布鲁氏菌无凝集原菌苗的研究

应用改良的生长凝集试验从大量羊种布鲁氏菌菌株中选育出1株理想的无凝集原菌苗菌株(编号M-111)。该菌株为粗糙型,弱毒性,且遗传性状稳定。用M-111菌株制造的活菌苗对绵羊作免疫试验证明,保护率达69.23～100％。实验室和田间试验证明,M-111菌苗接种绵羊不产生常规血清学试验(试管凝集试验、补体结合试验、虎红平板凝集试验)的诊断抗体,因而有可能解决因菌苗接种而干扰对动物的血清学诊断问题。     

内蒙古新巴尔虎右旗牛羊布鲁氏菌病免疫效果观察

近年来 ,新巴尔虎右旗全面开展了畜间布鲁氏菌病免疫 ,为考核免疫效果 ,进行了流行病学调查 ,免疫羊不同时间和未免疫羔羊血清抗体检测 ,综合分析表明 ,近年全旗开展的布鲁氏菌病免疫获得良好的免疫效果。1　布鲁氏菌病的免疫情况前些年新巴尔虎右旗一直对当年羔羊、犊牛用布鲁氏菌Ｓ2菌苗进行饮水免疫 ,由于免疫密度低 ,保护率较差 ,布鲁氏菌病仍有散发流行。近几年在全旗全面开展布鲁氏菌病畜间免疫 ,对全旗牛、羊改用布鲁氏菌Ｍ 5活菌苗注射和布鲁氏菌 (Ｓ2株 )活菌苗口服免疫 ,1997-1999年累计免疫牛、羊 30 5 .6万头 (只、次 ) ,免疫密…     

布鲁氏菌M-111菌苗免疫绵羊耕牛的效果

布鲁氏菌M-111菌苗是近几年来由中国兽医药品监察所、内蒙古地方病防治研究所选用羊种布氏菌研制成功的一种新菌苗,本菌苗的最大特点是无凝集原性。1990年5月至6月我们应用该菌苗对金塔县耕牛、绵羊进行了免疫试验,其中免疫牛1750头,免疫羊101739只,免疫面达金塔县牛、羊饲养总量的65.25％。     

布鲁氏菌S19号菌苗免疫幼龄牦牛的免疫效果观察

布鲁氏菌Ｓ19号菌苗是一种对牛布鲁氏菌病具有良好免疫效果的生物制剂。鉴于其对成年牛免疫后抗体存留时间长而影响布鲁氏菌病的常规监测 ,故许多国家和地区主要用于幼龄牛 ,并且只用 1次即可获得终生免疫保护力。但截止目前尚未见对4— 8月龄牦牛免疫效果的报道。为了在我省牦牛集中产区推广应用布鲁氏菌Ｓ19号菌苗 ,以控制部分县布鲁氏菌病回升的趋势 ,我们于 1997— 2 0 0 0年在甘肃省张掖地区和甘南藏族自治州的 6个牧业县进行了该菌苗的免疫试验和推广应用。1　材料与方法1.1　布鲁氏菌Ｓ19号菌苗　由新疆生物药品厂提供。1.2　布鲁氏…     

布氏菌病检疫中一个值得注意的问题

我们曾用常规平板凝集反应(SPT)、常规试管凝集反应(SAT)、酸化平板凝集反应(CT)、半胱氨酸凝集反应(CY)、补体结合反应(CF)、缓冲试管凝集反应(BTT)六种血清学方法对用布氏羊五号苗气雾免疫的47只健康绵羊多次检验。初步证明在免疫后1年检疫,还有少数羊只的抗体仍不能消失。这给运输检疫和市场检疫工作带来较大困难,易将菌苗免疫与自然感染相混淆,是一个值得动检部门注意的问题。     

