犬冠状病毒超免疫血清的制备及应用

采用犬冠状病毒(CCV)弱毒株和强毒株多次免疫健康犬,采集超免疫血清,其CCV血清中和(SN)抗体效价高达1210.试验结果表明,该超免疫血清安全、特异、无毒副作用,每只幼犬注射1.5 mL/kg体重的该血清即可使90%以上的犬获得10～15 d的被动免疫保护;对110只患CCV性肠炎病犬的临床治疗结果表明,该超免疫血清治疗效果可靠,其治愈率达94%.     

犬冠状病毒YS1株的致弱驯化与免疫试验

应用猫肾传代细胞(CRFK)单层接毒方法将犬冠状病毒(CCV)强毒YS1株连续传代驯化至60代,经安全性试验和免疫原性测定,该强毒株己驯化至弱毒水平,对犬安全,免度原性良好.     

仔猪水肿病左旋咪唑-葡聚糖佐剂苗的制备及免疫效力测定

用溶血性大肠埃希氏菌制备仔猪水肿病甲醛灭活苗、氢氧化铝胶苗以及4种含量的左旋咪唑佐剂苗.用0.1mL剂量免疫小白鼠,在免疫后24 d用强毒株培养液攻毒.结果氢氧化铝胶苗和10、20 mg/mL的左旋咪唑佐剂苗可使小白鼠获得87.5%的保护,而5、40 mg/mL的左旋咪唑佐剂苗可使小白鼠获得75.0%和62.5%的保护,甲醛灭活苗只能使小白鼠获得50.0%的保护.试验结果提示,左旋咪唑佐剂苗对仔猪水肿病菌苗具有免疫增强作用,而不同剂量的左旋咪唑对免疫效果影响有较大差异.     

应用单克隆抗体荧光法对羊衣原体性流产苗的评价

羊衣原体病在我国部分地区流行严重,羊的流产率为10～20％,羊群感染率高达60％。为预防和控制本病的流行,我们开展了羊衣原体性流产卵黄囊甲醛灭活油佐剂苗的研究。经室内外免疫试验均收到了良好效果。该苗又经单克隆抗体免疫荧光法检测,其结果与免疫试验结果作了比较,认为此法可以作为羊衣原体性流产灭活苗免疫效果的辅助检测方法,也证实该苗免疫效果良好。     

CDV和CPV及CCV多重纳米PCR检测方法的建立与应用

参考Gen Bank上登录的犬瘟热病毒(CDV)N基因序列、犬细小病毒(CPV)VP2基因序列和犬冠状病毒(CCV)M基因序列的保守型片段分别设计特异性引物,建立了CPV(193 bp)、CDV(500 bp)和CCV(780bp)的多重纳米PCR(nano-mPCR)检测方法,同时考查所建立nano-mPCR检测方法的特异性和敏感性。结果表明,该方法特异性和敏感性良好,对CPV、CDV和CCV的最低核酸检测量分别为1.39×10~2、6.0×10~2和6.7×10~2copies/L,其敏感性比普通PCR高100倍。临床样品的检测结果表明,nano-mPCR的建立为CDV、CPV和CCV的单独或混合感染进行早期快速、灵敏、准确的鉴别诊断提供了新方法。     

鸽新城疫病毒分离株的部分生物学特性鉴定及疫苗免疫试验

从暴发疑似鸽新城疫的某赛鸽场分离到1株病毒,通过血凝(HA)试验、血凝抑制(HI)试验及鸡胚中和试验初步鉴定为鸽新城疫病毒,进而进行了鸡胚半数感染量(EID50)、鸡胚平均死亡时间(MDT)测定扣对不同动物红细胞的凝集试验,证明该分离株属新城疫强毒力毒株.将该毒株经鸡胚尿囊液增殖后用甲醛灭活,制成油佐剂灭活苗,对鸽免疫后检测其血清抗体水平并进行攻毒试验,结果在免疫后21 d抗体达到高峰,攻毒试验表明油佐剂灭活苗对鸽新城疫病毒感染有较强的保护力.     

羊流产衣原体卵黄囊甲醛灭活油佐剂苗的研究

McEwen和Stamp氏等曾用感染羊流产衣原体的胎衣或羊流产衣原体接种卵黄囊繁殖后制成的灭活苗,接种羊只后可产生高滴度的补体结合抗体,如制成矿物油佐剂苗,1次皮下注射所产生的免疫力可持续3年。近年来,英、法以及苏联等国,预防羊衣原体性流产,仍使用卵黄囊灭活苗。 1981年起,我们在羊衣原体流产病原研究的基础上,用从甘肃和青海省分得的绵羊和山羊流产衣原体,试制成羊流产衣原体卵黄囊甲醛灭活油佐剂苗(以下简称灭活苗)。经过一系列的免疫试验证明,这种灭活苗,注射怀孕绵羊和山羊,均很安全,最小有效免疫量为1ml;免疫持续期和有效保存期,均在2年以上,按《羊流产衣原体卵黄囊甲醛灭活油佐剂苗制造及检验试行规程》(以下简称     

鸡败血性支原体甲醛灭活苗气雾免疫效果观察

1976年作者在某鸡场蹲点期间,该场发生鸡新城疫后,在1～2个月龄雏鸡中发生了鸡支原体病,死亡较多;虽然投给了大量土霉素、但疗效不高。根据国外报道及作者经验,认为鸡支原体甲醛灭活苗有一定免疫作用。为了帮助场方控制本病,从该场病鸡分离出鸡败血性支原体(MG),制成甲醛灭活苗,对假定健康鸡与病鸡进行了气雾免疫,观察效果较好。现将试验情况简述如下。     

牦牛传染性鼻气管炎灭活苗的研究

以本所从四川牦牛体分离的IB R85-Y毒株制成IBR甲醛灭活矿物油佐剂苗免疫成年牦牛8头。同时以匈牙利的Bartha/Ntt/67毒株所制备的弱毒苗免疫牦牛8头,进行了免疫性的比较试验。免疫后以ELISA检测血清中抗体。其结果,免疫后第10～80天,灭活苗免疫牛抗体维持在较高水平,其OD均值为1.61;而Bartha苗的免疫牛则在同一时间内呈明显下降的趋势。认为IBR85—Y是一个有希望的疫苗毒株。     

犬瘟热病毒RT-PCR检测方法的建立

根据GenBank中登录的犬瘟热病毒(CDV)核衣壳蛋白基因序列,设计合成了1对特异性引物,以CDV疫苗株ONP为模板,通过对反应条件进行优化,建立了一种快速检测CDV的RT-PCR方法。结果显示,以该引物进行RT-PCR扩增,能得到与理论设计值大小一致的242bp的特异性条带;该方法最低可以检测出约20pg含量的CDV;对已知CDV阳性和阴性病料进行重复性和稳定性试验,结果均一致;用该方法检测犬细小病毒(CPV)、犬冠状病毒(CCV)、狂犬病病毒(RV)和同为副黏病毒科的新城疫病毒(NDV),均无交叉反应;对32份临床病料进行检测,并与免疫胶体金抗原检测试纸检测结果进行比较,符合率为93.75%。结果表明,此方法特异性强,敏感性高,重复性和稳定性均好,可用于犬瘟热病毒的临床诊断和试验研究。