新藤黄酸增强仑伐替尼在肝细胞癌中的敏感性及其机制研究

目的 探究新藤黄酸（gambogenic acid,GNA）协同仑伐替尼对肝细胞癌的抑制、促进肝细胞癌的凋亡作用及其机制。方法 采用H22肝癌细胞建立H22移植瘤小鼠模型,将模型复制成功的小鼠随机分为模型组（生理盐水）,GNA组（20 mg/kg）,仑伐替尼组（10 mg/kg）,GNA（20 mg/kg）+仑伐替尼（10 mg/kg）组,每组10只,各组小鼠给予相应药物连续灌胃2周,每日1次;比较各组小鼠的肿瘤质量和体质量,观察GNA联合仑伐替尼对肿瘤生长的作用;苏木精-伊红染色观察GNA联合仑伐替尼对移植瘤模型小鼠各脏器的影响;TUNEL染色检测移植瘤模型小鼠肿瘤组织中细胞凋亡情况;Western blot检测移植瘤模型小鼠肿瘤组织中孕烷X受体（pregnane X receptor,PXR）、P-糖蛋白（P-glycoprotein,P-gp）、乳腺癌耐药蛋白（breast cancer resistant protein,BCRP）、细胞色素P450 3A4酶（cytochrome P450 3A4,CYP3A4）、P53、B淋巴细胞瘤-2（B-cell lymphoma-2,Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2-associated X,Bax）、cleaved-caspase-3蛋白的表达水平。结果 与模型组比较,GNA+仑伐替尼组肿瘤生长得到明显抑制（P＜0.05）,并且优于GNA组和仑伐替尼组（P＜0.05）;给药后小鼠的主要器官（心、肝、脾、肺、肾）均未出现明显病变;与模型组比较,各给药组均发生明显的细胞凋亡,GNA+仑伐替尼组细胞凋亡较仑伐替尼组更加明显;GNA+仑伐替尼组肿瘤组织中PXR、P-gp、BCRP、CYP3A4、Bcl-2的蛋白表达水平显著降低（P＜0.05）,P53、Bax、cleaved-caspase-3蛋白表达水平显著上升（P＜0.05）。结论 GNA与仑伐替尼联用可以发挥协同作用,GNA增强仑伐替尼对肝细胞癌的敏感性,其分子机制可能与下调核受体PXR的表达水平,从而影响代谢酶CYP3A4,转运体P-gp,BCRP和凋亡蛋白P53、Bax、Bcl-2、cleaved-caspase-3的表达有关。     

仙茅苷对电刺激应激小鼠神经精神活动的影响

目的 探讨仙茅苷对电刺激应激小鼠记忆、抑郁、焦虑样行为的影响。方法 采用电刺激前和电刺激后两个时间点给药,通过恐惧记忆测试、强迫游泳及旷场实验,观察仙茅苷（每日20 mg/kg,腹腔注射,7 d）对电刺激应激小鼠恐惧记忆、抑郁及焦虑等神经活动的影响。结果 与对照组小鼠比较,电刺激前给药不影响小鼠在受到电击24 h及48 h后的凝滞时间;而电刺激后给药的小鼠在给药结束后再次测得的凝滞时间较对照组显著提高（P<0.05）。在电刺激后给药的实验中,仙茅苷能显著缩短小鼠不动时间（P<0.05）;电刺激前给药组亦有相同趋势,但差异并无统计学意义（P>0.05）。电刺激前后给药均不影响小鼠在中央格停留时间比（P>0.05）;与对照组比较,药物组电刺激前后给药具有提高小鼠运动总路程的趋势,但差异均无统计学意义（P>0.05）。结论 仙茅苷具有改善电刺激应激小鼠抑郁的症状及抑制记忆退化的作用。     

