日本血吸虫童虫冷冻保藏方法的改进

研究日本血吸虫童虫保藏技术的目的是为了使经冷冻的童虫直接应用于免疫预防、免疫诊断、药物治疗的感染动物模型及虫种保存。自从James(1981)首先提出冷冻保存曼氏血吸虫以来,Stirewalt等(1984)、许绶泰等(1989,1990)相继进行冷冻保存血吸虫方法的研究。本文是在上述工作的基础上,对许绶泰等的冷冻保存童虫技术进行改进,以找出可以实际应用的方法。 (一)材料和方法 冷冻用日本血吸虫尾蚴由本所钉螺室提供,所用钉螺系湖北钉螺,血吸虫为日本血吸虫中国大陆株安徽贵池品系。冻存剂采用     

玻璃化冷冻对猪GV期卵母细胞及其DNA的影响

为了探索对猪GV期卵母细胞低毒性以及冷冻效果好的最佳冷冻保护液,并对玻璃化冷冻卵母细胞及其DNA损伤进行评价,本研究以猪GV期卵母细胞作为试验材料,应用玻璃化冷冻方法,就目前应用最多的六种冷冻保护液进行筛选,筛选出最合适的冷冻保护液;透射电镜观察冷冻卵母细胞超微结构的变化;采用彗星电泳技术检测玻璃化冷冻对卵母细胞DNA的影响。结果发现,以二甲基亚砜DMSO和乙二醇EG为主要成分的(HM+7.5%DMSO+7.5%EG)、HM+17%DMSO+17%EG+0.4 mol/L Su)冷冻保护液对猪GV期卵母细胞的损伤最小;玻璃化冷冻后卵母细胞透明带、细胞膜损伤,微绒毛消失,线粒体肿胀、基质不均、嵴不明显,胞质内溶解为絮状,有大量空泡;冷冻保护液处理组(未进行玻璃化冷冻)卵母细胞DNA损伤与对照组差异不显著,玻璃化冷冻组卵母细胞DNA损伤与冷冻保护液处理组和对照组均差异显著。结果表明,以DMSO和EG为主要成分的冷冻保护液适合用于对猪GV期卵母细胞玻璃化冷冻,同时也证实了DNA的损伤主要是由玻璃化冷冻过程的机械损伤所致。     

日本血吸虫冷冻童虫苗免疫绵羊试验

Taylor等(1976)的研究证明,用同种血吸虫辐照尾蚴或辐照童虫免疫接种绵羊,可使其对梅氏血吸虫(S.mat-theei)产生抵抗力。该作者等1979年用同种辐照童虫苗免疫接种绵羊,证明后者对牛血吸虫(S.bovis)也能产生抵抗力。Bick-le等(1979)应用同种和异种辐照致弱童虫免疫绵羊对抗梅氏血吸虫和牛血吸虫进一步作了试验观察。但直到1985年James等才首先应用冷冻辐照致弱童虫苗免疫接种绵羊预防牛血吸虫。关于绵羊日本血吸虫病方面,尚未见到有关免疫预防的报道。绵羊是日本血吸虫的易感动物之一。在我国人畜共患血吸虫病的传播方面,绵羊具有一定的重要性。为了应用日本血吸虫冷冻童虫苗进行家畜血吸     

黄芪多糖对冷冻前后猪精液中过氧化氢酶活性及其mRNA表达的影响

为了研究黄芪多糖对猪精液冷冻前后过氧化氢酶(CAT)活性及其mRNA表达的影响,用含不同质量浓度(0、0.2、0.4、0.6g/L)黄芪多糖的稀释液稀释美系长白公猪精液,用0.5mL细管分装冷冻,分别检测平衡后及冻融后精液中CAT活性和mRNA表达量的变化。结果显示,0.4g/L黄芪多糖能显著提高冷冻保存的猪精液中CAT活性及平衡后CAT mRNA表达(P0.05),同时冻融后CAT mRNA表达在冷冻组中最高(P0.05)。结果表明,冷冻前后猪精液中CAT活性及平衡后CAT mRNA表达的显著提高是黄芪多糖改善猪精液冻后质量的主要原因之一。     

