温度对Chelex 100法提取血斑DNA的影响

目的:探讨用Chelex 100法提取血斑DNA时,56℃消化时间、100℃煮沸时间长短对STR扩增的影响。方法:分别改变提取过程中56℃和100℃时间,观察其扩增结果。结果:56℃这一步骤的消化时间分别设为10min、30min和2h,100℃煮沸时间设为4min、8min、15min和30min,以上步骤所提取的DNA其扩增结果有明显的差异。结论:在一定的时间范围内,每个STR基因座的峰值随着这两步骤保温时间的增加而增加。     

葡萄皮DNA检验

葡萄皮作为较少见生物物证的一种,在犯罪现场时有发现并提取,由于葡萄皮上附有的人口腔脱落细胞DNA含量较低并存在多种PCR扩增抑制因素,荧光STR检测成功率较低。对在入室盗窃案现场发现的葡萄皮用骨骼裂解液裂解提取,并用QIAquickRPCR Purification Kit硅胶膜过柱法富集纯化DNA,获得理想STR分型结果并通过DNA数据库比中嫌疑人,从而通过对葡萄皮DNA的成功检验在案件侦破、诉讼中发挥重要作用。     

对腐败血液DNA三种提取方法的比较

对新鲜的血液或者血痕,采用直接扩增和chelex-100直接处理提取DNA,一般都能获得完整、均衡的DNA分型,但在日常检案过程中,陈旧血痕、载体潮湿、委托方送检的样本由于保存不当导致血液和少量血痕检材腐败的情况也比较常见。这类检材DNA采用普通的chelex-100直接提取很难获得比较完整的DNA分型。结合一列检案,分别用chelex-100、磁珠法、微量DNA提取试剂盒三种方法专门针对腐败血液进行比较分析。     

应用改良Chelex-100法提取陈旧血痕DNA

陈旧血痕因血痕与载体结合紧密，血痕中有型成分不易溶解，因此应用常规Chelex-100法提取DNA很难成功。本文应用氨水浸泡检材，使血痕中的棱物质溶解，同时将Chelex-100度分别提高到15％和10％，使Chelex-100螯合力增强，提高了陈旧血痕DNA的提取效率。     

擦拭类痕迹脱落细胞提取方法的比较实验

目的：通过三种不同提取方法对同一非渗透性客体上的接触类生物检材进行提取．分析三种提取方法对DNA检出率的影响差异。方法：分别采用纱布擦拭法、棉签二步法和脱落细胞粘取器提取20处赤手桌面擦拭痕迹，进行DNA检测。结果：纱布擦拭法提取均未检出完整STR分型，其中25％检出部分STIR．分型及混合STR分型，其余75％为无效图谱或未检出；棉签二步法提取有10％检出完整STR分型，60％检出部分STR分型及混合STR分型，30％为无效图谱或未检出；脱落细胞粘取器法有10％检出完整STR分型，20％；fk出部分STR分型及混合STR分型。70％为无效图谱或未检出。三组结果间具有统计学显著性差异（P=0．009），其中棉签二步法结果最好，脱落细胞粘取器次之，纱布擦拭法效果最差。结论：对于非渗透性客体上的接触类生物检材的提取，使用棉签二步法的效果相对比较理想。     

一种植物物证的DNA提取方法

探索从微量植物检材中提取DNA的有效方法,并尝试应用于法庭科学实践。方法：采用优化改良的硅珠法,从10种不同的植物叶子中提取DNA（8种常见植物,2种毒品原植物）。通过紫外分光光度法、琼脂糖凝胶电泳、PCR扩增及限制性内切酶消化对提取的DNA进行检测;最后以实际案例中的植物检材为研究对象,验证提取方法。结果：通过该方法提取的植物DNA纯度较高,质量较好。PCR扩增的条带清晰、明亮,无杂带。结论：该方法可有效去除次生物质对DNA的干扰,提取的基因组DNA可满足PCR扩增及以PCR为基础的实验需要,可以应用于法庭科学实践。     