用绵羊测定副结核病弱毒菌苗免疫效力的研究

80只来自副结核病清净区的羔绵羊,随机地分为试验与对照两组,试验组接种副结核病弱毒菌苗,3个月后试验羊用4株初代分离培养的副结核菌口服攻毒,每周攻毒1次,连续攻毒10次,每次每只羊攻毒活菌6亿。攻毒结束后3、6、9、12个月分期剖杀试验羊,采取小肠、肠系膜淋巴结等病料进行细菌学和病理组织学检查,以判断副结核病弱毒菌苗的免疫效力。攻毒后3～6个月剖杀的试验羊,试验组与对照组的细菌学和病理组织学检查,差异不显著(P>0.05);攻毒后9～12个月剖杀的试验羊,试验组与对照组的细菌学和病理组织学检查,具有明显的差异(P<0.05)。试验结果表明,副结核病弱毒菌苗具有提高机体对副结核病免疫力的作用。     

羊流产衣原体卵黄囊甲醛灭活油佐剂苗的研究

McEwen和Stamp氏等曾用感染羊流产衣原体的胎衣或羊流产衣原体接种卵黄囊繁殖后制成的灭活苗,接种羊只后可产生高滴度的补体结合抗体,如制成矿物油佐剂苗,1次皮下注射所产生的免疫力可持续3年。近年来,英、法以及苏联等国,预防羊衣原体性流产,仍使用卵黄囊灭活苗。 1981年起,我们在羊衣原体流产病原研究的基础上,用从甘肃和青海省分得的绵羊和山羊流产衣原体,试制成羊流产衣原体卵黄囊甲醛灭活油佐剂苗(以下简称灭活苗)。经过一系列的免疫试验证明,这种灭活苗,注射怀孕绵羊和山羊,均很安全,最小有效免疫量为1ml;免疫持续期和有效保存期,均在2年以上,按《羊流产衣原体卵黄囊甲醛灭活油佐剂苗制造及检验试行规程》(以下简称     

羊衣原体性流产的研究——免疫试验初报

为了预防羊衣原体性流产,McEwen、Stamp等曾用含有多量原生小体的胎衣或者将流产衣原体接种鸡胚卵黄囊制成的各种衣原体苗,接种羊只后可产生高滴度的补体结合抗体。在福尔马林灭能苗中加入矿物油佐剂,一次皮下注射所产生的免疫力能持续3年。 Mitscherlich(1965)、Schoop等(1968)和Nevjestic等(1970)报道了通过鸡胚致弱的活苗免疫成功的经验。据说这种活苗的免疫原性与福尔马林灭能苗相等。这种活苗的优点是注射羊只后在血液中不出现补体结合抗体,有利于在流行病学调查时区分健康羊和受感染的羊,为制定预防措施提供依据。     

生物素—亲和素免疫酶标法检测绵羊布氏杆菌抗体的研究

本试验使用生物素——亲和素免疫酶标法(BA-ELISA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)对221份绵羊布氏菌病血清抗体进行了检测,同时与常规血清学检测法进行了比较。结果表明BA-ELISA和ELISA的检出率明显高于其它方法。在其中63份菌检阳性和免疫血清中,BA-ELISA和ELISA分别检出60/63份(95.3％)和52/63份(82.5％),而试管凝集试验为20/41份(48.8％),补体结合试验为17/41份(41.5％),虎红平板试验为16/41份(39.0％),此外,还就BA-ELISA法特异性,敏感性等方面进行试验,显示出BA-ELISA具有很强的特异性,其敏感性比ELISA高4～8倍,比常规补体结合反应高256倍。这些都表明BA-ELISA是绵羊布氏菌病血清学诊断上具有发展前途的新方法。     

从流产羔羊骨髓中分离出一株牛I型布氏菌

为考核我区经多年的布氏羊型5号菌苗气雾免疫后的效果,我们曾在酒泉、金塔、玉门、安西、敦煌等5个县(市)开展布氏菌病检菌工作,共收集牛、羊、猪可检材料1557份,其中:流产胎羔582份,在酒泉、安西检出可疑布氏菌8株。对这些可疑菌株进行了菌型鉴定和毒力测定,其结果报告如下:(一)材料与方法1.布氏菌多价诊断血清:为兰州生物制品所生产,批号:9001,效价1:3200。2.M_(104)冻干菌苗:为兰州生药厂生产。3.S_2冻干菌苗::为兰州生药厂生产。4.M_5冻干菌苗:为兰州生药厂生产。5.单因子诊断血清:ARM,系北京流行病研究所生产。6.牛型噬菌体:由北京流行病研究所生产。     