浅谈牛毛滴虫病

牛毛滴虫病(Bovinetrichomoniasis)是通过牛性行为传播的一种疾病,可造成牛的不育、早期胚胎死亡、子宫积脓和明显延长产犊间隔。自Kunstle(1888)和Mazzanti(1890)报道牛毛滴虫病以来,到本世纪中叶已有近30个畜牧业发达国家先后发生了牛毛滴虫病(Skirrow,1988)。近几十年来虽然广泛推广应用人工授精技术,但由于感染公牛无任何临床症状,毛滴虫又能存活于新鲜和冷冻精液并经由输精器具传播,故牛毛滴虫病的发病率仍较高。其中澳大利亚北部的某些牛群达40％,美国南部某大型牛场达10％,东欧和苏联等地区的大型集约化牛场的发病率也较高(Williams等,1987)。感染牛群由于产犊率降低、泌乳量下降,造成巨大的经济损失。     

双峰驼精液的冷冻及输精效果

有关双峰驼精液的冷冻技术及输精试验,宁夏于1986年曾有报道,受胎率为76.1％,产羔率为61.96％。我们于1981年所进行的鲜精授精结果不佳,受胎率仅为31％。单峰驼及南美驼精液的冻精及人工授精在主要的繁殖杂志中尚未见报道。精液冷冻技术在国际上已广泛用于牛。冻精不但能长途运输,扩大优良公畜精液的利用率,而且还能延长优良公畜的利用年限。这一技术将成为各地甚至国     

日本血吸虫冷冻辐照童虫苗免疫程序的研究

应用日本血吸虫冷冻童虫苗于家畜的免疫程序的研究包括免疫次数、注射部位以及佐剂使用对免疫效果和现场应用的关系。为此,特在豚鼠进行试验。试验分9组进行,共用90只豚鼠。试验结果指出,冷冻辐照童虫苗可用来作皮内注射或肌肉注射。1次皮内注射加佐剂的减虫率达50.24％(P<0.001),仅略低于不冷冻的辐照童虫苗的减虫率(53.38％P<0.001),两者差异不显著。1次肌肉注射加佐剂的减虫率达40.62％(P<0.001)。但1次肌肉注射不加佐剂的减虫率亦达40.66％(P<0.001)。2次肌注的减虫率并不显著地高于1次肌注的。可见冷冻辐照童虫苗作皮内注射要加佐剂。作肌肉注射不必加佐剂,亦不必作2次免疫。     

冷冻蚀刻技术简介(续)

《中国兽医科技》1985年第4期60～62页,对冷冻蚀刻技术作了概要的介绍。现将有关补充材料概述如下。 (一)在冷冻蚀刻装置中制备样品的复型膜时,如果真空度低于1×10~(-5)托时,则喷射的碳粒就会太大。太大的碳粒附于样品上就会掩盖样品的细微结构,这势必影响观察结果。所以使样品室的真空度维持在1×10~(-5)托～1×10~(-6)托是很重要的。 (二)实践中,要正确地掌握喷涂的方法、电流的大小及蚀刻的温度与时间。复型膜太薄时,说明喷涂不好。电镜下图像的反差不够,导致看不清楚;复型膜太厚时,虽然图像的反差会很好,但电镜下观察又困难(光点不亮—透过的电子束数量少),所以只好改用大孔经光栏并同时提高加速电压,以提高电子束的穿透能力。但加速电压如果太高时(不是常用的加速电压值),又会使复型膜中的铂粒子再结晶而形成再结晶     

高压均质(HPH)处理鸡蛋卵黄对猪冻精质量的影响

为探究高压均质(HPH)处理鸡蛋卵黄对猪精液冷冻效果的影响。选取Tris—柠檬酸—葡萄糖基础稀释液,以未处理的鸡蛋卵黄(20%EY)为对照组,添加经HPH处理后的鸡蛋卵黄(20%EY)为试验组,制成Ⅰ液和Ⅱ液,冷冻-解冻后分别对猪精子活力、活率、顶体完整率、质膜完整率、线粒体活性、抗氧化指标及DNA完整率和凋亡指标进行检测。结果显示,经HPH处理能有效提高猪精子冻后质量。精液解冻后精子活力、活率、顶体完整率、质膜完整率分别为84.32%、86.71%、68.92%、59.09%,较对照组分别提高了13.7%、16.58%、6.5%、4.88%(P0.05)。与对照组相比,试验组的MDA和ROS较对照组均有所上升(P0.05),SOD较对照组有所下降(P0.05)。但冻后精子NO和NOS含量显著降低(P0.05)。试验组的精子解冻后DNA片段完整性较对照组明显提高(P0.05),凋亡率下降(P0.05)。结果表明,HPH处理鸡蛋卵黄能有效提高猪精液冷冻后质量。     

禽流行性感冒诊断的实验室技术(续)