补肾安胎冲剂对复发性自然流产小鼠蜕膜血管内皮生长因子及其受体调控作用研究

目的 观察补肾安胎冲剂对复发性自然流产（recurrent spontaneous abortion,RSA）小鼠胚胎丢失率和蜕膜组织血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）及其受体的影响。方法 采用Clark经典RSA小鼠模型,将RSA小鼠随机分为模型组、补肾安胎冲剂低剂量（11.7 g/kg）组、补肾安胎冲剂高剂量（23.4 g/kg）组,黄体酮胶囊（156 mg/kg）组,另取正常妊娠小鼠作为正常组,每组8只。末次给药后,处死小鼠,计算胚胎丢失率;光镜下观察蜕膜组织血管形态学改变;采用免疫组化法检测蜕膜组织VEGF、血管内皮生长因子受体2（vascular endothelial growth factor receptor 2,VEGFR-2）、可溶性血管内皮生长因子受体-1（soluble vascular endothelial growth factor receptor 1,sVEGFR-1）的表达;采用RT-PCR法检测小鼠蜕膜组织中VEGF、VEGFR-2及sVEGFR-1 mRNA的表达。结果 补肾安胎冲剂能改善蜕膜组织血管形态学变化,升高蜕膜组织中VEGF和VEGFR-2蛋白含量,降低sVEGFR-1蛋白含量;能显著降低RSA小鼠胚胎丢失率（P<0.05）,升高蜕膜组织中VEGF和VEGFR-2 mRNA表达水平,降低sVEGFR-1 mRNA表达水平（P<0.05）,呈现明显的量效关系。结论 补肾安胎冲剂对RSA小鼠具有一定的保护作用,其机制可能与调控VEGF及其受体,改善蜕膜组织血管重铸有关。     

不同茯苓提取物对急性肝损伤小鼠的保护作用

目的 研究茯苓不同提取部位对四氯化碳（carbon tetrachloride，CCl4）所致急性肝损伤的保护作用，并探讨其可能的作用机制。方法 〖JP2〗将120只昆明小鼠随机分为正常组，模型组，阳性药物组（水飞蓟素100 mg/kg），茯苓水提物低、中、高剂量组（30、60、120 mg/kg），茯苓醇提物低、中、高剂量组（25、50、100 mg/kg）以及茯苓多糖低、中、高剂量组（10、20、40 mg/kg），连续灌胃两周后腹腔注射0.5% CCl4溶液诱发小鼠急性肝损伤。模型复制12 h后处死小鼠，检测血清中谷氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase，ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase，AST）和肝组织中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）及白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）、白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）和肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）水平；苏木精-伊红染色观察肝组织病理切片。结果 各给药组肝组织病理损伤减轻。与模型组比较，各给药组小鼠ALT、AST、MDA、IL-1β、IL-6和TNF-α水平均显著降低（P<0.05），SOD活性显著升高（P<0.05），且茯苓多糖的作用呈剂量依赖性，以茯苓多糖高剂量组最接近阳性药物组。结论 3种茯苓提取物对CCl4诱导的小鼠肝损伤均具有不同程度的保护作用，以茯苓多糖效果最为显著，其机制可能与增强肝脏抗氧化能力及减轻炎症有关。     

苓桂术甘汤对正常小鼠免疫功能的影响

目的：研究苓桂术甘汤对正常小鼠特异性和非特异性免疫功能的影响。方法：取正常小鼠，按大、中、小剂量（42．90，21．45，4．29g/kg)连续给药7d，称取免疫器官质量、测定碳粒廓清率、血清溶血素抗体水平和淋巴细胞转化率。结果：苓桂术甘汤能明显增加小鼠免疫器官质量，提高小鼠碳粒廓清指数和吞噬活性，促进小鼠血清抗体生成和淋巴细胞转化、分裂。结论：苓桂术甘汤能明显增强小鼠的免疫功能。     