从蚊子血中提取人类DNA基因的检测方法及法医学意义

探讨从蚊子血中提取人类DNA基因的检测方法及法医学意义。用Chelex-100法提取吸食人血的蚊子样本中的DNA，进行PCR扩增及PowerPlex16System检验，使新鲜的及生存时间在12h以内的蚊子样本体内人血能得到较好的分型，得出蚊子体内提取的人DNA可以用来进行DNA分型，对于案件的侦破有很大意义。     

应用QIAamp DNA Micro Kit（50）系统对微量体表脱落细胞DNA的提取纯化方法

衣帽等物上附着的微量体表脱落细胞DNA多态性分析成功与否，主要取决于细胞的采集与DNA提取技术。在2起交通肇事逃逸案例中探索采用吸尘设备收集细胞、3M9002A防尘口罩截流细胞的方法采集微量体表脱落细胞；利用QIAamp DNA Micro Kit（50）系统提取、纯化DNA，得到理想的STR分型结果。     

混合斑精液DNA提取方法的比较分析

在混合斑精液的DNA提取工作中,经常应用到的方法包括有机法、Chelex法、磁珠法等。实验应用20例不同检材,对同例检材用三种提取方法进行实验,实验以检验分析获得单人的STR分型为最终的阳性结果。采用SPSS13.0统计软件进行统计分析,不同实验方法检出率间进行χ2配对检验。结果显示:20例检验中,有机法获得阳性结果为17例,检出率为85%。Chelex法获得阳性结果为11例,检出率为55%。磁珠法获得阳性结果为16例,检出率为80%。三种方法检出率进行χ2检验,有机法与Chelex法两者差异有统计学意义,有机法与磁珠法两者差异无统计学意义,磁珠法与Chelex法两者差异有统计学意义。20例实验中,有机法获得阴性结果3例,磁珠法获得阴性结果4例,Chelex法获得阴性结果9例。Chelex法与有机法比较特异性100%,灵敏性64.71%。磁珠法与有机法比较特异性100%,灵敏性94.12%。在三种方法中,综合来看磁珠法是混合斑男性精液DNA提取实践工作中比较实用的方法。     

“502”胶显现指纹后对脱落细胞DNA提取的影响研究

探讨"502"胶对指纹脱落细胞DNA检验的影响。对60份不同材质上指纹捺印样本进行DNA检验并比较数据结果。不同材质上指纹捺印样本经过"502"熏显后采用M48磁珠提取法仍可获得STR分型。"502"胶未对检材的DNA含量及检出有显著影响。     

汗潜指纹DNA等位基因分型研究

采用Chelex-100法提取汗潜指纹DNA,采用ID试剂盒进行PCR扩增,AB-3130基因自动分析仪电泳,Genemapper3.2进行分析,部分汗潜指纹DNA等位基因出现混合样本分型结果,部分出现等位基因丢失及错误分型.     

Microcon-100超滤管在脱落上皮细胞DNA检验中的应用

近年来,DNA检验技术在办案中的应用范围越来越广,作用越来越大,对技术要求越来越高。特别是在极微量生物物证的DNA检验方面的技术还需要进一步探索和提高。用Microcon-100超滤管过滤浓缩的方法提取脱落上皮细胞DNA,能获得比较满意的结果。     

浅谈手印DNA技术

手印是犯罪现场上重要而又常见的痕迹物证之一,素有“证据之首”之美称。随着生物DNA技术的不断发展．从现场手印中提取到DNA已成为可能。但目前的手印DNA技术仍然面临着很多困难和挑战,在一定程度上阻碍了其发展。随着DNA的提取和分型扩增技长以及计算机信息技拳的不断发展,手印DNA技术将会给招纹学带来前所未有的飞跃。     

DNA分析技术的现状、问题及对策

阐述了sTR在我国存在的一些问题如何准确分型;STR的命名问题;实验室之间的结果比对等.为解决STR在我国存在的问题,应尽快完善DNA技术标准化、质量控制化.建立完善的DNA数据库,使我国DNA分析技术进入一个崭新的时代.     

