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