毁灭泰泽球虫卵囊孢子化过程的超微结构观察

毁灭泰泽球虫(Tyzzeria perniciosa)属于复顶亚门孢子虫纲球虫目艾美耳科,是家鸭的一种致病球虫。刚从鸭粪排出的新鲜卵囊没有孢子化。孢子化后,卵囊内便形成8个子孢子,但无孢子囊。由于制备卵囊超薄切片的困难,球虫卵囊孢子化过程的超微结构研究被阻碍了许多年,直到1976年Andersen等研制出一种卵囊双切片技术,才成功地解决了这一难题。目前,已有布氏艾美耳球虫和龚地弓形虫卵囊孢子化过程的研究报道,毁灭泰泽球虫卵囊孢子化的细微结构尚无记载。故此,作者对该种卵囊孢子化过程的详细结构进行了研究。(一)材料与方法 实验所用卵囊是以纯种毁灭泰泽球虫卵囊接种无球虫小鸭,从收集的粪便分离得到。取新鲜卵囊在26℃条件下分别孢子化0、6、12和24小时,然后每份材料按照Andersen介绍的方法制作卵囊的超薄切片,染色后,在JEM100s电镜下观察。     

家鹅球虫种类的调查研究

1983年4～9月间在江苏省邗江县六圩公社顺江、马桥两个大队和西湖公社金圩大队先后发现三群鹅爆发球虫病。本报告重点研究这三群鹅爆发球虫病的球虫种类。经卵囊分离、培养、量度、详细观察、摄影等,鉴定为两属4种:鹅艾美耳球虫E.anseris,有毒艾美耳球虫E. nocens,多斑艾美耳球虫E. stigmosa和稍小太泽球虫Tyzzeria Parvula,其中艾美耳属三种,太泽属1种。经统计100枚卵囊,各占的比例鹅艾美耳球虫43％,有毒艾美耳球虫44％,多斑艾美耳球虫10％,稍小太泽球虫3％。前三种危害严重。     

莫能霉素对斯氏艾美耳球虫内生发育的抑制试验

Fitzgerald(1973)和Gwyther(1976)都报道过莫能霉素(Monensin)能控制兔的球虫病;殷佩云等(1986)用10～150ppm的莫能霉素试验预防该病,获得显著效果。本试验的目的在于进一步观察该药对斯氏艾美耳球虫的确切疗效,及本药对该球虫内生发育各阶段的抑制作用。 (一)材料与方法 1.试验动物:无球虫寄生的健康大耳白兔,40～60日龄,共40只。 2.试验药物:莫能霉素(含量95～98％),由北京农业大学微生物教研组提供。 3.试验方法:试验分两组,每组20只兔。两组同时人工感染斯氏艾美耳球虫。一组从     

氯苯胍防治家兔球虫病

我们应用氯氯苯胍进行防治家兔球虫病的试验,结果如下: (一)通过对49只实验兔的治疗观察,认为每公斤饲料混入氯苯胍330毫克,日加饲料二次,让兔自由采食,对已患球虫病兔群,具有良好的治疗效果,从治疗8～14天的结果来看,球虫卵囊转阴率均为100％。因此,使用氯苯胍治疗家兔球虫病可以7天为一疗程。 (二)对治疗转阴的球虫兔群,按每公斤饲料混入氯苯胍160毫克进行预防试验(饲喂方法同上),投药后10天检查,均找不到球虫卵囊。以后将剂量减为130毫克,连喂3个月,亦未发现球虫卵囊。故将预防剂     

地克珠利溶液剂防治鸡球虫病的药效试验

对14日龄海兰白商品代公雏鸡分别给予高、中、低剂量的地克珠利溶液剂及加福(马杜霉素铵盐)、地克珠利预混剂,15日龄时经口向嗉囊接种柔嫩艾美球虫(Eimeria tenella)卵囊悬液0.5 mL(含球虫卵囊1.0×105个).试验第8 d测定增重率、相对增重率、盲肠病变值、卵囊值、抗球虫指数等.综合评价试验结果,以地克珠利溶液剂的中剂量效果最好,增重率达74.9%,抗球虫指数达189.6,卵囊值为0.     

