猪传染性胃肠炎病毒的血凝作用

将猪传染性胃肠炎病毒（ＴＧＥＶ）Ａ株在ＩＢＲＳ２细胞上增殖，培养物经差速离心浓缩后与鸡红细胞出现了高凝集价（２８），这种凝集作用能被兔抗ＴＧＥＶ高免血清所抑制。试验的最适反应条件为体积分数０．５０％红细胞４℃作用１ｈ。通过反复试验，建立了一种简单实用的血凝抗原制备方法，病毒培养液不需浓缩可直接应用。     

用反相高效液相色谱法测定犬血清中吡喹酮浓度的研究

给试验犬按１０ｍｇ／ｋｇ剂量一次肌肉注射吡喹酮后，用反相高效液相色谱法测定血药浓度及药代动力学。检测限为３．８ｎｇ，最小检测浓度为１９ｎｇ／ｍｌ。血清中吡喹酮浓度在０．０８～２．５６μｇ／ｍｌ范围内呈良好的线性关系，相关系数ｒ＝０．９９９９，回收率为１０１．３２％±２．３４％。犬注射吡喹酮后，分布半衰期不足０．５ｈ，达峰时间为１ｈ，消除半衰期为４ｈ，２４ｈ后基本无残留。     

禽流感实验室诊断方法(续前)

６．２酸沉淀法浓缩鸡胚尿囊液中的ＡＩＶ群特异性抗原将疑似ＡＩＶ感染的鸡胚尿囊液置４℃预冷。用１ｍｏｌ／Ｌ的ＨＣｌ将预冷尿囊液ｐＨ调至４．０（±０．５），一般１ｍＬ尿囊液需１ｍｏｌ／Ｌ的ＨＣｌ０．０３ｍＬ。将酸化的尿囊液冰浴６０ｍｉｎ。４℃１０００ｇ离...     

用氯化铬联结病毒与绵羊红细胞的被动血凝试验

建立的用低浓度氯化铬溶液作联结剂将蛋白质抗原联结于绵羊红细胞表面，用于被动血凝试验（ＰＨＡ）的方法显示，绵羊红细胞在联结前用０．２５％胰酶处理，可显著提高抗原与红细胞的联结效力；用联结蛋白相对应的抗血清检测，滴度可达１：２６２１４４０；被联结蛋白浓度由前人试验所获得的最低３ｍｇ／ｍｌ降低到０．２ｍｇ／ｍｌ，从而可用于低蛋白浓度的病毒的联结。     

鸡腺胃型传染性支气管炎的诊断及病毒分离鉴定

天津市部分鸡场发生一种以病鸡极度消瘦、拉稀和死亡为主要特征的传染病，经鉴定确诊为鸡腺胃型传染性支气管炎（ ＧＩＢ） ，并分离出ＩＢＶ ＪＢ９７０２ 株，ＨＡ 效价为２１２，ＥＩＤ５０ 为１０ －６．８１／０ ．２ ｍ Ｌ。病毒干扰试验中，ＩＢＶＪＢ９７０２ ＋ ＮＤＶ ＬａＳｏｔａ接种鸡胚ＨＡ 效价为２４～６ ，ＬａＳｏｔａ 接种鸡胚ＨＡ 效价为２１０～１１ ；用ＩＢＶ ＪＢ９７０２ 病毒液１∶１０ 稀释后感染经ＩＢＶ Ｈ１２０ 弱毒疫苗免疫雏鸡，发病８／１０ ，死亡３／１０ 。     

贵州省鸡减蛋综合征病毒分离株的生物学特性鉴定

从贵州省出现产蛋下降等症状的鸡群中分离出１株病毒，命名为ＨＳ１。该病毒对鸭胚致死率达５５６％～６６７％；在尿囊液中产生高效价的红细胞凝集素，第７代鸭胚尿囊液的血凝效价达到２１５～１８；在ＤＥＦ单层细胞上生长良好，并引起明显的细胞病变，感染细胞的核内观察到嗜碱性包涵体；将分离毒株回归蛋用鸡复制出与自然病例相类似的临床症状，全部感染鸡都产生ＥＤＳ血清抗体；病毒呈球形粒子，直径７０～８０ｎｍ，无囊膜，对氯仿、乙醚不敏感；能凝集鸡、鸭、鹅的红细胞，不凝集哺乳动物的红细胞；病毒核酸类型是ＤＮＡ，不分节段，分子含有３３６ｋｂ。在交叉血细胞凝集抑制试验中，分离毒株对红细胞的凝集特性能够被ＡＶ１２７超免疫血清所抑制，而不与新城疫阳性血清、正常健康鸡血清发生交叉反应；在病毒中和试验中，ＨＳ１与ＡＶ１２７毒株能够发生交叉中和反应，显示它们具有相同的抗原关系。根据对病毒分离株的致病性、血凝谱、理化特性和血清学关系的鉴定，证明从贵州分离的ＨＳ１与国际标准毒ＡＶ１２７属于同一血清型，是１株ＥＤＳ病毒。     