肝豆汤改良方调控PKR/eIF2α通路改善Wilson病模型TX小鼠突触功能障碍的机制研究

目的 探究肝豆汤改良方调控双链RNA依赖蛋白激酶(double-stranded RNA-dependent pro-tein kinase,PKR)/真核细胞起始因子2α(eukaryotic initiation factor 2α,eIF2α)通路改善Wilson病模型毒牛奶(toxic milk,TX)小鼠突触功能障碍的机制.方法 实验分为正常组、正常加肝豆汤改良方组、模型组、模型加肝豆汤改良方组,每组20只小鼠;正常组和模型组每日分2次予生理盐水灌胃,每次20 mL/kg,正常加肝豆汤改良方组与模型加肝豆汤改良方组每日分2次予中药肝豆汤改良方各20 mL/kg灌胃给药,连续4周,末次给药结束后取各组小鼠海马组织进行检测;采用旷场实验、Barnes迷宫实验检测Wilson病模型小鼠认知功能;采用TUNEL染色法检测小鼠海马组织中神经细胞凋亡情况;采用免疫荧光染色检测各组小鼠海马8-羟化脱氧鸟苷(8-hydroxylated deoxyguanosine,8-OHdG)的表达水平;采用Western blot法检测海马组织PKR/eIF2α通路以及突触相关蛋白表达水平.结果 模型组小鼠的认知功能显著低于正常组(P<0.05),模型加肝豆汤改良方组小鼠的认知功能显著高于模型组(P<0.05);与正常组比较,模型组小鼠海马神经细胞凋亡数目显著增加(P<0.05);与模型组比较,模型加肝豆汤改良方组小鼠海马神经细胞凋亡数量显著降低(P<0.05),8-OhdG表达水平显著降低(P<0.05);小鼠海马内突触相关蛋白突触蛋白1、突触素、突触后致密物-93、突触后致密物-95表达水平显著增加(P<0.05),小鼠海马PKR/eIF2α通路相关蛋白PKR、磷酸化eIF2α、转录激活因子4、促凋亡分子C/EBP同源蛋白表达水平显著降低(P<0.05).结论 肝豆汤改良方可通过调控PKR/eIF2α通路,促进突触相关蛋白表达,减轻高铜诱导的突触功能障碍,改善TX小鼠认知功能损伤症状.     

灵芪颗粒对小鼠免疫功能的影响

目的 观察灵芪颗粒对环磷酰胺致免疫功能低下小鼠和正常小鼠免疫功能的影响。方法 小鼠腹腔注射环磷酰胺，复制免疫功能低下模型，观察灵芪颗粒对小鼠血白细胞数、淋巴细胞数、T淋巴细胞转化率、NK细胞活性、碳粒廓清和免疫器官脏器系数的影响；观察灵芪颗粒对正常小鼠溶血素、溶血空斑数和2,4-二硝基氟苯介导的皮肤迟发性超敏反应的影响。结果 灵芪颗粒能明显提高环磷酰胺致免疫功能低下小鼠的脾T淋巴细胞转化能力、NK细胞活性和碳粒廓清能力，增加外周血白细胞数和淋巴细胞数，并减轻免疫器官（脾、胸腺）的萎缩。灵芪颗粒能明显增加正常小鼠的半数溶血值和溶血空斑数，并增强2,4-二硝基氟苯介导的小鼠迟发性超敏反应。结论 灵芪颗粒能增强小鼠的特异性免疫和非特异性免疫。     

绞股蓝总皂苷抑制小鼠Lewis肺癌生长与提高免疫力研究

目的 :研究绞股蓝总皂苷 ( gypenosides ,GPs)对小鼠Lewis肺癌肿瘤生长、脾淋巴细胞数及NK细胞活性的影响。方法 :采用整体动物的抑瘤试验、脾淋巴细胞计数及NK细胞活性测定。结果 :GPs对小鼠Lewis肺癌细胞具有明显的抑制作用 ,在剂量 10、2 0、4 0mg/kg腹腔注射 (ip)给药条件下 ,其瘤重抑制率 (TWI)分别为 ( 2 9.8± 1.3) %、 ( 51.4± 2 .2 ) %和 ( 50 .0± 1.6) %。同时 ,GPsip给药后荷瘤小鼠脾淋巴细胞总数明显增加 ,外周血NK细胞活性明显升高 ,脾NK细胞活性也明显升高。结论 :GPs的抗肿瘤作用与其对荷瘤小鼠免疫功能的增强作用密切相关。     