陕西省部分地区鸡肠道寄生虫感染情况的调查

为调查陕西省鸡肠道寄生虫的感染情况,采用饱和盐水漂浮法和希塞氏糖溶液漂浮法,对陕西省6个地区的18个养鸡场共336份粪便样品中的寄生虫卵/卵囊进行了检测。初步鉴定了这些地区鸡的粪便中存在艾美耳球虫卵囊、隐孢子虫卵囊、鸡异刺线虫卵和鸡蛔虫卵,其感染率分别为44.94%、0.89%、25.30%和1.19%。为鉴定隐孢子虫种别,以基于18SrRNA基因的巢式PCR对分离的隐孢子虫卵囊进行种类鉴定,结果发现,3份样本中所发现的隐孢子虫均为贝氏隐孢子虫。本研究结果表明,陕西省这6个地区鸡肠道寄生虫感染较为普遍,尤以球虫和异刺线虫的感染率较高。     

兔球虫搭载科学卫星的初步试验

1990年10月,我们将无残艾美尔球虫、肠艾美尔球虫和穿孔艾美尔球虫卵囊搭载在我国反回式科学试验卫星上,旨在探索空间条件对兔球虫的孢子化、致病力等方面的影响。 (一)材料与方法 1.试验用无残艾美尔球虫、肠艾美尔球虫和穿孔艾美尔球虫,均从球虫病兔的肠内容物经饱和盐水浮集获得,滴于直径为1cm的滤纸片上,密封于2个特制的塑料盒内。1盒搭载卫星,另1盒     

复方敌球灵对鸡柔嫩艾美耳球虫孢子生殖及致病力的影响

复方敌球灵对鸡柔嫩艾美耳球虫孢子生殖及致病力的影响１）胡庭俊梁纪兰党萍樊斌堂刘大义（中国农业科学院中兽医研究所兰州７３００５０）鸡球虫病是一种严重危害养鸡业的寄生虫病，病原体为艾美耳属球虫。近年来，中国农业科学院中兽医研究所研制出了抗鸡球虫中药制剂敌...     

19种抗球虫药和抗疟药配合应用的药效试验

测定了１９种抗球虫药和抗疟药及其部分药物配合应用的药效，其中青蒿素、蒿甲醚、奎宁和氯喹在鸡胚中无抗球虫作用；乙胺嘧啶和乙氧乙胺苯甲酯在高浓度时对柔嫩艾美耳球虫有较弱的抗球虫活性；其余１３种药物在鸡胚中均表现良好的抗球虫活性；还进行了数种抗球虫药在鸡胚中的配合应用。试验结果表明，利用柔嫩艾美耳球虫子孢子感染鸡胚进行抗球虫药效测定，具有灵敏度和准确性高、节省时间和试验材料等优点，尤其适用大规模药物筛选     

毒害艾美耳球虫感染雏鸡消化道的局部免疫变化

将120只14日龄雏鸡随机分为毒害艾美耳球虫感染组和未感染球虫对照组,应用间接ELISA及免疫酶组织化学染色法对相关免疫指标进行了检测,以研究毒害艾美耳球虫感染对雏鸡消化道局部免疫功能变化的影响。结果显示,毒害艾美耳球虫感染雏鸡后7～21d,其肠液、胆汁中的IgA、IgM、IgG含量和盲肠扁桃体中抗体生成细胞的数量均不同程度高于对照雏鸡。表明毒害艾美耳球虫感染雏鸡后,在一定时间内其消化道局部的体液免疫功能明显提高。     

堆型艾美耳球虫早熟系与母株11种抗原基因表达水平的比较分析

应用荧光定量qRT-PCR技术比较堆型艾美耳球虫早熟系及其母株孢子化卵囊的11种抗原基因的表达情况。提取堆型艾美耳球虫早熟系及其母株孢子化卵囊的总RNA,反转录成cDNA,在GenBank中查找堆型艾美耳球虫11种抗原基因并设计相应引物,进行荧光定量qRT-PCR扩增,用熔解曲线、扩增曲线和循环阈值(Ct值)的变化等比较分析堆型艾美耳球虫早熟系及其母株的不同基因的扩增特异性和相对表达量。结果显示,11种抗原基因得到表达;与疫苗母株相比,早熟致弱的疫苗株大部分抗原基因的表达量下降,其中HSP70基因表达量下降明显。结果表明,早熟系毒力的减弱可能与某些抗原基因表达量下降有关。     

安徽省家畜家禽球虫种类调查

采集安徽省濉溪等１１个县市的１２种家畜家禽粪样，观察６１５６个球虫卵囊，共发现４属８４种球虫。其中艾美属（Ｅｉｍｅｒｉａ）７４种，等饱属（Ｉｓｏｓｐｏｒａ）３种，泰泽属（Ｔｙｚｚｅｒｉａ）５种，温扬属（Ｗｅｎｙｏｎｅｌｌａ）２种。有５２种球虫为安徽省首次发现；法尔氏艾美球虫（Ｅ．ｆａｒｒａｅ）、热带艾美球虫（Ｅ．ｔｒｉｐｉａｌｉｓ）为国内新记录；艾氏泰泽球虫（Ｔ．ａｌｌｅｎｉ）为首次在家禽中发现。     

