口蹄疫病毒A/WH/09株结构蛋白P1基因的克隆及其B细胞抗原表位的预测

对口蹄疫病毒(FMDV)A/WH/09株P1结构蛋白基因进行了扩增、克隆及序列测定。结果显示,FMDV A/WH/09株P1基因长2 208bp,包含完整的开放阅读框,编码736个氨基酸,其中VP1长636bp,编码212个氨基酸;VP2长654bp,编码218个氨基酸;VP3长663bp,编码221个氨基酸;VP4长255bp,编码85个氨基酸。采用DNAStar Protean软件对P1蛋白的二级结构、可塑性、亲水性、表面可及性及抗原指数等参数进行了综合分析,并预测其B细胞的抗原表位分布。结果表明,VP1、VP2和VP3上均有多个区域为B细胞抗原优势表位,VP4上也有少量潜在的B细胞抗原表位。与已鉴定的B细胞抗原表位相比,本试验所用方法预测的结果有较高的准确度,是一种较为先进的表位研究方法。     

产气荚膜梭菌α毒素和ε毒素的共表达及其免疫原性的研究

利用PCR技术从D型产气荚膜梭菌标准株C60-2基因组中扩增出α毒素基因CPA和ε毒素基因ETX。然后将CPA、ETX分别插到双表达载体pETDuet-1上,成功构建重组质粒pETDuet-1-CPAETX。将重组质粒pETDuet-1-CPA-ETX转化入大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导,菌体蛋白样品经SDS-PAGE分析,可见43ku和34ku两条特异性条带,表明插入基因得到了表达。Western-blot结果显示,共表达的α毒素和ε毒素蛋白均能与抗毒素抗体发生反应,具有很好的反应原性。用共表达的α、ε毒素蛋白免疫小鼠,可使其血清中产生较高浓度的中和抗体,且能抵抗D型产气荚膜梭菌培养液上清的攻击,免疫保护效果明显优于ε毒素蛋白单独免疫的保护效果。以上结果表明,本研究构建的产气荚膜梭菌α、ε毒素蛋白共表达体系可以用于D型产气荚膜梭菌毒素疫苗的制备,为预防多血清型病原的多价疫苗的研制提供了思路。     

禽滑液囊支原体WF224株的分离鉴定及其致病性的研究

用禽支原体16S rRNA引物对山东省潍坊市某养鸡场疑似禽滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)感染的气管棉拭子病料进行了PCR鉴定,结果可扩增到特异性条带。通过分离纯化获得MS分离株CHN-WF224-2016;低倍显微镜观察到,菌落呈典型的"荷包蛋"状;生化鉴定结果表明,该分离株能发酵葡萄糖,不水解精氨酸,不利用尿素。然后,将测序后的16S rRNA序列上传Gen Bank。MEGA分析和构建的系统发育树表明,CHN-WF224-2016分离株与其他MS菌株在同一进化分支上,为禽滑液囊支原体;其中与MS标准菌株(WVU1853)和河南商丘分离株(CHN-SQ27-2017)的相似性分别为99%和98%。用MS分离株CHN-WF224-2016感染21日龄的鸡,攻毒后第11天和第21天进行实验室解剖,观察临床症状及气管粘膜病理形态学改变;结果表明,分离株CHN-WF224-2016能引起典型的足垫肿胀和关节滑液囊炎。本研究结果证实,CHN-WF224-2016分离株致病性强,可作为今后疫苗研究的候选菌株。     

毕希纳是"庸俗唯物主义者"吗

毕希纳在马克思恩格斯以及以往苏联和中国的哲学文献中一直被看作为“庸俗唯物主义者” ,但实际上 ,他是一位坚持唯物主义的勇士和唯物主义的宣传家。从某种意义上来说 ,毕希纳在自然观上甚至超越了 1 8世纪的法国唯物主义和费尔巴哈 ,而且他作为自然科学家 ,还曾自发地形成了若干辩证法思想 ,毕希纳与福格特等人是有区别的 ,他并非“庸俗唯物主义者”。