基于网络药理学研究“杜仲-续断”药对治疗膝关节炎的作用机制

目的 基于网络药理学方法探讨杜仲-续断药对治疗膝关节炎的药效物质基础与潜在的分子作用机制。方法 通过TCMSP数据库挖掘杜仲、续断的主要化学成分,结合SwissTargetPrediction平台筛选出药物活性成分并通过Uniprot数据库进行靶点预测;通过GeneCards、OMIM、DrugBank、TTD数据库检索膝关节炎主要作用靶点,利用String平台进行蛋白质交互作用（protein-protein interaction,PPI）分析,制作PPI网络图;再根据David数据库进行基因本体论（gene ontology,GO）分析和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes, KEGG）通路富集分析,并通过Cytoscape3.8.0软件构建“靶点-通路”网络图。结果 杜仲-续断配对调治膝关节炎的核心活性成分为β-谷甾醇、槲皮素等,重要靶点有丝裂原活化蛋白激酶1（mitogen-activated protein kinase,MAPK）抗体、肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF）等。杜仲-续断配对治疗膝关节炎的生物学通路主要作用于TNF信号通路、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（phosphatidylinositol-3-kinase/protein kinase B,PI3K/Akt）信号通路、MAPK信号通路等。结论 杜仲-续断配对治疗膝关节炎具有多成分、多靶点、多通路的作用特点。     

基于网络药理学及分子对接探究银翘散“异病同治”小儿急性上呼吸道感染及小儿病毒性心肌炎作用机制

目的 采用网络药理学与分子对接方法探究银翘散“异病同治”小儿急性上呼吸道感染（acute upper respiratory infection in children，AURIC）及小儿病毒性心肌炎（viral myocarditis in children，VMC）的共同分子机制。方法 利用TCMSP数据库及CNKI数据库筛选银翘散的活性成分及靶点；通过GeneCards数据库和OMIM数据库分别筛选AURIC和VMC的相关靶点，获取银翘散与AURIC、VMC三者的交集靶点；利用Cytoscape 3.9.1软件构建“银翘散—成分—靶点”网络，分析重点活性成分；使用STRING数据库通过构建交集靶点的PPI网络以分析核心靶点；使用DAVID数据库对交集靶点进行GO功能和KEGG通路富集分析；利用Autodock Tools软件对核心靶点及主要成分进行分子对接。结果 筛选出银翘散129个活性成分，264个作用靶点；银翘散与AURIC、VMC共119个交集靶点；银翘散—成分—靶点网络的构建得出槲皮素、山柰酚、木犀草素、柚皮素、豆甾醇为排名前5的主要成分；PPI网络构建后得出STAT3、RELA、TNF、MAPK3、AKT1为排名前5的核心靶点；GO功能富集分析获得生物过程533条、细胞组成57条、分子功能94条，其中涉及基因表达的调控、凋亡过程的调控、激素的调控、代谢产物的调控、变老、对外来刺激的反应等生物过程，KEGG通路富集分析获得144条通路。分子对接结果显示，核心靶点与重点活性成分均具有良好的结合活性。结论 银翘散主要通过STAT3、RELA、TNF、MAPK3、AKT1等靶点，槲皮素、山柰酚、木犀草素、柚皮素、豆甾醇等主要活性成分和癌症信号通路、PI3K/Akt信号通路、TNF信号通路、AGE/RAGE信号、IL-17信号通路及Toll样受体信号通路等途径对AURIC、VMC发挥“异病同治”作用。     

基于网络药理学和分子对接技术探究脑络欣通治疗缺血性脑卒中的机制

目的 采用网络药理学方法探究益气活血方脑络欣通治疗缺血性脑卒中（ischemic stroke,IS）的作用机制,并通过分子对接技术进行初步验证。方法 通过TCMSP、ETCM、化学专业数据库及文献筛选脑络欣通活性成分及作用靶点,通过OMIM、DisGeNET、GeneCards以及Drugbank数据库挖掘IS相关靶点;将交集靶点导入STRING平台和Cytoscape 3.8.2软件构建PPI网络并通过拓扑分析获得核心靶点,同时构建“中药—活性成分—核心靶点—疾病”可视化网络图;运用R软件进行GO功能及KEGG通路富集分析。最后借助Auto Dock Tools软件以及PyMOL软件进行分子对接和可视化。结果 脑络欣通的潜在活性成分78个,治疗IS的潜在作用靶点200个,核心靶点包括STAT3、JUN、MAPK1、TP53等;作用较突出的活性成分包括槲皮素、β-谷甾醇、山柰酚、木犀草素等。进一步的生物功能分析获得150条信号通路,包括PI3K-AKT信号通路、HIF-1信号通路、FoxO信号通路等关键通路。分子对接结果表明关键活性成分与核心靶点之间存在分子结合位点,并有较强的结合活性。结论 益气活血方脑络欣通可能是通过多成分、多靶点协同作用于氧化应激、炎症反应、细胞凋亡、自噬等生理病理环节,从而发挥治疗IS的作用。     