斯氏艾美耳球虫泛素结合酶重组蛋白对家兔免疫保护效果的评价

观察斯氏艾美耳球虫（Eimeria stiedai）重组蛋白r Es-UCE、r Es-EFG和r Es-DG32对家兔的免疫保护效果。利用相对荧光定量PCR分析Es-UCE、Es-EFG和Es-DG32 3个基因在虫体不同发育时期的转录水平并进行原核表达与蛋白纯化。在进行了3个重组蛋白对家兔的免疫保护效果初步试验后,筛选出r Es-UCE进行进一步评价,将42只45日龄无球虫家兔分为空白对照组、攻虫对照组、空载蛋白对照组、佐剂对照组和r Es-UCE免疫组,各组分别颈部皮下注射1 m L无菌PBS,1 m L无菌PBS,1 m L(2 mg/m L)皂素,1 m L(100μg/m L)Trx-His-S tag蛋白,1 m L(100μg/m L)r Es-UCE,14 d后同等剂量进行二免。二免后第14天攻虫,除空白对照组外每只无球虫兔经口感染1×104个斯氏艾美耳球虫孢子化卵囊。感染后定期观察各组兔的临床症状、称重并采血,感染后第21天剖检并收集直肠粪样,测定并统计各组兔的死亡率、卵囊排出量、相对增重率、料肉比、肝指数、血清种特异性抗体与细胞因子等。结果显示,试验各组均未出现死...     

西藏部分地区牦牛球虫感染情况的调查

为了调查西藏部分地区牦牛球虫感染情况和流行现状,采用饱和蔗糖溶液漂浮法对从西藏林芝、山南和日喀则地区内放牧牦牛群随机采集的239份新鲜粪便样品进行球虫检测。结果显示:3个地区牦牛的艾美耳球虫总感染率为43.93%(105/239),共检测出11种艾美耳球虫,分别为邱氏艾美耳球虫25.94%(62/239)、椭圆艾美耳球虫15.48%(37/239)、柱状艾美耳球虫11.30%(27/239)、阿拉巴艾美耳球虫10.88%(26/239)、亚球形艾美耳球虫7.95%(19/239)、牛艾美耳球虫7.53%(18/239)、加拿大艾美耳球虫5.86%(14/239)、皮利他艾美耳球虫5.44%(13/239)、奥博艾美耳球虫3.35%(8/239)、拨克郎艾美耳球虫1.26%(3/239)和巴西艾美耳球虫1.26%(3/239),其中邱氏艾美耳球虫和椭圆艾美耳球虫为优势虫种。此外,牦牛球虫单感染率为18.41%(44/239),混合感染率为25.52%(61/239),其中以2种球虫的混合感染率最高,感染率为11.30%,混合感染3、4、5、6和7种球虫的感染率分别为9.21%、0、3.35%、0.84%和0.84%。调查结果表明:西藏部分地区牦牛球虫病流行较为严重,应加强本病的综合防控。     

鸡毒害艾美耳球虫小热休克蛋白基因EnsHsp20的克隆表达与蛋白定位

克隆、表达毒害艾美耳球虫小热休克蛋白基因EnsHsp20,检测其天然蛋白及其在虫体内的亚细胞定位。以毒害艾美耳球虫子孢子的总RNA为模板,用RT-PCR扩增EnsHsp20基因后,连接至pGEM-T Easy载体;测序后构建pET28a(+)-EnsHsp20表达载体,转化至大肠杆菌BL21(DE3);经双酶切和测序鉴定后,将重组菌诱导表达;表达产物经Western-blot鉴定、纯化与复性后,免疫BALB/c小鼠,制备小鼠抗rEnsHsp20多克隆抗体;利用多克隆抗体,分别用Western-blot和间接免疫荧光试验检测子孢子和第2代裂殖子中EnsHsp20的天然蛋白及其定位;最后,应用qRT-PCR分析EnsHsp20基因在未孢子化卵囊、子孢子和第2代裂殖子中的转录水平。结果显示,该基因全长549 bp,编码183个氨基酸,预测分子质量为20.3 ku;重组蛋白主要以包涵体形式存在,可以被6×His标签单抗和鸡抗毒害艾美耳球虫、抗柔嫩艾美耳球虫、抗堆型艾美耳球虫和抗巨型艾美耳球虫的阳性血清识别;在第2代裂殖子中检测到EnsHsp20的天然蛋白,分子质量约为36 ku;EnsHsp2...     

