NF—kB对神经系统的育和调节作用

细胞核因子kB(Nuclear factor-kB,NF--kB)对感染、免疫反应以及控制细胞分化和凋亡起到广泛的作用.这些作用在神经系统中较为明显.NF-kB通常以多种亚单位形式存在于各种神经细胞中,并通过多种激活途径被激活后从胞浆易位至细胞核内发挥转录激活作用.NF-kB在对神经系统发育和抗凋亡中以及调节胶质细胞活性过程中起到至关重要的作用,对NF-kB的有关研究对法医学将具有重要的指导意义.     

大鼠脑挫伤后细胞核因子кB的表达

<正> 细胞核因子κB(Neucler Factor-κB,NF-κB)是一类普遍存在机体中的细胞转录因子,在许多细胞中均有表达。功能性NF-κB复合物存在于神经系统中的各种类型的功能性细胞中,如神经元、星形胶质     

核因子-κB及其在创伤性脑损伤后的作用

核因子-κB是一种具有多向性调节作用的核转录因子.机体受到创伤后,NF-κB被激活,调节多种炎性介质基因转录,引起局部及全身的炎症反应.对NF-κB的有关研究可望用于法医学家对损伤时间的推测.     

NF—κB与神经系统损害的研究进展

神经系统损害在法医学鉴定实践中较为常见，同时也是法医学鉴定的难点之一。近年来，国内外学者试图通过核转录因子-κB（nuclearfactor-kappa B，NF—κB）的激活情况来为神经系统损害程度的法医学鉴定提供客观依据．并研究在神经系统损伤后NF—κB表达的时间变化规律，为法医学损伤时间推断提供新的客观指标。本文综述了脑缺血、脑外伤、阿尔茨海默病、肌萎缩侧索硬化病等一系列神经系统损害与NF—κB激活的关系、研究进展以及尚需解决的问题。     

早期心肌缺血猝死心肌NF-κB p65的表达研究

目的探讨核因子NF-κBp65（NF-κB p65）在心肌早期缺血猝死后诊断中的法医学价值。方法将收集的案例心肌蜡块分为3组：正常对照组（3例）、早期心肌缺血组（14例）、心肌梗死组（8例）,采用免疫组织化学技术（SP法）,观察猝死心肌内NF-κBp65的表达情况,并对其结果进行半定量分析。结果早期心肌缺血组和心肌梗死组的心肌细胞胞浆内及细胞核内均出现NF-κBp65的表达,且早期心肌缺血组与心肌梗死组表达强度无差异。结论NF-κBp65可以作为早期心肌缺血猝死的一个辅助诊断指标。     

FAK—ERK的研究进展及其法医学应用价值

细胞内黏着斑激酶（focal adhesion kinase，FAK）和细胞外信号调节蛋白激酶（extracellular signal—regulated protein kinase，ERK）均是重要的信号转导分子，二者在信号从表面受体转导至细胞核过程中起到关键作用。当受到细胞外刺激时，FAK被激活而发生磷酸化，磷酸化的FAK激活下游的ERK，通过ERK改变细胞行为。这样，FAK-ERK信号传导因子就参与了细胞增殖、分化、应激、凋亡和恶变等多种生物学反应。本文对FAK—ERK的生物学特性以及其在组织损伤中作用的研究进展作一综述，以期为组织损伤时间推断的法医学研究提供更为有效的方法。     

核因子-кB及其在创伤性脑损伤后的作用

核因子-кB是一种具有多向性调节作用的核转录因子。机体受到创伤后,NF-кB被激活,调节多种炎性介质基因转录,引起局部及全身的炎症反应。对NF-кB的有关研究可望用于法医学家对损伤时间的推测。     

大鼠脑挫伤后NF-κB表达的分子生物学研究

目的阐明不同程度及不同时间脑挫伤后NF-κB表达的变化。方法应用免疫组织化学染色、Westernblot和RT-PCR方法对48例不同程度实验性脑挫伤大鼠的脑组织进行了检验,同时以3例非脑挫伤和3例假手术大鼠的脑组织做对照。结果伤后1hNF-κB即有表达、24～48h达高峰,一周后停止表达。阳性细胞多集中于挫伤区及周围带皮质和脑实质内海马区;不同程度脑挫伤组之间于伤后各个时间段NF-κB表达无明显差异。结论本实验首次通过对不同程度脑损伤后NF-κB表达量的研究,找到其表达的时间性变化规律,对确定脑挫伤形成时间有意义,但不能作为判断脑挫伤程度的指标。     

αB晶状体蛋白在视网膜及眼外组织器官中表达及其作用机制

αB晶状体蛋白是脊椎动物晶状体的结构性蛋白,广泛表达于非晶状体组织中。αB晶状体蛋白作为热休克蛋白家族成员之一,具有分子伴侣和抗细胞凋亡等生物学功能。多种因素引起的损伤,如视网膜病变、炎症反应性疾病和神经系统疾病等都与αB晶状体蛋白存在密切关系。本文综述了αB晶状体蛋白在视网膜及眼外组织器官中表达及其作用机制的研究进展。     