基于网络药理学研究丹蛭降糖胶囊治疗糖尿病的分子机制

目的 采用网络药理学方法研究丹蛭降糖胶囊治疗糖尿病的潜在分子机制。方法 借助中药系统药理学平台和Swiss Target Prediction数据库检索丹蛭降糖胶囊的化学成分、对应作用靶标及靶标基因。通过GeneCards获取糖尿病相关靶点，将复方活性成分靶点和糖尿病靶点构建韦恩图，以寻找交集靶点，获得丹蛭降糖胶囊治疗糖尿病的预测靶标。利用Cytoscape 3.7.2软件构建药材-化合物-靶点（基因）网络，筛选关键化合物。利用STRING网站建立交集靶点蛋白相互作用网络，选出关键靶点基因。借助R软件对共同靶点进行GO分析和KEGG通路富集分析。结果 丹蛭降糖胶囊作用于糖尿病的活性成分有25个，相关靶基因76个。GO和KEGG分析结果显示，丹蛭降糖胶囊治疗糖尿病的机制共涉及1 702条生物学过程和149条信号通路。结论 丹蛭降糖胶囊治疗糖尿病的关键成分槲皮素、木犀草素、山奈酚等可能通过对AGE-RAGE、IL-17、TNF、HIF-1等信号通路的调控，最终达到治疗糖尿病的效果。其作用机制可能与抗炎，降低氧化应激水平，参与细胞的凋亡与损伤有关。     

基于网络药理学的鸦胆子活性成分抗肿瘤分子机制

目的 利用网络药理学方法探索鸦胆子抗肿瘤有效成分、潜在靶点及通路，探讨其“多成分-多靶点-多通路”的抗肿瘤作用机制。方法 ①从中药系统药理学数据库和分析平台中筛选出鸦胆子潜在的15个活性成分，根据DrugBank获取这15个活性成分的158个潜在靶分子。②利用String数据库构建这些靶分子的蛋白质-蛋白质相互作用网络，其中节点度值最高的基因JUN定义为核心基因，利用癌症和肿瘤基因图谱分析其在多个肿瘤中的作用。③利用R语言Cluster profiler包将这些靶分子进行基因功能分析和基因功能富集分析。结果 获取了鸦胆子潜在的15个活性成分，158个潜在靶分子及活性成分-靶蛋白网络，并发现了其在多种肿瘤、多种成分、多种通路有着不同的比重和作用。结论 网络药理学方法可为解析鸦胆子多成分、多靶点、多通路、多肿瘤的关系网络，阐述其抗肿瘤的分子机制提供思路和方法，为其临床应用提供相应的理论依据。     

基于网络药理学和分子对接验证技术探讨贯叶金丝桃抗阿尔茨海默病的作用机制

目的 利用网络药理学及分子对接技术研究贯叶金丝桃治疗阿尔茨海默病（Alzheimers disease,AD）的潜在作用机制。方法 在TCMSP及TCM Database@Taiwan数据库查找贯叶金丝桃的化学成分并进行活性成分筛选;利用化源网、PubChem、SwissTargetPrediction及ChEMBL数据库获取活性成分的作用靶点,检索GeneCards、OMIM、DrugBank和DisGeNET数据库,结合文献检索获取AD的疾病靶点。取两者交集靶点,利用STRING数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用网络。采用Metascape平台对靶点进行GO富集分析和KEGG富集分析,通过Cytoscape 3.10.0软件构建“化合物-靶点-通路”网络并进行拓扑学分析,并采用AutoDock Vina 1.1.2进行分子对接验证。结果 贯叶金丝桃防治痴呆的关键化合物是贯叶金丝桃素金、丝桃素及金丝桃苷等,其对应的关键靶点为APP、PIK3R1、PIK3CA、AKT1、EGFR、GSK3B等,分子对接验证结果显示其主要活性成分与核心靶点均具备潜在活性。所涉及的主要分子过程及通路为激酶活性的正调控、神经活性配体-受体相互作用及激酶活性调节等,关键通路为AD通路和PI3K-Akt信号通路。结论 贯叶金丝桃治疗AD的机制可能与减少β-淀粉样蛋白的产生及tau蛋白形成,调节神经炎症相关。     