以包涵体形式表达的猪带绦虫六钩蚴重组抗原的复性与纯化

应用比浊法、可溶性蛋白百分比、夹心ＥＬＩＳＡ及变性与非变性ＳＤＳＰＡＧＥ等方法来评价猪带绦虫六钩蚴重组抗原的不同复性条件。透析法复性,透析液为含２ｍｏｌ／Ｌ尿素,１６０μｍｏｌ／ＬＰＥＧ４０００,１．０ｍｍｏｌ／Ｌ０．１ｍｍｏｌ／ＬＧＳＨＧＳＳＧ的ｐＨ９．０的ＴｒｉｓＨＣｌ缓冲液,蛋白浓度为２～５ｍｇ／ｍＬ,以静置缓慢透析为佳,上述条件任意缺一或快速透析,则免疫活性下降,二聚体、多聚体明显增加;稀释法复性,复性液为上述透析液,蛋白浓度０．１ｍｇ／ｍＬ,以分步缓慢稀释为佳。透析法复性与稀释法复性最佳条件的实验结果无显著差别。透析法复性的重组蛋白进行Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ６ＦＦ分子筛凝胶层析,出现２个主峰,收集有免疫活性的第１峰进行ＤＥＡＥＳｅｐｈａｒｏｓｅ离子交换层析,用含５０ｇ／ＬＮａＣｌ、ｐＨ９．０的ＴｒｉｓＨＣｌ缓冲液洗脱,亦出现２个主峰,收集有免疫活性的第１峰。ＳＤＳＰＡＧＥ显示该峰为单一蛋白条带,蛋白纯度大于９０％。夹心ＥＬＩＳＡ检测免疫活性,每１ｍｇ蛋白的效价大于６×１０５。     

双甲脒乳油治疗猪疥癣

双甲脒乳油治疗猪疥癣方法取１２．５％的双甲脒乳油４０ｍｌ，加常水１０Ｌ，配成０．２５％浓度的乳状液，用喷雾法对患猪体表及圈舍地面、墙壁进行全面喷洒，间隔５～７天后再重复１～２次。笔者采用此法治疗患猪３１７头，１次喷雾治愈２３８头，占７５．１％，２次喷...     

中药免疫增强剂提高鸡免疫功能的研究

以鸡传染性腔上囊病（ＩＢＤ）和新城疫（ＮＤ）为模型研究自拟中药免疫增强剂（简称补益方１、补益方２）对ＩＢＤ弱毒苗和油乳剂灭活苗、ＮＤ油乳剂灭活苗的免疫增强效果；用间接ＥＬＩＳＡ法测定鸡血清ＩＢＤＶ抗体效价，以微量血细胞凝集抑制试验测定血清ＮＤ血细胞凝集抑制（ＨＩ）抗体效价。结果表明，补益方１与ＩＢＤ弱毒苗和油乳剂灭活苗配合使用，血清ＩＢＤＶ抗体Ｐ／Ｎ值在测定期内（４～３９ｄ）都高于免疫对照组；补益方１和补益方２对ＮＤ油乳剂灭活苗均有一定的免疫增强效果，其中补益方２的免疫增强效果（平均为１．０２０）明显优于补益方１（平均为０．４１０），从而认为补益方２与ＩＢＤ疫苗、ＮＤ疫苗配合使用具有免疫增强作用，可以提高机体体液免疫水平。     

鸡病毒性关节炎JN－1株疫苗的免疫研究

将鸡病毒性关节炎病毒（ＡＶＡＶ）Ｊ－１株经一系列培养和蚀斑克隆，筛选出一株蚀斑大小为２．７～３．１ｍｍ的克隆株（ＪＮ－１株）。该株分别以１０￣（５·７２５）ＴＣＩＤ＿（５０）足掌皮下注射和１０￣（４·７２５）～１０￣（６·７２５）ＴＣＩＤ＿（５０）肌肉注射１日龄肉鸡，以５×１０￣（６·７２５）ＴＣＩＤ＿（５０）肌肉注射肉用种鸡，均不产生任何临床症状和病理变化；在敏感雏鸡体内传代５次和鸡胚细胞内传代１０次，无毒力返强现象。雏鸡的最低免疫剂量为１０￣（３·７２５）ＴＣＩＤ＿（５０），抗体持续时间达９个月以上。用ＪＮ－１株免疫１日龄肉用雏鸡后７、１４、２１和２８天分别用强毒于足掌皮下攻击，临床保护率分别为２／１０、９／１０、１０／１０、１０／１０，病理保护率分别０／１０、７／１０、９／１０、１０／１０。抗体应答反应和特异性淋巴细胞转化试验证明，ＪＮ－１株的免疫作用是由细胞免疫和体液免疫共同完成。体外中和病毒试验显示，ＪＮ－１株抗血清能中和Ｊ－１、Ｓ＿（１１３３）、ＦＤＯ和Ｈ＿（９３０７）株。在５个有疫情的肉用种鸡场共免疫２８０００余只仔鸡和种鸡，免疫后再无ＡＶＡ疫情发生。     