大鼠皮肤挫伤后NF-κB mRNA表达与损伤时间关系

目的应用实时定量PCR技术检测大鼠皮肤挫伤后NF-κB mRNA时序性表达规律，分析其与损伤时间的关系。方法制备大鼠皮肤挫伤模型，于伤后0．5，1，6，12，18，24，30h取材，一步法提取总RNA，检测其完整性和浓度，按照0．4μg总RNA量逆转录合成第一链cDNA，以rlp32为内参基因进行荧光定量检测，采用△Ct法比较其与正常皮肤组织NF-κB mRNA表达的倍数关系。结果皮肤挫伤组织中NF-κB mRNA伤后0．5h表达显著增强（P〈0．05），6h出现高峰，12h降至正常水平，随后略有回升。结论大鼠皮肤挫伤组织NF-κB mRNA的表达，随着损伤经过时间的延长呈规律性变化。     

NF-κBp65和ICAM-1在急性心肌缺血和再灌注损伤中表达的意义

目的观察急性心肌缺血再灌注后NF-κBp65和ICAM-1在心肌组织中表达的规律,探讨急性心性猝死的诊断指标.方法用免疫组织化学方法观察兔心肌缺血再灌注后NF-κBp65和ICAM-1蛋白在不同实验组中的表达规律,以正常组作为对照.结果(1)正常对照组:NF-κBp65蛋白未见表达,ICAM-1蛋白在心肌组织中有低水平表达;(2)心肌缺血组:心肌组织中均可观察到NF-κBp65和ICAM-1蛋白的表达;(3)心肌缺血再灌注组:心肌缺血再灌注0.5h,即可发现NF-κBp65和ICAM-1蛋白的表达;心肌缺血再灌注1h,心肌组织中NF-κBp65的表达至高峰,ICAM-1蛋白的表达逐渐增加;心肌缺血再灌注2h,心肌组织中NF-κBp65的表达下降,ICAM-1蛋白的表达至高峰;心肌缺血再灌注4h,心肌组织中NF-κBp65和ICAM-1蛋白的表达均逐渐下降.结论在心肌缺血再灌注时,心肌组织中有NF-κBp65和ICAM-1的表达,并随时间呈一定规律性变化.     

过度机械通气致肺损伤TNF-α、IL-1β及NF-κBp65的表达

目的探讨过度机械通气致肺损伤后,炎症因子TNF-α、IL-1β及NF-κBp65在肺组织中不同时间表达的变化规律。方法将51只雄性新西兰大白兔分为正常组、对照组、实验组。利用呼吸机建立过度机械通气致肺损伤模型。应用免疫印迹技术观察兔急性肺损伤后肺组织中TNF-α、IL-1β及NF-κBp65的表达,并用凝胶图像处理系统进行分析,所得数据经SPSS 10.0统计软件处理。结果正常组与各对照组之间比较,均无明显差异(P>0.05)。TNF-α在损伤后0h表达即增加,1h达高峰,以后逐渐下降,而在24h后又有反弹性增高;其中在0.5、24、48h组有差异性(P<0.05),1、3h组有显著差异性(P<0.01)。IL-1β在损伤后0.5h逐渐增加,3h达高峰,以后逐渐下降,其中在1、6、12、24h组有差异性(P<0.05),3h组有显著差异性(P<0.01)。NF-κBp65在损伤后0.5h逐渐增加,6h达高峰,以后逐渐下降,其中在1、12h组有差异性(P<0.05),3、6h组有显著性差异(P<0.01)。结论TNF-α、IL-1β及NF-κBp65在过度机械通气致VILI发病中有重要作用;TNF-α、IL-1β及NF-κBp65在损伤早期即表达,且在时间上有一定的变化规律,可为损伤时间的推断提供参考。     

NF-kB在神经元变性中的作用

<正> 细胞核因子kB(Nudear Factor—kB,NF—kB)是1986年由Sen和Baltimore首先描述,是一种B细胞核因子,可与免疫球蛋白的轻链(k链)增强子结合并具有结构性转录激活活性,故命名为细胞核因子或称k基因核因子。随着研究的进一步深入,发现NF-kB是一类普遍存在的细胞转录因子,在其它细胞中也有表达[1]。它调控着编码细胞因子、生长因子、细胞粘附分子和一些在健康和疾病状态下的急性蛋白因子。     

c-jun及其表达产物的法医学应用前景

c-jun基因是即刻早期基因jun家族成员之一,正常情况下该基因在大多数细胞中表达水平很低且不易被检测到,但在外界某些因素作用下,可被快速激活使之明显表达,其表达产物在多种基因表达、细胞增殖、细胞分化、凋亡等过程中起重要作用。本文综述了即刻早期基因c-jun及其产物c-jun蛋白的结构特点、生物学功能,着重从脊髓损伤、颅脑枪弹创、电击伤等方面阐述了其法医学应用。     

c-jun及其表达产物的法医学应用前景

c-jun基因是即刻早期基因jun家族成员之一,正常情况下该基因在大多数细胞中表达水平很低且不易被检测到,但在外界某些因素作用下,可被快速激活使之明显表达,其表达产物在多种基因表达、细胞增殖、细胞分化、凋亡等过程中起重要作用.本文综述了即刻早期基因c-jun及其产物c-jun蛋白的结构特点、生物学功能,着重从脊髓损伤、颅脑枪弹创、电击伤等方面阐述了其法医学应用.     