微波提取山茱萸马钱素的工艺研究W

以山茱萸为原料，在微波场的作用下，进行了不同微波提取溶剂、料液比、提取时间、提取温度、提取功率和正交优化实验对山茱萸中马钱素提取率的影响研究。结果表明：影响微波提取的因素依次为提取时间、提取温度、提取功率。优选方案为：微波提取溶剂为水，料液比1∶30，提取时间10min, 提取温度70℃，提取功率300W,山茱萸马钱素提取率为0.80%。     

响应面法优化赤芝、紫芝子实体总三萜提取工艺

目的 优化《中华人民共和国药典》收载的灵芝品种赤芝、紫芝子实体中总三萜超声提取工艺。方法 以香草醛-冰醋酸法测定吸光度并计算总三萜得率,首先通过单因素考察提取溶剂、溶剂容积分数、超声时间、超声温度及料液比5个因素对灵芝中总三萜得率的影响,再采用Design-Expert软件通过响应面法优化其超声提取工艺。结果 赤芝子实体总三萜最佳提取条件：提取溶剂为无水甲醇,料液比为1∶38 g/mL,超声时间为30 min,超声温度为53 ℃;紫芝子实体总三萜最佳提取条件：提取溶剂为无水甲醇,料液比为1∶28 g/mL,超声时间为30 min,超声温度为53 ℃。验证试验结果表明赤芝、紫芝子实体中总三萜得率的平均值分别为1.202 3%、0.923 7%,与预测值比较,其RSD值分别为1.13%,0.86%,表明优化所得的提取工艺真实可靠。结论 优化所得的赤芝、紫芝两个品种的最佳超声提取工艺真实、可靠,可为灵芝品种的后续研究奠定基础。     

山西汉族人群19个STR基因座的遗传多态性调查及法医学应用

目的——调查19个STR基因座在山西汉族人群中遗传多态性,为其法医学应用提供基础数据。方法采用Golden Eye20A STR荧光标记复合扩增试剂盒,对山西汉族554份无关个体进行扩增,利用3130XL遗传分析仪对扩增产物进行电泳分型,统计19个STR基因座的等位基因频率和法医遗传学参数。结果——获得19个STR基因座的等位基因频率分布,分别检出14、9、19、17、15、9、8、11、8、8、11、8、10、8、20、8、13、12、17个等位基因,并分别获得19个STR基因座的Ho、He、DP、PM、PE及PIC等法医遗传学参数。结论——19个STR基因座组成的复合扩增系统在山西汉族人群中具有较高的遗传多态性和识别能力,可以应用于法医学个体识别和亲子鉴定。     

现场DNA生物检材的提取及注意事项

刑事案件的现场一般会遗留有受害人及嫌疑人的DNA生物检材,要成功检验这些DNA检材并将其转化为证据,如何发现、提取DNA检材就显得至关重要.刑事案件中适合DNA检验的生物检材包括血液(痕)、精液(斑)、唾液(斑)、脱落上皮细胞、毛发、组织、骨骼等.     

三种痕迹显现方法对唾液斑DNA检测影响

目的:该研究以唾液斑为研究对象,研究碘熏、茚三酮和"502"熏显等三种痕迹显现方法对唾液斑生物检材DNA检测的影响,同时探讨该三种方法在唾液斑生物检材发现上的作用。方法:分别采用碘熏、茚三酮和"502"熏显法处理烧杯口唾液斑,采用棉签擦拭法采集烧杯口唾液斑DNA,采用chelex法提取DNA,Identifiler Kit试剂盒进行PCR扩增,3130基因分析仪进行扩增产物分型。结果与讨论:"502"熏显、碘熏对唾液斑DNA检测无明显影响,且"502"熏显在唾液斑生物检材发现上具有应用价值。茚三酮喷显对唾液斑DNA检测影响大,经茚三酮喷显处理的唾液斑难以进行有效DNA检测。     

正交试验优化霍山米斛总多糖提取工艺

目的 建立霍山米斛总多糖的最佳提取工艺。方法 依据2015年版《中华人民共和国药典》第一部中铁皮石斛多糖测定方法,通过单因素考察及正交试验研究提取温度、提取次数、提取时间、料液比对霍山米斛总多糖提取率的影响,采用苯酚-硫酸法测定其多糖含量。结果 霍山米斛的最佳提取工艺为：提取温度为100 ℃,提取2次,每次提取2 h,料液比为1∶800(g/mL)。结论 所优选的工艺简单、方便、准确,适用于霍山米斛总多糖的提取。