应用SPA法鉴定猪丹毒杆菌的血清型的研究

迄今为止,猪丹毒杆菌血清型已报道有Ia、Ib、2、3、4、5……22及N型共24型。 近年来,随着对猪丹毒研究的深入,不同血清型猪丹毒杆菌与流行病学、致病力及免疫间的关系已为许多学者所重视。利用葡萄球菌A蛋白(Staphylococcal Protein A简称为SPA)作为一种特殊载体,进行细菌的定型(群),国内外已有不少报道。我们将猪丹毒杆菌特异性分型高免血清标记于SPA,鉴定猪丹毒杆菌血清型。确证它同样具有快速、敏感和简便等优点,现将111株不同来源的猪丹毒杆菌血清型鉴定的结果报道如下。 材料与方法     

葡萄球菌A蛋白对马属动物血清抗体亲和力的研究

葡萄球菌A蛋白(简称SPA)是大多数金黄色葡萄球菌细胞壁上的一种主要抗原成分,它能与人和多种哺乳动物血清IgG分子Fc段非特异性结合,而被结合的IgG本身并不丧失抗体活性,因而可作为一种抗IgG的广谱免疫学试剂。但一般认为马IgG不能同SPA反应。驴血清抗体能否与SPA起反应,尚未见有报道。我们采用酶联SPA的ELISA直接法和间接法测定了SPA对健康马、驴血清抗体和马传贫阳性马、驴血清抗体的亲和力。     

金黄色葡萄球菌Fc段受体结合蛋白A基因的克隆与原核表达

为研制葡萄球菌蛋白A(staphylococcal protein A,SPA)的相关免疫试剂盒,设计了1对引物,从金黄色葡萄球菌基因组中扩增出了876bp的细胞壁结合蛋白SPA基因,该基因编码292个氨基酸,包含了E、D、A、B、C 5个IgG结合结构域。构建了原核表达载体pET28a(+)-SPA,经IPTG诱导,表达出分子质量约35.0ku的SPA蛋白,并应用亲和层析柱纯化了SPA蛋白,Western-blot分析表明纯化的SPA蛋白具有生物学活性。     

用IgG-SPA菌体免疫法制备抗树鼩IgG免疫血清

自Forsgren(1966)证明金黄色葡萄球菌A蛋白(简称SPA)能与多种哺乳动物IgG的Fc段非特异结合的特性以来,SPA已被广泛应用于免疫学领域。以含SPA的菌体为抗原载体,结合人、小鼠、大鼠、猴血清中的IgG,免疫兔子或羊,制备出相应抗IgG免疫血清(张颖悟等,1983;臧星星等,1986),称之为IgG-SPA菌体免疫法。树鼩属于灵长目,有特殊的分类学地位,是一种新型的     

用SPA-ELISA诊断鸡新城疫

葡萄球菌A蛋白(Staphylococcus proteinA,SPA)能非特异性地吸附多种哺乳动物免疫球蛋白分子中的Fc段,因此,可以广泛地用它来代替第2抗体。若将SPA与辣根过氧化物酶(HRP)制成酶标SPA,可以作为一种广谱免疫学试剂直接和间接地检测不同动物种属的抗原或抗体,而不需制备各自相应的标记物,并且特异、稳定。鉴于目前尚未见有应用SPA-ELISA诊断鸡新城疫(ND)的报道,为了探讨本法用于检测鸡新城疫病毒(NDV)大分子抗原的可行性,我们开展本试验。     

一种新型广谱的生物制剂——Ⅲ型细菌性IgG Fc段受体

Ⅲ型细菌性IgG Fc段受体(TypeⅢ bacterialFc receptorof IgG,简称FcR)是存在于链球菌C群和G群某些菌株细胞壁上能与人和多种哺乳动物IgG的Fc段发生非特异结合的一种蛋白成分。目前已报道的能与人和不同动物IgGFc段发生反应的细菌性受体,除众所周知的葡萄球菌A蛋白(SPA)外,在链球菌属已发现四种类型的Fc受体。一般将SPA称为Ⅰ型FcR,它来自富含A蛋白的金黄色葡萄球菌,国际上以Cow-anⅠ株作为标准菌株;Ⅱ型FcR来源于链球菌属A群的某些菌株;Ⅲ型FcR见于C、G群链球菌的某些菌株;Ⅳ型FcR存在于G群链球菌;V型FcR存在于兽疫链球菌中。最近,Chhotwal等     