一种新发现的雏鹅传染病研究

１９９３年以来，四川省一些地区的３～３０日龄雏鹅发生一种传染病，死亡高峰期１０～１８日龄，发病率３０％～１００％，死亡率２５％～７５％，有时可高达１００％，其临床症状和病理变化与小鹅瘟有很多相似之处。利用原代鸭胚成纤维细胞培养及蚀斑克隆技术从不同地区分离到１０株病毒，分离病毒呈球形或椭圆形，无囊膜，直径７０～９０ｎｍ，不凝集鸡、鸭、鹅、鸽、黄牛、水牛及猪的红细胞，对氯仿不敏感，５６℃作用３～５ｈ不影响病毒的致病性，病毒核酸类型为ＤＮＡ。１０株病毒的抗原性一致，但与鸭瘟病毒（ＤＰＶ）和小鹅瘟病毒（ＧＰＶ）没有中和抗原相关性。分离的病毒通过人工感染鹅可以复制出病例。根据分离病毒的部分特性，初步将其归为腺病毒，暂定病名为雏鹅新型病毒性肠炎（ＮＧＶＥ）。利用生物学技术获得１株对雏鹅不致病而具有良好免疫原性的弱毒株（ＣＮ４０），对种鹅开产前进行免疫，可使下一代获得有效的免疫保护（５～６个月）。利用分离毒制备的超免疫血清对雏鹅具有良好的预防和治疗作用。     

Vero-2和MA-104细胞系染色体组型分析与致癌─致瘤性研究——在犬五联疫苗制备中替代BHK-21细胞系细胞株的筛选和检定

在用纯化３代的猫肾原代细胞（ＦＫＣ）和犬肾原代细胞（ＣＫＣ）皮下接种裸鼠无致癌致瘤性,以人类子宫颈癌细胞系（Ｈｅｌａ）超二倍体ＫＢ株、Ｘ株及超二倍体和亚四倍体ＮＭ２０／Ｘ株皮下接种裸鼠产生进行性恶性肿瘤比率分别为１０／１０,２５／２５和５／５的前提下,非洲绿猴肾细胞系亚二倍体（Ｖｅｒｏ２）ＪＣ株５～１９代和超二倍体ＹＡ株１２～１８代分别皮下接种２０和１０只裸鼠,均未产生肿瘤,恒河猴肾细胞系亚四倍体（ＭＡ１０４）ＪＣ株４代皮下接种５只裸鼠亦未产生肿瘤。不同株的Ｈｅｌａ和地鼠肾细胞系（ＢＨＫ２１）在３．３ｇ／Ｌ琼脂中均具有抛锚独立生长特性,并在终浓度３．１２５～２００ｍｇ／ｍＬ植物凝集素（ＰＨＡ）作用下出现凝集现象,而ＦＫＣ、ＣＫＣ及Ｖｅｒｏ２细胞系ＪＣ株、ＹＡ株既不具有抛锚独立生长特性,在不同浓度ＰＨＡ作用下也不发生凝集,符合非肿瘤源性细胞的特性。因此,Ｖｅｒｏ２细胞系ＪＣ株可用作病毒疫苗毒株的传代培养,而Ｖｅｒｏ２细胞系ＹＡ株和ＭＡ１０４细胞系ＪＣ株则不适宜。     

阿维菌素浇注剂对牛皮蝇第三期幼虫的驱杀效果试验

将自然感染牛皮蝇第三期幼虫的杂交牛分成５组，每组１０头，第１～４组分别用阿维菌素浇注剂（阿维必淋）０．２，０．４和０．５ｍｇ／ｋｇ体重剂量皮肤浇注给药和阿维菌素注射液０．２ｍｇ／ｋｇ体重剂量皮下注射，第５组为不治疗对照组。治疗后第７，１５，３０和４５ｄ连续检查结果，在阿维菌素浇注剂０．２ｍｇ／ｋｇ和０．４ｍｇ／ｋｇ剂量组各发现１头牛皮下有１个第三期幼虫存活，两组的驱杀率和治愈率都分别为９９．４％和９０．０％；阿维菌素浇注剂０．５ｍｇ／ｋｇ剂量组和阿维菌素注射液０．２ｍｇ／ｋｇ剂量组牛没有发现存活的第三期幼虫，驱杀率和治愈率均为１００％。     

