A型产气荚膜梭菌引起的雏鸡急性肠炎的诊断

已知A、B、C、D、E各型产气荚膜梭菌可对牛、羊、猪及人致病。K(?)hler(1971)认为民主德国的鹌鹑病(家禽的溃疡性肠炎)的病原是一些A型产气荚膜梭菌的强毒菌株。国内因A型产气荚膜梭菌引起鸡的疾病报导罕见。1983年在新疆石河子星火公社某农家所养的30～40日龄雏鸡突然发病死亡,经作者诊断为A型产气荚膜梭菌引起的雏鸡急性肠炎。     

牛产气荚膜梭菌病自然病例的病理学观察

牛产气荚膜梭菌病是由产气荚膜梭菌引起的条件性高度致死性传染病 ,其特征是发病急 ,病程短 ,死亡快。本病病原血清型主要是A型 ,也有C型和D型。 2 0世纪 90年代 ,该病在我国频繁发生 ,给养牛业造成较大经济损失。为探讨本病的病理变化特征和发展规律 ,给诊断该病提供科学依据 ,笔者对病原分离鉴定为产气荚膜梭菌的自然病死牛的组织病理学变化进行了观察。1　材料和方法1.1　病料采集　对经流行病学调查、临床症状观察疑似产气荚膜梭菌病的自然病死牛立即解剖 ,无菌采集肝、脾、肠系膜淋巴结以及病变小肠 15cm以上 ,系统观察各实质脏器的…     

家畜产气荚膜梭菌病的病理形态学观察

自１９９０年宁夏回族自治区泾源县发生以牛为主的猝死症以来,发病范围逐年扩大,发病动物除牛外还见于羊、猪、鹿和马属动物。现已查明,该病是由产气荚膜梭菌引起的肠毒血症。鉴于本病的病理形态学鲜有报道,故对其进行了观察和研究。１材料与方法１．１材料在进行流行...     

家畜产气荚膜梭菌病免疫预防试验

家畜产气荚膜梭菌病免疫预防试验陈洪科侯安祖李玉兰靳冬（河南省兽医防治站郑州４５０００２）１９８５年，在河南省周口、商丘等地的黄牛零星发生以发病急、死亡快、致死率高、实质器官严重出血为特征的猝死症，仅见于犊牛，其他家畜没有发病死亡。１９９２年以后，该病...     

产气荚膜梭菌β毒素和ε毒素以及腐败梭菌α毒素三联基因工程灭活疫苗的制备与免疫效力评价

为了获得高表达量的重组C型产气荚膜梭菌β毒素,鉴定其致死性和反应原性,并评价其与D型产气荚膜梭菌ε毒素和腐败梭菌α毒素共表达产物联合制成三联基因工程灭活疫苗的免疫保护效力。设计含不同酶切位点的2对引物,PCR扩增C型产气荚膜梭菌β毒素基因cpb1和cpb2,将二者克隆至pRSFDuet-1质粒,转化大肠杆菌BL21 (DE3),自诱导培养基诱导2段基因共表达。用SDS-PAGE和Western-blot以及小鼠毒性试验、抗毒素血清和中和试验对表达产物进行鉴定。将诱导收获的大肠杆菌以及D型产气荚膜梭菌ε毒素和腐败梭菌α毒素的共表达产物1∶2配比灭活制成三联灭活铝佐剂疫苗,以每只1 m L剂量皮下免疫家兔2次后,测定血清中和抗体效价,用1 MLD的C、D型产气荚膜梭菌毒素和腐败梭菌毒素分别攻击。结果显示,所构建的重组大肠杆菌BL21(pRSFDuet-cpb1-cpb2)能够表达重组β毒素,产物能够与C型产气荚膜梭菌抗毒素血清反应,且具有小鼠致死毒性,抗毒素血清可以将其毒性中和;制成联合疫苗免疫家兔,免疫血清对C型产气荚膜梭菌毒素的中和抗体效价为8 MLD/0.1 m L,对D型产气荚膜梭菌毒素的中和抗体效价为45 MLD/0.1 m L,对腐败梭菌毒素的中和抗体效价为1.5 MLD/0.1 m L;用3种毒素攻击免疫组家兔均全部保护,对照组全部死亡,达到《中华人民共和国兽药典三部(2015版)》效力检验标准。本研究为羊猝狙、肠毒血症和快疫三联疫苗的研制提供了试验基础。     