基于网络药理学和分子对接技术探究小柴胡汤治疗三阴性乳腺癌的作用机制

目的 通过生物信息学分析和整合药物代谢动力学数据进行多重药物靶点预测，探究小柴胡汤治疗三阴性乳腺癌（triple negative breast cancer，TNBC）的作用机制。方法 基于药理学数据库获取小柴胡汤的活性成分与对应靶点；采用加权基因共表达网络分析方法识别乳腺癌高通量测序数据中肿瘤发生发展的关键基因；采用GO功能与KEGG通路富集分析进行生物功能与通路注释；通过Cytoscape软件进行核心基因鉴定；利用分子对接方法模拟关键生物标志物与小柴胡汤核心活性成分的对接模式。结果 在对小柴胡汤进行数据挖掘后获得242个有效成分和265个对应靶点，通过加权分析方法得到乳腺癌密切相关的563个疾病关键靶点，小柴胡汤与TNBC共有13个交集靶点。小柴胡汤成分靶点网络构建得到槲皮素、山柰酚、异鼠李亭素、木犀草素、豆甾醇、β-豆甾醇、牵牛花色素等主要成分。PPI网络构建后通过筛选得到3个核心靶点（CCNA2、CCNB1、CHEK1）与2个关键化学成分（槲皮素、山柰酚）。GO富集获得15个生物过程、45个细胞组分、16个分子功能，其中主要与细胞器裂变和细胞核分裂等细胞增殖过程，浓缩染色体和中心区核染色体，单链DNA结合ATP依赖活性等相关。KEGG通路富集得到了37条通路，主要富集在精氨酸等代谢通路上。分子对接模拟显示核心蛋白靶点与重要活性成分具有良好的结合活性。结论 小柴胡汤主要通过CCNA2、CCNB1、CHEK1等靶点，槲皮素、山柰酚等主要活性成分及细胞调亡、成纤维细胞形成和肿瘤细胞增殖及炎症进程达到干预TNBC的作用。     

基于网络药理学研究止嗽散治疗咳嗽变异性哮喘的分子机制

目的 通过整合药物代谢动力学数据进行多重药物靶点预测,探究止嗽散治疗咳嗽变异性哮喘(cough variant asthma,CVA)的作用机制.方法 先利用大规模数据挖掘、文献检索搜集止嗽散方中所有中药的化学成分,再利用药物代谢动力学数据筛选其活性成分并用Swiss Target Prediction、SysDT和TargetNet方法进行靶点预测,并借助GeneCards和OMIM数据库获得CVA的致病基因,并与药物靶点取交集以构建蛋白相互作用网络,对获得的核心靶点进行生物学功能富集分析,最后选取若干核心靶点及其关键的成分进行分子对接验证.结果 共筛出止嗽散治疗CVA的活性成分97个(包括白前苷元C、7,4'-二羟基黄酮、甘草酸、新对叶百部碱和β-谷甾醇)及靶点144个.通过分析蛋白相互作用网络得到MAPK3、TNF、CASP3、EGFR、PTGS2和MMP-9等10个核心靶点.KEGG富集分析得到30条与CVA相关的通路.分子对接验证核心靶点中EGFR、PTGS2和MMP-9与其关键化合物有较好结合力.结论 止嗽散治疗CVA涉及多条信号通路,其分子机制可能是通过止嗽散中主要活性成分对PI3K-Akt、NF-κB和HIF-1等通路的调控,最终达到治疗CVA的效果.     

灵芝酸治疗阿尔茨海默病作用机制的网络药理学研究

目的 利用网络药理学技术确定灵芝酸治疗阿尔茨海默病（Alzheimer''s disease，AD）的相关靶点，探讨灵芝酸治疗AD的潜在机制。方法 采用Swiss Target Prediction药物靶点预测平台预测灵芝酸的靶点，并借助Disgenet数据库、Drugbank数据库和Genecards数据库检索AD的相关靶点；将化合物靶点与疾病靶点作交集得到灵芝酸作用于AD的潜在靶点。进一步使用STRING平台构建蛋白质相互作用（protein-protein interactions，PPI）网络，并通过网络拓扑分析筛选核心靶点；Bioconducter生物信息软件包对交集靶点进行GO与KEGG功能富集分析，筛选出灵芝酸与AD关联程度较高的信号通路。最后通过细胞实验，验证其中富集程度最高的靶点，进一步明确灵芝酸作用于AD的核心靶点。结果 从数据库中共获得灵芝酸与AD靶点1 211个，其中共同靶点56个。PPI网络拓扑分析发现，AKT1、ALB、MAPK3、CASP3、TNF等是灵芝酸治疗AD的关键靶点。KEGG通路富集分析结果显示，灵芝酸治疗AD的通路涉及AD、神经变性途径、人巨噬细胞感染途径、卡波西氏肉瘤相关疱疹病毒感染途径等。细胞实验验证发现，灵芝酸A的最佳给药浓度为50 μmol/L，可以通过抑制p-PI3K和p-AKT的表达，保护受Aβ25-35毒性损伤的PC12细胞。结论 灵芝酸可能通过关键蛋白和重要通路达到靶向治疗AD的作用。     