应用间接酶联免疫吸附试验检测鸡传染性支气管炎抗体的研究

建立了辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）标记兔抗鸡ＩｇＧ检测鸡传染性支气管炎（ＩＢ）抗体的间接ＥＬＩＳＡ法，其抗原包被浓度为４ｍｇ／Ｌ，待检血清与酶结合物的最佳稀释度各为１８０，酶结合物、抗原抗体的作用时间分别为６０ｍｉｎ，３０ｍｉｎ，封闭液的浓度和作用时间分别为１％和６０ｍｉｎ，ＯＤ值大于０．２８７的判为阳性。用此法检测经ＩＢＶ灭活苗免疫鸡所产蛋孵出的雏鸡的母源抗体，ＯＤ值的Ｐ／Ｎ值为６．０，１５ｄ后降至２．０以下。检测１１日龄经ＩＢＶＨ１２０弱毒苗免疫雏鸡的抗体，其Ｐ／Ｎ值于免疫后第１８ｄ达峰值（３．７）。调查的５４群发病鸡，其抗体阳性率为１００％，Ｐ／Ｎ值为４．０～７．５     

鸡卡氏住白细胞虫病的诊治

鸡卡氏住白细胞虫病的诊治鸡卡氏住白细胞虫病在本地区比较普遍，笔者在１９９７年７～９月共检查１６个鸡场，其中雏鸡的发病率为１．８％～１２．０％，育成鸡为１．２％～５．０％，产蛋鸡为２．６％～２５．０％；雏鸡感染死亡率为１０．０％～７３．０％；产蛋鸡感染...     

苏醒灵4号的毒性研究

通过急性、亚急性毒性试验，致突变性试验，其结果苏醒灵４号急性中毒呈一过性轻度兴奋，对小鼠腹腔注射ＬＤ＿（５０）为５４．４±３．７ｍｇ／ｋｇ，大鼠腹腔注射ＬＤ＿（５０）为７５．０±１０．２ｍｇ／ｋｇ；经给药１５天，仅高剂量组对大鼠有一定毒性；各试验组微核率（２．４０‰～２．５０‰）在正常范围内，精子畸形率（２．６１％～３．１５％）与阴性对照组无显著差异。     

青海省河卡种羊场绵羊体内的矿物元素检测

经检测河卡种羊场绵羊缺Ｎａ，Ｓｅ，Ｍｇ，Ｓ，Ｐ，Ｃｕ，Ｚｎ，Ｉ矿物元素。夏季泌乳母羊唾液ＮａＫ＝５．７１，全年粪Ｎａ浓度为５６２～９３２ｍｇ／ｋｇ。多数季节血浆Ｓｅ浓度为１．０１～１．３９ｍｍｏｌ／Ｌ，粪Ｓｅ浓度为０．０２４～０．０４５ｍｇ／ｋｇ。     

我国规模化肉牛场牛病毒性腹泻-粘膜病流行状况监测

从山东、河南和河北省的６个规模化肉牛场随机采肉牛血清８９份，直肠粪拭子１６５份，分别用微量细胞中和试验和双抗体夹心ＥＬＩＳＡ试剂盒检测牛病毒性腹泻粘膜病（ＢＶＤＭＤ）的抗体和抗原。诊断结果：ＢＶＤＭＤ中和抗体阳性率为４６．２％～６５．０％；ＢＶＤＭＤ病毒抗原阳性检出率为５．１％～７７．２％。从而证实我国中原地区肉牛群中存在有ＢＶＤＭＤ。     

甘肃省肃南县种羊场放牧绵羊体内的矿物元素检测

肃南县种羊场泌乳母羊唾液的Ｎａ∶Ｋ＝１４∶１，是缺钠。秋冬季节血浆无机硫为０．４７ｍｍｏｌ／Ｌ。粪镁浓度７２００～８３００ｍｇ／ｋｇＤＭ。血浆硒水平偏低，粪硒浓度＜０．１ｍｇ／ｋｇＤＭ     

斑点免疫金银染色法检测鸡传染性支气管炎病毒抗原的研究

用建立的斑点免疫金银染色（ＤｏｔＩＧＳＳ）法检测鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）抗原,确定兔抗ＩＢＶ血清工作浓度为１∶４００,ＳＰＡ胶体金探针的工作浓度为１∶８０,该法对纯化ＩＢＶ抗原的最低检出量为０．４３１４ｎｇ／点。用ＤｏｔＩＧＳＳ与斑点酶联免疫吸附试验（ＤｏｔＥＬＩＳＡ）同时检测１５只人工感染ＩＢＶ鸡的气管、肺、肾病料,ＩＢＶ阳性检出率均为１００％;对３２份疑似ＩＢＶ感染鸡病料检测,ＩＢＶ阳性检出率分别为３４．５％和３１．０％,阳性符合率为９３．３％（Ｐ＞０．０５）。