牛产气荚膜梭菌病三价浓缩灭活苗免疫效力试验及免疫持续期测定

兰州生物药厂研制的牛产气荚膜梭菌三价浓缩灭活苗 ,经免疫动物血清抗体测定及本动物试验 ,效果良好。为了解血清抗体水平与攻毒耐受力间的关系及对本动物的免疫持续期 ,特进行了本试验。1　试验材料1.1　疫苗　牛产气荚膜梭菌三价浓缩灭活苗 ,共 3批 ,即960 2、960 6和 9610批。1.2　毒素　产气荚膜梭菌Ａ、Ｃ、Ｄ型毒素 ,小白鼠静脉测定毒价分别为 5 0 0、3 3 3和 2 0 0 0ＭＬＤ/ｍＬ。1.3　试验牛　免疫效力试验用 1岁以内黄牛 ,体重 80ｋｇ左右 ,性别、毛色不限 ,购自甘肃省临洮县 ;免疫持续期试验用临洮县农户所养的乳牛。2　方法与结…     

产气荚膜梭菌多联浓缩苗对牛的田间免疫试验

产气荚膜梭菌多联浓缩苗对牛的田间免疫试验杜莲洪马乐英蒋祯吕红杨爱玲（农业部兰州生物药厂７３００４６）产气荚膜梭菌（即魏氏梭菌）多联浓缩苗是兰州生物药厂近年研制的预防牛、羊等动物产气荚膜梭菌病的生物制品，制苗菌株包括Ａ，Ｂ，Ｃ，Ｄ四个型，浓缩比例为５１...     

暴发两起马属动物产气荚膜梭菌病

产气荚膜梭菌 (魏氏梭菌 )病是家畜的一种急性传染病 ,病原为Ｄ型或Ｃ型产气荚膜梭菌 ,特点是发病急、传染快、病程短、死亡率高 ,常发生于绵羊 ,山羊也可发病 ,该病暴发于马属动物尚属罕见。笔者在兽医诊疗工作中 ,曾遇到两起小区域暴发于马属动物的产气荚膜梭菌病。病例 1　 1995年 12月 2 9日 ,民和县东沟乡麻地沟村范某饲养的 10岁黑骡 ,晚间无任何病症进圈而早晨死于圈内 ,因死因不明而未做尸体剖检即将死尸深埋。 1996年 1月 1～ 8日 ,该村和相邻的张家庄村连续发病、死亡 18匹马属动物 (骡 15匹、驴 2匹、马 1匹 ) ,疫情上报后 ,立即…     

鸡产气荚膜梭菌遗传多样性的REP-PCR分析

为探讨鸡产气荚膜梭菌流行现状的调查方法,采用REP-PCR(repetitive extragenic palindromicPCR)技术对四川省10个规模化鸡场分离得到的34株A型产气荚膜梭菌进行了遗传多样性分析,并与AFLP(amplified fragment length polymorphism)方法进行了分型比较.结果显示,尽管REP-PCR分型方法只能将34株产气荚膜梭菌分为7个亚型,但是,仍然表现出对产气荚膜梭工菌菌株的较高的鉴别能力,不失为一种简便、快速、可靠的产气荚膜梭菌分型方法.经对亚型分布情况进行分析.表明产气荚膜梭菌的流行特点与地区差异相关,不同鸡场产气荚膜梭菌的亚型差异明显,而同一鸡场的亚型较单一,以一种亚型为主,交叉有少数其他亚型;优势基因型为REP-PCR基因1型、2型和3型.证实,REP-PCR技术适用于鸡产气荚膜梭菌遗传多样性分析.     

梅花鹿猝死症的病原诊断及药敏试验

近年来,许多地区有关于牛、羊、猪发生猝死症的报道,其发病原因,河南、吉林、四川、青海、甘肃多为产气荚膜梭菌,山东的山羊发病主要是凝集芽胞杆菌和肺炎克雷白氏菌,还有一些地区分离到溶血梭菌及腐败梭菌,部分地区认为是氟乙酰胺中毒。1998年,山东省滨洲市某鹿场饲养的?..     