颈舒颗粒毒理学实验研究

目的:观察动物对颈舒颗粒的急性和慢性的毒性反应。方法:灌胃给药测定小鼠最大给药量,观察7d内动物的死亡情况;大鼠分对照组,颈舒颗粒高、中、低剂量组(24,12,6g.kg-1/d),连续灌胃12周。结果:颈舒颗粒的小鼠的最大给药量为120g.kg-1/d,相当于临床成人用量的100倍以上。大鼠长期灌服颈舒颗粒,动物一般状况、血液和血液生化指标、脏器系数、病理解剖观察均未发现明显异常,与对照组相比均无明显差异。结论:颈舒颗粒未见有明显毒性反应,表明本品安全性较高。     

乳糜微粒流对黄芩苷纳米乳动物体内组织分布的影响研究

目的 探究乳糜微粒流对黄芩苷纳米乳大鼠体内淋巴组织的分布,初步阐明黄芩苷纳米乳具有淋巴靶向性的机制.方法 利用高效液相色谱法测定生物样品中黄芩苷浓度;大鼠分别灌胃给予黄芩苷纳米乳和黄芩苷混悬液,剂量为144.0 mg/kg;建立大鼠乳糜微粒流阻断模型,考察乳糜微粒介导的跨膜转运对黄芩苷纳米乳在淋巴组织器官分布的影响.结果 与未阻断组相比,大鼠体内乳糜微粒流的阻断,可影响黄芩苷纳米乳组大鼠体内脾、胸腺和淋巴结血药浓度-时间曲线下面积、药峰浓度等参数,但未对黄芩苷混悬剂组大鼠的体内药物代谢动力学参数产生影响.结论 黄芩苷纳米乳刺激乳糜微粒的分泌,增加药物经淋巴途径的转运量,药物富集于淋巴器官,可能是黄芩苷纳米乳靶向淋巴器官的主要机制.     

过氧化甲酰胺的合成及其急性毒性试验

目的 合成新化合物过氧化甲酰胺,对其合成工艺进行优化,并观察小鼠对它的急性毒性反应.方法 采用正交试验法,以合成过氧化甲酰胺的产率为指标进行试验.通过排水集气法收集氧气.以过氧化甲酰胺的最大浓度给小鼠灌胃给药,进行急性毒性试验.结果 最佳合成工艺为:用过氧化氢和甲酰胺质量比5:2,在(10±2)℃水浴温度下反应后,冷藏时间24 h.过氧化甲酰胺实际产氧量为148.0 ml/g.急性毒性试验未出现小鼠死亡,未测出LD50,过氧化甲酰胺的最大给药量为5.64 g/kg.结论 该合成工艺合理,产率高.合成的过氧化甲酰胺产氧量高,具有较好的安全性.     

不同方法提取的复方芍芪多苷对小鼠免疫性肝损伤保护作用比较

目的:比较不同方法提取的复方芍芪多苷(SQDG)对小鼠免疫性肝损伤的保护作用。方法:在建立卡介苗 脂多糖诱导免疫性肝损伤小鼠模型的基础上,用分光光度法检测血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平和肝匀浆丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)含量。结果:SQDG中剂量组与白芍总苷(TGP) 黄芪总皂苷(ASTs)中剂量组相比较,在降低小鼠血清中升高的ALT,AST水平及降低肝匀浆MDA水平上,组间差异具有显著性,对其余指标的影响无显著性。结论:SQDG120 mg/kg和TGP 105 mg/kg ASTs 15 mg/kg对免疫性肝损伤小鼠模型具有一定的药效学差异。     