应用SPA—扫描免疫电镜技术诊断鸡传染性法氏囊病

目前,免疫电镜技术已广泛用于病毒检测、病毒分型和临床诊断。为了克服免疫电镜技术存在前带效应的影响。Katz等(1980)应用金黄色葡萄球菌作为固相,成功地建立了一种固相免疫电镜技术。此法具有简便、快速、敏感等特点。我们应用此法诊断鸡传染性法氏囊病(IBL),收到了较好的效果。 (一)材料与方法 1.金黄色葡萄球菌Cowan I株:购自中国兽药监察所,固体培养基培养。在制备葡萄球菌A蛋白(SPA)菌体稳定液前,间隔12小时传1代,连传12代。     

一种新的IgG结合物——链球菌蛋白G

链球菌蛋白G是A、C、G群链球菌的细胞壁内存在的一种表面蛋白。它具有与哺乳动物IgG结合的能力,由于G群链球菌的这种蛋白与IgG的结合能力最强,因此得名蛋白G。虽然早在1973年Kron-avall用致敏绵羊红细胞检测A、C、G群链球菌与γ球蛋白反应时就发现有26％的菌株能与γ球蛋白反应,但真正系统广泛地研究蛋白G的理化特性及实际应用,还是80年代的事情。现在已基本肯定蛋白G比葡萄球菌A蛋白(SPA)对IgG的结合更为优越,是一种新的更有效的IgG结合物,在免疫学研究方面将有可能取代SPA。     

应用Dot-ELISA检测肉品中沙门氏菌

(一)材料与方法1.载体:硝酸纤维素膜(2×8cm),浙江黄岩四青生化材料厂产品。2.沙门氏菌多价抗血清:成都生物制品研究所产品,重庆肉联厂提供。3.参考菌株:沙门氏菌(A～F群),重庆肉联厂提供;金色葡萄球菌(1800株)、猪丹毒杆     

葡萄球菌A蛋白在兽医学上的应用

早在1940年Verwey研究金黄色葡萄球菌型特异性抗原时,用化学方法提取到了一种蛋白质,称其为葡萄球菌A蛋白(Staphylococcal Protein A,简称SPA),以后Jensen(1959)、Lofkvist(1963)等相继对其进行了研究,并且都分离到了这种抗原。后来,Grov等(1964)用离子交换树脂的方法对这种抗原成分进行了系统分析研究,不仅证明它是一种蛋白质(含氮量为15.38％)而且指出其氨基酸含量占总量的99％,其中有:亮、缬、脯、丙、苏、甘、丝、谷A、天门冬A乃赖氨酸等10种氨基酸。由于A蛋白具有可与多种哺乳动     

64种中草药对猪丹毒杆菌的抑菌试验

在毛主席无产阶级革命路线指引下,遵照伟大领袖毛主席“阶级斗争、生产斗争和科学实验,是建设社会主义强大国家的三项伟大革命运动”的教导,为了对本县兽医常用中草药及其制剂进行科学鉴定,进一步探索治疗各种家畜传染病的有效中草药及其制剂,我们在县农林水利局、县人民医院有关部门的密切配合下,选择了一些本县兽医较常用的中草药和部分制剂,对生猪最常见的致病菌猪丹毒杆菌、猪肺疫杆菌、大肠杆菌、猪链球菌、葡萄球菌和普通药物常用鉴定菌枯草杆菌、八叠球菌等进行体外抑菌试验,并结合临床应用,进一步确定其疗效。现把64种中草药及其制剂对猪丹毒杆菌的抑菌试验报告如下。     

干燥猪瘟、猪丹毒“二价苗”的研究和应用

一、引 言 猪瘟和猪丹毒是猪的两种主要烈性传染病,对养猪事业威胁很大。以前防制这两种疫病所用的猪瘟兔化疫苗,和猪丹毒氢氧化铝甲醛菌苗与猪丹毒弱毒菌苗,由于要在猪身上分开平”的教导,根据猪病防治上多年来存在的问题,发扬了为革命敢于创新的精神,实行了大协作和“三结合”,于1970年5月开始,进行了《干燥猪瘟、猪丹毒“二价苗”的研究和应用》的研究工作。经过一年半的努力,初步完成了“二价苗”的研究和生产工艺的探讨,试     

应用酶联免疫吸附试验诊断弓形虫病

1984～1986年,本课题协作组在广西、北京、福建、安徽、黑龙江、浙江等省市的6个单位进行了弓形虫病酶联免疫吸附试验诊断方法的研究,建立了酶联免疫吸附试验(ELISA)。 葡萄球菌A蛋白—酶联免疫吸附试验(SPA—ELISA)固相免疫酶底物珠试验(DASS),玻片虫体过氧化物酶联免疫吸附试验(TSHE),玻片虫体—葡萄球菌A蛋白酶联吸附试验(TSSH)5种酶联试验方法,现汇总报告如下。     