猪产气荚膜梭菌病的诊断

20 0 0年 9月 ,广西某种猪场发生一种原因不明的急性致死性疾病。笔者现场调查 ,采集病料 2份 ,经实验室检验 ,鉴定为Ａ型产气荚膜梭菌引起的肠毒血症。1　发病情况2 0 0 0年 8月上旬 ,广西某种猪场从外地引进种猪数百头 ,猪入场前注射过猪瘟疫苗及猪巴杆菌病、猪丹毒二联苗 ,当年 9月 ,部分猪突然出现狂燥不安、全身肌肉震颤、四肢划动、口吐白沫、头向后仰等症状 ,约 1— 2ｈ死亡 ,有的猪晚上吃食正常 ,第 2ｄ即死于栏中。发病猪体温正常 ,死亡猪多为膘情好、食欲旺盛者。怀孕母猪发病后先发生流产 ,之后死亡。2　剖检变化病死猪肺气肿 ,…     

牛源B型产气荚膜梭菌的分离鉴定与毒力基因检测

为探究内蒙古通辽市某牛场牛猝死的原因,本研究采集病死牛肠道内容物,分别进行革兰染色镜检、全自动微生物分析系统检测、16S rRNA基因扩增、毒力基因检测及系统进化树分析、动物致病性试验、半数致死量试验。结果显示,分离菌形态、生化特性符合产气荚膜梭菌的特性;16S rRNA基因序列与GenBank中已登录的产气荚膜梭菌的同源性为99%,系统进化树分析该分离菌与B型产气荚膜梭菌的亲缘性最近;3种毒力基因在该致病菌中均被检测到;分离菌对小鼠有致死性;该菌对小鼠半数致死的浓度为2.27×10~7CFU/mL;药敏结果显示,分离菌株对多黏菌素、庆大霉素等药物敏感,对卡那霉素等药物中度敏感,对头孢他啶、阿莫西林等药物耐药。该致病菌经鉴定,确定为B型产气荚膜梭菌,毒力基因分别为α、β_2和ε毒素。     

梅花鹿肠毒血症的细菌学鉴定

梅花鹿肠毒血症的细菌学鉴定俞乃胜，李光宗，韦剑珊，段志华，黄小华（云南农业大学昆明６５０２０１）（云南省粮油储备库鹿场）鹿产气荚膜杆菌（魏氏梭菌）肠毒血症，其病原菌有５个血清型，国外曾报道过鹿Ｃ型产气荚膜杆菌肠毒血症和梅花鹿Ａ型产气荚膜杆菌引起的坏死...     

鲜猪肉中A型产气荚膜梭菌污染情况调查

对贵阳市部分市场销售的鲜猪肉A型产气荚膜梭菌的污染情况进行了调查 ,从被检肉样中分离获得 3株A型产气荚膜梭菌 ,分离率为 6.2 5 % (3 /4 8)。表明贵阳市部分市场销售的鲜猪肉存在A型产气荚膜梭菌的污染 ,对消费者的健康构成潜在的威胁     

犬产气荚膜梭菌的分离和PCR检测方法的建立

从 12头疑似产气荚膜梭菌感染的猝死警犬中分离获得了 18株病原菌 ,经生化试验及毒素中和试验 ,确定为A型和C型产气荚膜梭菌。参考GenBank中登录的基因序列 ,设计合成了针对产气荚膜梭菌α、β、ε、ι、CPE和 β2共 6对分型毒素基因的引物 ,对以前昆明地区分离的 1株产气荚膜梭菌进行了PCR扩增 ,结果扩增出了与预期大小相同的 6个基因片段 ,分别为 2 33、196、32 4、4 46、5 6 7和 6 6 5bp。建立的PCR方法能同时用于产气荚膜梭菌鉴定和毒素分型 ,较细菌毒素检测方法快速 ,与细菌分离鉴定的结果一致。     