苓桂术甘汤对免疫功能低下模型小鼠淋巴细胞活性的影响

目的:观察苓桂术甘汤对免疫功能低下模型小鼠免疫功能的影响.方法:近交系昆明种小鼠以环磷酰胺(Cy,80 mg/kg,ip,qd×1)诱导免疫功能低下,用苓桂术甘汤(42.90,21.45,4.29 g/kg)连续灌胃(ig)给药7 d,分别采用免疫溶血法、四氮唑盐比色法(MTT)和小鼠胸腺细胞氚标胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法测定血清溶血素、NK细胞及IL-2活性.结果:苓桂术甘汤能明显促进Cy所致免疫功能低下模型小鼠血清溶血素生成,增强NK细胞及IL-2活性,与模型组比较,差异有显著性(P＜0.05或P＜0.01).结论:苓桂术甘汤对Cy所致免疫功能低下模型小鼠三类淋巴细胞的免疫活性均具有明显的激活作用.     

桂枝茯苓软胶囊治疗痛经的实验研究

目的:研究桂枝茯苓软胶囊对实验性痛经的影响.方法:缩宫素2.0, 0.2 u/只腹腔注射分别诱发大鼠、小鼠痛经模型;100 g/L蛋清和二甲苯分别诱导大鼠、小鼠急性炎性反应模型;热刺激、冰醋酸诱导小鼠疼痛反应模型.结果:桂枝茯苓软胶囊4.32,2.16,1.08 g/kg(大鼠)及8.64,4.32,2.16 g/kg(小鼠)灌胃给药,能显著抑制缩宫素所致的大鼠、小鼠扭体反应次数,减少痛经大鼠子宫中PGF2α水平;抑制100 g/L蛋清所致的大鼠足肿胀和二甲苯所致小鼠耳肿胀;减少冰醋酸刺激引起的小鼠扭体反应次数;对热刺激引起的小鼠疼痛反应无明显影响.结论:桂枝茯苓软胶囊灌胃给药能抑制缩宫素诱导的动物痛经反应,有明显抗炎和镇痛作用,抑制子宫PGF2α释放可能是其作用机制之一.     

异甘草酸镁对CCl4致急性肝损伤大鼠肝组织CYP1A2、CYP2E1蛋白及其mRNA表达的影响

目的 观察异甘草酸镁对CCl4致急性肝损伤大鼠肝组织CYP1A2、CYP2E1蛋白及其mRNA表达的影响，从代谢酶方面探讨异甘草酸镁保肝作用的机制。方法 将大鼠分为正常对照组、模型组和给药组，每组6只。尾静脉注射给药，给药组给予20 mg/kg异甘草酸镁，正常组及模型组给予同容积生理盐水，连续14 d。模型组及给药组于给药第13天20：00点灌胃25% CCl4，剂量为1.6 mL/kg，制备大鼠急性肝损伤模型。各组大鼠于末次给药2 h后，从髂动脉放血处死，取肝组织进行苏木精-伊红染色，观察肝组织病理形态变化；采用RT-PCR及Western-blot检测各组大鼠肝组织中CYP1A2、CYP2E1 蛋白及mRNA表达水平。结果 肝组织病理学检查显示异甘草酸镁能改善肝组织损伤；模型组CYP1A2和CYP2E1蛋白及mRNA表达水平显著高于正常对照组（P<0.05），给药组CYP1A2和CYP2E1蛋白及mRNA表达水平较模型组显著降低（P<0.05）。结论 异甘草酸镁能够治疗肝损伤，其减毒机制可能与抑制CYP1A2、CYP2E1的表达有关。     