海洛因诱导大脑神经元凋亡的研究

目的观察海洛因有无直接诱导培养大脑神经元凋亡的作用。方法神经元培养取自SD大鼠妊娠的胎鼠大脑皮质,培养7d后分别用不同浓度的海洛因(纯度80%)处理大脑神经元24h。用FDA法分析细胞存活率,Hoechst 33258荧光染色后观察凋亡的形态学改变,再用DNA琼脂糖凝胶电泳分析凋亡的生化特征。结果海洛因可剂量依赖性地降低神经元的存活率;荧光显微镜可见细胞核染为高亮蓝色的典型凋亡小体,其细胞核明显固缩、凝聚和断裂,且随海洛因剂量的增加,出现凋亡小体的细胞明显增多;不同浓度的海洛因处理大脑神经元,电泳图谱显示清晰的DNA梯带。结论海洛因可直接诱导大鼠大脑皮质神经元凋亡。     

内质网应激参与介导脂多糖诱导的大鼠肝细胞凋亡

目的探讨内质网应激在脂多糖（1ipopolvsaccharide,LPS）诱导的肝细胞凋亡中的作用。方法肝细胞系BRL细胞培养,用LPS、内质网应激诱导剂毒胡萝卜素（thapsigargin,TG）、内质网应激抑制剂4-苯基丁酸（4-phenylbutyricacid,4-PBA）分别或组合处理肝细胞。用M1Tr比色法检测细胞活力的变化．Heochst33258荧光染色检测细胞凋亡形态的变化,AnnexinV-FITC／PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率．Western印迹法检测内质网应激标志蛋白GRP78和内质网应激相关的凋亡蛋白CHOP、caspase-12和激活型caspase-3的表达。结果LPS引起肝细胞活力降低、细胞凋亡率明显增加,并具有量效和时效关系,LPS诱导GRP78、CHOP、easpase-12和激活型caspase-3的表达上调：TG可引起肝细胞活力降低和细胞凋亡增加,并能加重LPS引起的肝细胞损伤;4-PBA明显抑制LPS引起的肝细胞凋亡增加。结论内质网应激拳与介导了T,PS引起的肝细胞凋亡．提示内盾网应激暑T,PS诱导肝细胞桶伤的节娶发病给径-     

calpain与细胞凋亡

calpain是钙激活中性蛋白酶,属于半胱氨酸蛋白水解酶超家族成员。是由分子量为80KD的催化亚单位和分子量为30KD的调解亚单位组成的异二聚体。研究最多的是calpain1和2,它们又称μ-calpain和m-calpain。calpain被认为与细胞骨架重塑、信号转导途径、调控细胞周期、基因表达调控、某些凋亡途径以及长程增强效应等有关。calpain参与了细胞凋亡,而calpain抑制剂可以阻止细胞的凋亡。     

大鼠心肌急性缺血再灌注NF-кB P65和caspase-3的表达

目的观察大鼠急性心肌缺血再灌注后NF-кBP65和caspase-3在心肌中表达的规律,为心肌急性缺血早期死亡的法医学鉴定提供科学证据。方法运用免疫组化和图像分析技术观察66只SD大鼠心肌缺血再灌注后NF-кBP65和caspase-3蛋白在不同实验组中的表达规律。结果心肌缺血组缺血区域心肌组织缺血5min就可见NF-кBP65和caspase-3蛋白表达,并随缺血时间延长表达逐渐增强;而非缺血区域心肌组织仅见低水平表达或不表达;但两种蛋白(两者)并非在缺血区域心肌同一部位表达,也不是在心肌细胞内的同一部位表达;caspase-3主要在心肌细胞浆表达,而кBP65既在心肌细胞浆表达,也在心肌细胞核中表达。心肌缺血再灌注组(在)心肌缺血5min~1h内,再灌注与否并不影响这两种蛋白的表达。正常对照组未见这两种蛋白表达。结论心肌缺血再灌注时,心肌组织中有NF-кBP65和caspase-3蛋白的表达,这两种蛋白在心肌中的表达可视作诊断早期心肌缺血的参考指标。     

ApoE的研究进展及其在脑外伤发生中的意义

载脂蛋白E(ApoE)是血浆中主要的载脂蛋白之一,参与机体的脂质代谢及调节胆固醇平衡,其基因多态性与多种疾病相关,在神经系统的正常生长和损伤后的修复过程起重要作用。近来发现其免疫反应性与脑损伤时间有一定规律性,可望将其作为法医检案中判定脑损伤时间的客观指标。