(四)AIV的实验室技术 美国农业部颁布AIV实验室技术的标准操作法如下: 1.AIV的分离和鉴定:按下述步骤进行。 (1) 采集和邮寄病料:应把搜集到的病料放入脑、心肉汤管内。病鸡泄殖腔棉花拭子,每管放3～10个;单个鸡病料则采取气管棉花拭子,小块(5mm~3)肺和脾放入管内。在寄送病料前,搅匀挤干并弃去棉花拭子,单独将病料-脑、心肉汤管封牢。装入专用塑料袋内,用干冰冷冻保护,随付填写清楚的送检单,装入美国农业部专用的邮寄微生物病料的保险盒内,密封后快件寄往美国国家兽医服务实验室(NVSL)。     

海内外短波

《中国年》作家艾军主编的《中国年》一书由中国建材工业出版社出版。全书近20万字,对中华民族的节日风俗包括海外华人的中国年情结,一一叙述。特别是对外国人对中国年俗的喜爱,也做了绘声绘色的描述。作者专门辟出专章,对中华大家庭里各个少数民族的年节习俗作了精彩介绍。该书充满了时代气息,有关春节的联语、歇后语、故事、传说及手机短信息也收于书中,使读者耳目一新。(张力农)《蛋白指纹技术国际研讨会———中国成果展》蛋白指纹图谱技术是随着蛋白质组学的兴起而出现的一种技术,一经推出就受到世界学术界的青睐,成为医学界的热点。发…     

水貂枸橼酸菌病诊断报告

1988年7、8月间,辽宁省某水貂养殖场发生了一起以腹泻为主要临床症状的传染病。有400余只水貂发病,其中100余只死亡。经临床检查、尸体剖检、细菌学检验及临床治疗,确诊为枸橼酸菌 (三)讨论 本试验结果冷冻辐照童虫免疫组绵羊的平均减虫率55.1％,差异显著(P<0.05),说明用钴60丙种射线10千拉德辐照的日本血吸虫童虫,经不同时间(从24h至50天)冷冻于液氮解冻复苏后作为疫苗是能够激发绵羊对同种血吸虫攻击感染的抵抗力的。绵羊是日本血吸虫宿主动物之一,是家畜血防工作的一种对象,这一初步结果是具有实际意义的。冻融死童虫作为疫苗是美国依阿华大学医学院李书颖教授等首先提出的,方法简单,不需辐照     

小鼠卵巢组织玻璃化冷冻保存的研究

为了探索小鼠卵巢组织玻璃化冷冻保存的有效方法,以5周龄昆明小白鼠的卵巢为材料,分别采用不同的冷冻保护剂、平衡时间、冷冻载体和组织块大小对小鼠卵巢组织进行玻璃化冷冻保存。玻璃化冷冻保存的基本程序:取小白鼠卵巢,切块,玻璃化冷冻。玻璃化冷冻效果评判的方法是解冻玻璃化冷冻保存的卵巢组织块,收集其中的未成熟卵,体外培养和体外受精,观察其体外成熟、体外受精及所形成胚胎的发育能力。结果表明,小鼠卵巢组织玻璃化冷冻保存以卵巢组织块大小为1mm3、以半麦管作为载体、在75mL/LED(EG+DMSO)中平衡15min、以用150mL/L ED玻璃化冷冻液处理3min的方法,冷冻保存效果最好。     

PTD-FNK蛋白对水牛精子的冷冻保护作用

PTD-FNK蛋白可以穿透细胞膜进入细胞内发挥抗凋亡作用,抵抗各种不利因素造成的细胞死亡,但国内未见将其加入水牛精液稀释液抑制精子冷冻凋亡的报道。本试验中,在水牛精液冷冻稀释液中添加不同浓度(0、0.1、1、10、100 nmol/L)的PTD-FNK蛋白,冻后检测精子常规质量指标的同时检测精子凋亡相关基因(Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9基因)mRNA表达和Caspase-3蛋白酶的活性;最后以最优PTD-FNK蛋白浓度批量生产冷冻精液,选择50头广西地方母水牛进行人工授精试验。结果显示:①1 nmol/L组精子质膜完整性和10 nmol/L组精子活力显著高于对照组(P<0.05),1 nmol/L组精子活力和1、10 nmol/L组精子活率极显著高于对照组(P<0.01),而100 nmol/L组精子活率却极显著低于对照组(P<0.01);②1 nmol/L PTD-FNK蛋白显著降低冻后精子Caspase-3 mRNA表达(P<0.05);③人工授精后第60天受胎率达60%,略高于其他研究者取得的受胎率(56.25%,P>0.05)。总之,PTD-FNK蛋白可以显著提高水牛精子冻后质量,其机制之一可能是它显著抑制了冻后精子Caspase-3 mRNA的表达;以PTD-FNK蛋白冷冻的水牛精液实施人工授精后可以取得比现有水平更高的受胎率。     