云南省猪球虫病原种类调查

猪球虫很普遍,但是国内关于猪球虫种类、感染情况等尚未见有系统的调查报告。1985年4～10月,我们调查了云南省9个地、州、市17个县、市、区的猪共523头,检查出11种球虫卵囊,其中8种为艾美耳球虫(Eimeria);2种为等孢球虫(Isospora);1种为泰泽球虫(Tyzzeria)。猪球虫总的感染率为84.3％。 材料与方法 (一)取粪 6月龄以下的猪直肠采粪,分别盛入洁净的瓶内。     

脆弱艾美耳球虫、波氏艾美耳球虫和堆型艾美耳球虫在培养细胞里的发育

在培养细胞里培养了鸡艾美耳球虫、波氏艾美耳球虫和堆型艾美耳球虫,观察了它们的生长形态和培养条件。已获得的结果摘要如下。 (一)脆弱艾美耳球虫在用孢子体接种的细胞培养中发育成卵囊,波氏艾美耳球虫发育到成熟的第二代裂殖体。没有发现处于生长期的堆型艾美耳球虫。 (二)在培养脆弱艾美耳球虫第二世代裂殖体时,只有少数裂殖子侵入培养细胞,不过没观察到进一步的发育。 (三)裂殖体区分为三种形态学类型。第一种类型的裂殖体跟在活体里发现的形态一样。第二种类型裂殖体的细胞质分裂成大小不一的团块。每一团块包含一个或较多的细胞核。第三种类型裂殖体同细胞里的孢子体相似,尽管它们在量度上比后者明显大些。它们有一个折光体,一个大细胞核和丰满的细胞质。 (四)在裂殖子形成过程中看到三种不同的方法。裂殖子是由第一种类型的裂殖体,第二种类型裂殖体的球形体和第三种类型裂殖体的球状物的表面分裂而形成的。 (五)在试管里培养脆弱艾美耳球虫的最适条件在于应用鸡肾细胞和含有0.2％酵母浸出物的No.199培养基,并置40℃培养。当应用鸡胚成纤维细胞和把培养物保存在Eagle's最小必需量培养基里并在40℃孵育波氏艾美耳球虫时取得了满意的结果。     

磺胺氯吡嗪(Сулъфахлорпира3ин)对兔球虫病的治疗效力

端士的西贝——捷吉牧场建议把叫作的磺胺氯吡嗪,用于治疗禽病和预防由阿赛艾美耳球虫(Eimeria acervulima)、巨艾美耳球虫(E.maxima)、波氏艾美耳球虫(E.brunetti)、鸡艾美耳球虫(E.tenella)和E.necatrix所引起的球虫病。本药是一种含有30％磺胺氯吡嗪钠盐的白色粉末,易溶于水。1克药溶解在1立升水中,使用3天,在必要时,间隔3天再重复一个疗程。     

堆型艾美耳球虫的分离纯化和致病性试验

堆型艾美耳球虫的分离纯化和致病性试验黄兵，史天卫，赵其平，吴薛忠，陈兆国（中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所２００２３２）堆型艾美耳球虫（Ｅｉｍｅｒｉａａｃｅｒｖｕｌｉｎａ）是９种鸡球虫中致病力中等的一个种，用不同品种的鸡进行人工感染，其死亡率变化...     

复合益生素对鸡球虫致病性的影响

在试验鸡的饮水中添加复合益生素 ,同时用柔嫩艾美球虫 (Eimeriatenella)南宁株孢子化卵囊感染鸡 ,通过对试验鸡的增重、发病率、死亡率、每克粪便卵囊数 (EPG)、盲肠病变记分等指标的测定 ,计算其抗球虫指数 (ACI)。结果 ,在饮水中添加复合益生素的鸡比对照组鸡平均多增重36g ,发病率、死亡率分别减少 4 0和 2 5个百分点 ,EPG少 3.98× 1 0 5,平均盲肠病变记分少 1 5 .8分 ,试验组的ACI为 1 73,对照组的ACI为 80 .1 5。试验结果表明 ,在饮水中添加复合益生素的试验鸡感染强毒球虫卵囊后 ,在减少鸡的发病率、死亡率和EPG ,减轻球虫病对鸡增重的影响和盲肠病变的严重程度 ,降低鸡球虫病对鸡所造成的经济损失等方面均有良好的作用