应用免疫酶组化法检测病料中的布鲁氏菌

目前,在对布鲁氏菌病临床流产材料及其它病理材料中的布鲁氏菌检查、疫情监测方面,尚无一快速、敏感、实用的方法。为此,本文建立了3种免疫酶组化法(直接法,间接法和SPA法)对5个种14个生物型布鲁氏菌进行了检测,并探讨了这3种免疫酶组化法的应用价值。(一)材料和方法1.实验动物:①家兔,2.5～3kg,布鲁氏菌血清学检查阴性;②怀孕30～35天的豚鼠,布鲁氏菌血清学检查阴性;③小白鼠,18～22g。2.菌种:①布鲁氏菌:5个种不同型别的布鲁氏菌共17株,来源于卫生部药品生物制品检定所。②对照菌:共50株,其中大肠杆菌11株,变形杆菌3株,波氏杆菌1株,羊流产沙门氏菌,牛流产沙     

鸡传染性法氏囊病蜂胶灭活苗的研究─—疫苗制造安全性与免疫效力试验

用分离自甘肃兰州和天水的鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）Ｌ＿２株和Ｔｓ株，以对倍的蜂胶水乳剂为佐剂，制备鸡传染性法氏囊病蜂胶灭活疫苗。用该苗０．５ｍｌ接种５日龄或７日龄雏鸡，免疫后２１天ＡＧＰ抗体阳性率可达５０％～６０％，免疫后２８天，ＡＧＰ抗体阳性率可达１００％。用该苗１ｍｌ免疫产蛋鸡，免疫后２１天ＡＧＰ卵黄抗体效价可达１：６４以上。     

鸡马立克氏病造成免疫抑制的调查报告

通过某鸡场马立克氏病(MD)鸡群和免疫鸡群兔疫力的试验观察,发现MD群接种鸡新城疫Ⅰ系苗后180天HI效价4.39(logz),低于同期接种Ⅰ系苗的免疫群6.38(logz),经t检验,差异极显著(P<0.01);用鸡痘苗接种后MD群的保护率为16％,而免疫群的为97％。MD群的白痢、霉形体的自然感染率分别为54％,97％,而免疫群的分别为25％和51％,经抗体生成试验和PHA皮试法测定,MD组的免疫力显著低于免疫组。从而证明,MD不仅可以造成细胞免疫功能的抑制,也同时造成体液免疫功能下降。     

基于布鲁氏菌Dps蛋白间接ELISA检测方法的建立与初步应用

为建立一种布鲁氏菌病早期快速诊断的血清学方法,进一步加强对布鲁氏菌病的防控.对布鲁氏菌Dps蛋白进行生物信息学分析、原核表达,将纯化后的重组蛋白作为包被抗原,建立了布鲁氏菌病血清学间接ELISA检测方法并进行初步应用.结果显示,当重组蛋白Dps包被量为0.25 μg,5％脱脂奶粉溶液封闭1.5 h,用稀释度为1∶1 0...     

用酶联免疫吸附和双向免疫扩散方法诊断牛嗜皮菌病的研究

目前已知我国某些地区有嗜皮菌病流行。为适应大群检疫和流行病学调查之需,亟应研究出一种敏感性高、特异性强、简单易行的血清学诊断方法。但由于嗜皮菌病产生较少的循环抗体,所以给该病的血清学诊断带来一定困难,致使国内外长期以来均依靠细菌学方法确诊,这给普查和防治造成极大的不便。近几年来,国外对于嗜皮菌病血清学诊断已有较多的研究,国内还未见这方面的报道。我们参照有关资料对酶联免疫吸附试验(简称ELISA)和双向免疫扩散试验(简称DID)方法用于诊断牛嗜皮菌病进行了研究。     

不同血清学方法检测牦牛布病结果的比较分析

在家畜布鲁氏菌病(以下简称布病)的血清学检查中,世界各地所采用的主要常规方法有平板凝集试验(PAT)、试管凝集试验(SAT)和补体结合试验(CFT)3种,但发现采用的凝集反应受非特异性抗体的干扰较大。为此寻找特异性高、简便、又能排除非特异性的检验方法是十分重要的。近年来,国内一些单位先后应用EDTA(乙二胺四乙酸)改良SAT对牛、猪、羊布病检查做     