白芍总苷与当归提取物合用对实验性肝炎的保护作用

目的：观察白芍总苷（TGP）与当归提取物（EAS）合用的抗肝炎作用。方法：分别采用D－半乳糖胺（D－GL）和四氯化碳（CCl4）诱导小鼠发生实验性急性肝损伤。结果：两药合用可对抗D－GL和CCl4所致力清中谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）升高有还原型谷胱甘肽（GSH）降低，减轻D－GL所致肝脏病变程度，其中以200mg/kg白芍苷和相当于生药153．4g/kg当归提取物合用、给药7d以预防效果最佳。结论：白芍总苷与当归提取物合用对实验性肝炎有保护作用。     

表儿茶素对四氯化碳诱导肝纤维化大鼠的干预作用

目的 研究表儿茶素对四氯化碳诱导大鼠肝纤维化的保护作用。方法 将80只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、秋水仙碱组（0.1 mg/kg）、表儿茶素高剂量组（100 mg/kg）、表儿茶素低剂量组（25 mg/kg）。除正常对照组腹腔注射橄榄油外，其余各组均腹腔注射四氯化碳（CCl4） 建立肝纤维化模型。复制模型的同时开始给药，各给药组大鼠灌胃相应药物，正常对照组和模型组大鼠灌胃等容积生理盐水，每日1次，连续6周。末次给药后，称取肝湿质量，计算肝脏指数；采用微板法检测大鼠血清中天冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase，AST）、丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase，ALT)水平；苏木精-伊红染色和Masson胶原染色观察肝脏病理学变化；Western blot法检测肝脏中平滑肌肌动蛋白(alpha smooth muscle actin，α-SMA)、Ⅰ型胶原(typeⅠcollagen，collα1)蛋白的表达水平。结果 与模型组相比，表儿茶素能显著降低大鼠的肝脏指数和血清ALT、AST的含量；显著降低肝组织中α-SMA、collα1蛋白的表达；肝组织病理学指标明显改善。结论 表儿茶素对四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化有一定的保护作用，其机制可能与抑制α-SMA、collα1的表达有关。     

黄芪总提物减弱荷瘤小鼠化疗引起的白细胞减少和免疫抑制作用

目的:探讨黄芪总提物(TAE)对荷瘤小鼠化疗引起的白细胞减少和免疫抑制以及抗肿瘤作用的影响。方法:用环磷酰胺(CTX)或5-氟尿嘧啶(5-Fu)致正常与荷瘤小鼠的白细胞减少或免疫抑制模型,观察TAE对外周血白细胞、胸腺指数及血清IL-2的影响。结果:TAE(15、50和150mg/kg)与CTX(80mg/kg,腹腔注射(ip),第6、7天)合用,可明显提升CTX降低的小鼠外周血白细胞。TAE与CTX(50mg/kg,ip,第1、4、7、10天)合用治疗荷S180小鼠,在保持CTX疗效的同时,对其降低外周血白细胞数,亦有明显的提升作用。TAE与5Fu合用,可使5Fu降低的HepA小鼠胸腺指数和血清IL2含量上升。结论:TAE对化疗引起的白细胞减少和免疫抑制有明显的保护作用,且对其抗肿瘤活性有一定的增效作用。     

牧荆油乳液和牧荆油胶丸的药理作用及毒性

牧荆油乳液和牧荆油胶丸经灌胃给药，通过小鼠浓氨水喷雾法及电刺激猫喉上神经引咳法实验，表明有镇咳作用；用小鼠气管段排泌酚红法及大鼠毛细玻管排痰法实验，提示有祛痰作用：豚鼠雾引喘法显示有平喘作用。急慢性毒性试验证明，两种制剂毒性相似且很低，对大鼠心、肝肾等脏器无病理性损害。     

痛风康对酵母膏致高尿酸血症大鼠尿酸代谢及黄嘌呤氧化酶活性的影响

目的 观察痛风康对高尿酸血症大鼠的尿酸(uric acid,UA)代谢及黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XO)活性的影响.方法 将60只SD大鼠随机分为正常对照组,模型组,别嘌呤醇组,痛风康高(460mg/kg)、中(230 mg/kg)、低(115 mg/kg)剂量组,灌胃给药;采用酵母膏致高尿酸血症...