应用IgG-SPA菌免疫法制备兔抗豚鼠IgG血清

第二抗体是免疫学研究及临床检验工作中经常应用的重要试剂之一,但目前制备第二抗体,仍多用常规的佐剂免疫法进行,既复杂又费时费力。笔者依据金黄色葡萄球菌细胞壁上的A蛋白,能与豚鼠IgG的Fc段结合的特性,将含A蛋白的葡萄球菌(SPA菌)与豚鼠全血清作用,制成IgG-SPA菌液,作为免疫原,给兔静脉注射,制备兔抗豚鼠的IgG血清,获得了较满意的结果。 (一)材料 1.菌种:含A蛋白金黄色葡萄球菌Cowan I,菌种编号26111,购自卫生部药品生物制品检定所。     

关于猪丹毒疫情的调查

六十年代以来,对猪普遍地进行了预防接种,猪丹毒病基本上得到了控制。但有些地区仍有散发流行。为了摸索发病规律,采取合理的防治措施,对猪丹毒疫情进行了调查研究。 (一)流行病学特点 近些年来,猪丹毒病出现以下新的流行特点: 1.易感年龄;收集的1966～1980年期间发生的657头猪丹毒病例中,40～100斤重架子猪602头,占91.62％;100斤以上肥育猪28头,占4.22％;100斤以上的种母猪10头,占1.52％,120斤以上的种公猪3头,占0.45％;40斤以下的仔猪13头,占1.98％。说明猪丹毒主要发生在40～100斤的架子猪中。     

斑点免疫金渗滤法检测猪生殖与呼吸综合征抗体的研究

应用提纯的猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗原包被硝酸纤维素膜,然后用胶体金标记的金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)建立了检测PRRS抗体水平的斑点免疫金渗滤法(DIGFA)。该法通过胶体金标记SPA直接显色,阳性者出现红色斑点,整个试验过程仅需5min即可判断结果;与猪瘟、猪伪狂犬病、猪细小病毒病阳性血清不发生交叉反应;纯化PRRSV抗原的最低检测量为0.0553mg mL,即55.3ng 点。对200份猪血清用该法与ELISA同时进行PRRS抗体检测,两种方法的符合率达98%。     

应用SPA免疫荧光法检测猪弓形体病抗体

本试验使用荧光标记的SPA检测弓形体病患猪血清并与间接血凝试验进行了对比。 (一)材料和方法 1.SPA免疫荧光试验: (1)冻干荧光葡萄球菌A蛋白(FITC—Protein A)系上海生物制品研究所生产。临用时测定效价,稀释作为染色单位。 (2)抗原:使用我室保存的弓形体2号株,感染小白鼠,3～4天取腹水,注入消毒平皿内,大部分白细胞能附于平皿上,轻轻倒出悬液,加胰蛋白酶消化提纯,涂片吹干,丙酮固定,保存于低温冰箱内备用。     

绵羊肺腺瘤病——人细支气管-肺泡细胞癌的类似物

绵羊肺腺瘤病(Sheep pulmonary adenomatosis, SPA)是一种接触传染性肿瘤病。就其性质来说,用绵羊肺癌(sheep pulmonary carcinoma, SPC)一词也许比SPA更恰当一些。SPA与人的细支气管-肺泡细胞癌(bronchiolo-alveolar cell carcinoma, BAC)在起源、组织学特征和超微结构等方面都相类似,所以受到医学界和兽医界的共同关注,因为SPA的自发性与地方流行性,比起实验动物模型更接近于人的BAC。     

SPA协同凝集试验诊断兔瘟病

1985年元月起在我省爆发了一种疑似兔瘟病,我们利用SPA协同凝集试验对从长沙、益阳、邵阳、湖南医学院动物室等几个疫区采取的56份病科进行检测,现将诊断结果报道如下。 (一)材料和方法 1.葡萄球菌:从遵义医学院购得。 2.标准阳性抗原:系南京农业大学惠赠。 3.1∶10正常兔肝悬液:用由湖南省生物药品厂购买的健康兔制备。 4.1％人“○型”红细胞:从湖南医学院购得。     

酶联葡萄球菌A蛋白检测马传贫抗体的研究

鉴于SPA能与人和多种哺乳动物IgG分子Fc段相结合,故可用一种酶标记物来检测不同种属动物血清中的各种抗体,而无需制备各自相应的标记物,因此酶联SPA的应用有利于ELISA技术的推广应用。目前,国内外尚未见将酶联SPA应用于马传贫抗体检测的报道。我们先通过试验确证了酶联SPA与单独的马、驴血清抗体不能结合,但是它可以与结合了马传贫病毒抗原的抗体发生反应,这就为用酶联SPA检测马传贫抗体的研究提供了理论依据。藉此,试图用酶联SPA代替常规ELISA中的第二抗体,建立检测马、驴血清中马传贫病毒抗体的SPA-ELISA间接法。此研究对建立一种简便、快速、特异、敏感性高,通用于马属动物的马传贫诊断方法具有一定的实用价值。