抗仔猪白痢大肠杆菌甲醛苗的制造与应用

仔猪白痢在我市一些养猪场每年都有不同程度的发生,据调查赤峰市南部地区及本所试验猪场,多年来仔猪白痢病的发病率达45％～70％左右。应用药物治疗,虽有较高的疗效,但仔猪生长发育受阻比较严重,为减少仔猪白痢病的发生,保证仔猪正常发育,增加经济效益,我们于1979～1981年筛选出抗白痢免疫原性强而稳定的不同菌株组成联合甲醛菌,应用该菌株采取6种不同的免疲途径接种。经对比试验证明,以产前与产后对母猪做两次菌苗接种所生仔猪获得抗白痢的免疫力效果最好。故于1982～1988年采取该办法在赤峰地区6个猪场接种母猪554头,免疫仔猪4372头与同群的143头母猪未免疫的1129头仔猪相比,菌苗接种群的仔猪白痢、黄痢发病率明显下降。     

预防仔猪大肠杆菌性腹泻K_(88)遗传工程菌苗免疫途径和剂量的研究

将61头怀孕母猪分成5个组,给第Ⅰ组皮下注射K_(88)遗传工程菌苗500亿死菌,第Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组分别口服1000亿、500亿和250亿活菌;第Ⅴ组不接种菌苗作为对照。结果各免疫组母猪所生仔猪的发病率明显下降,其中第Ⅲ组的免疫效果最佳。     

猪瘟间接血凝试验的研究

猪瘟兔化弱毒珠的细胞培养物浓缩纯化后,致敏戊二醛鞣酸处理 的健康绵羊红细胞,制成冻干猪瘟间接血凝诊断液,用以检测血清中的抗猪 瘟抗体效价。经室内外376份免疫猪、45份非免疫猪血清检测结果表明符合 率高达98％。检测猪瘟抗体消长动态的结果证明,接种冻干猪瘟弱毒疫苗后第3～4天出现特异抗体,第15天抗体效价进入高峰期并维持到接种后的第3个月,然后缓慢地下降,于接种后的第11个月消失。该法操作简便,无需特殊仪器设备;特异性强不与其他传染病阳性血清发生交叉凝集;快速,2小时内可判定检测结果;重复性好,不同批次诊断液检测同一血清样品结果一致;保存期长,冻干的诊断液4℃贮存一年半有效。液体诊断液4℃贮存6个月效价不降,37℃存放14天对诊断液质量无影响。适合广大基层现地进行猪瘟弱毒冻干苗免疫猪群的抗体水平和仔猪母源抗体水平监测,以便制定合理的免疫程序,充分发挥疫苗的预防效果,确保养猪业的安生生产。     

禽流感H9亚型油乳剂灭活疫苗的改进

用新引进的 6株禽流感病毒 (AIV )H9亚型和现制苗用的AIV H9毒株分别制备AIV H9、AIV H5、NDV二联三价油乳剂灭活疫苗 ,免疫 5日龄和 10日龄雏鸡 ,于免疫当日直至 80日龄鸡出栏期间定期采血 ,用HI法检测相应的AIV H9、AIV H5和NDV抗体。结果表明 ,10日龄免疫鸡的AIV H9抗体效价最高 ,5日龄和 10日龄免疫鸡的AIV H5抗体效价差别不明显 ;用引进的 3号AIV H9毒株制备的联苗对 10日龄雏鸡免疫后 2 0d产生AIV H9保护性抗体 ,一直持续到 80日龄以上 ,期间的抗体平均效价为 6 .72 (lb) ,而现制苗用的AIV H9毒株制备的联苗免疫力较差 ;现制苗用的AIV H5毒株制备的联苗免疫效力仍较好 ;分别接种 0 .2 5、0 .30mL/只联苗的雏鸡AIV H5抗体效价没有明显差别 ,而AIV H9抗体效价以接种 0 .30mL/只剂量的为高 ;不同日龄、不同免疫剂量的试验鸡NDV抗体效价没有明显差异。