美国的高技术出口管制

一美国对高技术出口一贯采取管制政策。随着技术更新的加快,管制也更为加强。管制的根本目的在于保持美国的技术领先地位,从而维护其经济和军事力量在世界上的优势。目前美国有四种出口管制:(一) 国家安全管制。这是一种长期的管制,基于国家安全和防务考虑,美国一直严禁向其他国家转让先进的军事技术和重要的双重用途(军用与民用)技术。具体由商业部、国防部、财政部、海关署及情报机构根据出口管理法和武器出口管制法等加以实施。(二) 外交政策管制。这是一种特定时期的管制,是为达到一定的外交政策目的对特定国家进行的管制。具体由国务院、商业部、财政部及海     

绵羊肺炎霉形体病几种诊断方法的比较

绵羊肺炎霉形体病自1963年由Mackay确诊以来,相继在许多国家或地区流行。我国四川、云南和宁夏等省区也有本病发生的报道。数十年来,对该病病原的研究资料较多,并已由Johs(1986)进行了评述。有关该病的诊断方法有免疫荧光(Ro-     

性别控制胚胎玻璃化一步法稀释冷冻保存技术的研究

为了创立在用户庭院就能应用的玻璃化保存性别控制胚胎的冷冻剂稀释处理方法,采用细管内3种不同液体层构成(A、B、C)法,对新鲜分割胚一步法稀释后的存活能力进行了研究;其次用特定细管最小容量冷却法与上述3种不同液体层构成中效果较好的B法对玻璃化冷冻溶解的新鲜分割胚、体外受精分割胚及冷冻溶解的体外受精分割胚进行一步法稀释后的存活能力予以对比。结果,3种不同液体层构成间胚胎的存活能力无显著差异,B法较高;应用特定细管最小容量冷却法在冷冻溶解的新鲜分割胚、体外受精分割胚及冷冻溶解的体外受精分割胚一步法稀释后的存活能力均显著高于B法。结果表明,特定细管最小容量冷却法是更有效的保存方法。     

超低温保存对姜曲海公猪精子超微结构损伤的研究

猪精子对低温尤为敏感,极易遭受低温损伤。本文旨在探讨冷冻前后猪精子超微结构变化,为改善猪精子冷冻保存方法奠定基础。通过手握法采集姜曲海公猪精液,使用0.25 m L细管对精液进行超低温冷冻保存,用扫描电镜和透射电镜对冷冻前后精子超微结构进行观察。结果显示,冻后姜曲海猪精子活力、质膜完整率、线粒体活性和顶体完整率(分别为38.6%、40.5%、42.7%和43.6%)均显著(P0.05)低于新鲜精子(分别为81.9%、85.7%、89.5%和90.2%)。姜曲海猪精子全长约54.4 m,由头、颈、体和尾4部分组成;冻后正常的精子,表现为质膜、顶体和线粒体结构完整,顶体光滑,线粒体排列整齐,核染色质均匀;冻后异常精子主要表现为颈部断裂或膨胀,顶体表面粗糙或缺失,质膜膨胀或缺失,或线粒体移位。上述研究结果表明,超低温保存对姜曲海猪精子超微结构造成的损伤主要集中于质膜、顶体和线粒体。     

1986-92年泰国外资投资的发展趋势

一、发展趋势概览 1985年9月西方五大国财政部长会议协调了北北经济关系之后,日元升值、美元贬值,接着在美国的压力之下,南朝鲜圆与台湾新台币对美元的汇率比值也随后升值,这就大大地削弱了日本、韩国与台湾中小企业的出口竞争能力,迫使它们进行资本外流,向亚洲地区一些劳动力较为低廉的发展中国家(主要是东盟国家与中国大陆)转移劳动集约型出口工业生产基地和部分技术集约型出口工业生产基地(主要是由日本企业进行转移的)     

第二届东北亚经济技术发展国际研讨会在长春召开

<正> 由中国亚太研究会(API)和美国东西方中心(EWC)联合主办的第二届东北亚经济技术发展国际研讨会于1991年8月29日～31日在长春市召开。会议由中国亚太研究会理事长马宾教授和美国东西方中心学术事务副主任赵利济博士主持。参加会议的有以马宾教授为团长的中国代表团,以赵利济博士为团长的美国代表团,