产气荚膜梭菌α毒素和ε毒素的共表达及其免疫原性的研究

利用PCR技术从D型产气荚膜梭菌标准株C60-2基因组中扩增出α毒素基因CPA和ε毒素基因ETX。然后将CPA、ETX分别插到双表达载体pETDuet-1上,成功构建重组质粒pETDuet-1-CPAETX。将重组质粒pETDuet-1-CPA-ETX转化入大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导,菌体蛋白样品经SDS-PAGE分析,可见43ku和34ku两条特异性条带,表明插入基因得到了表达。Western-blot结果显示,共表达的α毒素和ε毒素蛋白均能与抗毒素抗体发生反应,具有很好的反应原性。用共表达的α、ε毒素蛋白免疫小鼠,可使其血清中产生较高浓度的中和抗体,且能抵抗D型产气荚膜梭菌培养液上清的攻击,免疫保护效果明显优于ε毒素蛋白单独免疫的保护效果。以上结果表明,本研究构建的产气荚膜梭菌α、ε毒素蛋白共表达体系可以用于D型产气荚膜梭菌毒素疫苗的制备,为预防多血清型病原的多价疫苗的研制提供了思路。     

梅花鹿A型产气荚膜梭菌病的诊断与防制

20 0 2年 6月 ,甘肃省金昌市金川区某鹿场饲养的梅花鹿发生一种以排血样稀粪并伴有神经症状的疾病 ,共发病 5头 ,全部死亡。根据流行病学特点、临床症状、剖检变化及实验室检验 ,确诊为A型产气荚膜梭菌病。1　发病情况及症状该养鹿场自 2 0 0 1年 4月起 ,先后从东北引进良种梅花鹿 12 5头 ,以后又繁殖 70多头 ,分群分圈舍饲 ,鹿群生长发育良好。该场远离村庄 ,有较为合理健全的兽医卫生管理制度 ,对鹿群定期注射羊痘、羊三联四防苗等疫苗。从 2 0 0 2年 6月初开始 ,主要饲喂青苜蓿。 6月 18日早晨 1头公鹿发病 ,虽采取多种措施治疗 ,但未奏…     

岩羊病原性大肠埃希氏菌及A型产气荚膜梭菌的分离与鉴定

从1只突然死亡的1月龄雄性岩羊体内分离到1株病原性大肠埃希氏菌和1株A型产气荚膜梭菌,经毒力试验测得大肠埃希氏菌LD50为4.4×108CFU,A型产气荚膜梭菌LD50为6.1×109CFU,同时进行了药敏试验,为今后预防和诊疗提供理论基础.     

产气荚膜梭菌β2蛋白的高效可溶性表达与基因工程亚单位疫苗的制备

β2毒素是一种新近报道的产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)毒素,A、B、C、D、E等5个型的梭菌均可产生,该毒素也是制备基因工程亚单位疫苗的主要研究对象。本研究通过优化β2蛋白的密码子、去除蛋白信号肽,选择亲水性与抗原性较好的序列,同时优化表达条件等方法的探索,在大肠杆菌表达系统中获得了高效表达的可溶性重组β2蛋白,用该蛋白免疫小鼠可使动物产生较高的血清抗体水平,针对A型、B型、C型和D型产气荚膜梭菌的保护率分别为90%、100%、80%和90%,小鼠三免后第7~14天抗体效价达到峰值。本研究表达的β2蛋白具有较好的免疫原性,可进一步用于研制预防产气荚膜梭菌的基因工程亚单位疫苗。     

肉用鸡坏死性肠炎的诊治

坏死性肠炎是由Ｃ型产气荚膜梭菌引起的一种急性传染病 ,属条件性疾病 ,常大批流行 ,可给养鸡户造成巨大损失。发病情况　山东省蓬莱市潮水镇某商品肉用鸡场饲养 35日龄罗曼商品代肉用鸡 840 0只 ,先前曾有个别鸡死亡。 2 0 0 0年 11月 2日发病 ,发病后的 5ｄ ,每日死亡 6 0多只 ,最多的 1ｄ死亡 91只。临床症状　病鸡精神沉郁 ,拉稀 ,肛门周围粘有黄绿色或白色稀粪 ,采食量明显下降 ,但体况良好 ,常呈急性死亡。剖检变化　肝稍肿胀、质脆 ,有散在出血点 ,淤血呈深红色 ;小肠后 1/3处肠道肿胀 ,肠壁增厚 ,肠管扩张、充血 ;小肠浆膜呈灰绿色 …