骨生丸治疗股骨颈骨折后早期股骨头坏死的实验研究

目的：探讨中药制剂骨生丸治疗股骨颈骨折后早期股骨头坏死的作用机制。方法：按照Kenzora方法，复制大白兔凤骨颈骨折后早期股骨头坏死动物模型，灌药4周后断头取血，取出股容、血沉、还原粘度、聚集指数及纤维蛋白等血液流变性指标。结果：骨生丸能够有效地降低空骨陷窝率，改善血液流变性状态。结论：骨生丸通过逆转股骨颈骨折后早期股骨头坏死的股骨头缺血状态，促进股骨头坏死修复而起治疗作用。     

红外光谱结合化学计量学快速鉴别不同环境发汗丹参

目的 采用红外光谱法测定空旷阴凉、空旷光照及室内环境下堆积发汗丹参中水提物及醇提物特征,快速鉴别其质量.方法 采用傅里叶红外光谱技术结合化学计量学建立主成分分析-马氏距离(principal component analysis-Mahalanobis distance,PCA-MD)判别模型鉴别分析不同环境下发汗丹参的水提物和醇提物.结果 丹参的红外光谱图中主要特征吸收峰在3305、2929、1601、1520、1362、1260、1171、1041、869 cm-1附近;不同环境发汗丹参的水提物和醇提物吸收峰基本相似,但部分特征吸收峰存在数目、位置和吸收强度的差异,表明丹参经不同环境发汗后化学成分和含量发生了改变.在1520、1262 cm-1附近发汗后吸收峰强度增加,推测发汗后水提物中酚酸类含量增加,且3号堆(室内环境)强度明显高于其他炮制品,2号堆次之;发汗醇提物在1740～1650 cm-1处吸收峰增强,提示发汗后酮类含量升高,且2号堆(空旷光照)强度最高,3号堆次之;在发汗过程中1041 cm-1附近吸收峰强度降低,可能发生糖苷的水解和糖类的代谢.PCA-MD判别分析显示,不同环境发汗丹参可完全区分,推测丹参经发汗后化学成分发生不同程度的改变.结论 红外光谱结合PCA-MD判别分析可用于不同发汗环境下丹参的准确、快速鉴别及质量评价,为丹参产地不同发汗品的质量评价提供参考.     

安徽不同产地野生丹参性状与脂溶性成分相关性研究

目的 探索安徽省不同产地野生丹参花、叶、根的颜色与其脂溶性成分含量的相关性。方法 采用野外调查和样本采集方式,对安徽省14个产地野生丹参性状特征进行观察;利用高效液相色谱法测定各地区丹参脂溶性成分含量。结果 安徽不同产地丹参在花冠颜色、复叶颜色及根皮颜色上存在明显的差异,表现为花淡紫、紫红、深紫,叶黄绿、绿色、深绿,根皮棕褐、砖红、赤红。以花深紫、叶深绿、根皮赤红的丹参脂溶性成分含量高,以花淡紫、叶黄绿、根皮棕褐者为低。结论 安徽不同产地野生丹参的性状特征和脂溶性成分存在一定差异,性状特征与脂溶性成分含量高低紧密相关。     

骨蚀宁对激素性股骨头坏死家兔局部rBF、TNF及显微结构的影响

目的：探讨骨蚀宁治疗激素性股骨头坏死的作用机制.方法：选择马血清与甲基强的松龙造成兔激素性股骨头坏死模型,设立对照组、模型组、仙灵骨葆组、骨蚀宁组,测定其血中局部组织血流量（rBF）、肿瘤坏死因子（TNF）,同时取骨在光镜下进行常规病理检查观察.结果：与模型组比较,仙灵骨葆组与骨蚀宁组rBF明显升高（P＜0.01）,但两组之间无明显差异（P＞0.05）.与模型组比较,仙灵骨葆组与模型组TNF含量差别不大（P＞0.05）,而骨蚀宁组升高明显,差异有显著性（P＜0.05）.与仙灵骨葆组比较,骨蚀宁组TNF明显降低,差异有显著性（P＜0.05）.与模型组比较,仙灵骨葆组和骨蚀宁组空骨陷窝百分比均有减少,差异有显著性（P＜0.01）.但均未达正常,组间比较无显著性差异（P＞0.05）.骨蚀宁组股骨头骨小梁和骨细胞的损害明显减轻.结论：骨蚀宁可通过改善股骨头局部组织血流量、抗炎性反应以及保护和促进骨细胞再生达到治疗激素性股骨头坏死的作用.     

丹参、黄芪注射液对肝硬化患者肝功能及肝纤维化血清学指标的影响

目的 :探讨丹参注射液和黄芪注射液联合治疗对肝硬化患者肝功能及肝纤维化血清学指标的影响。方法 :将 16 9例肝硬化患者按照随机原则分为 4组 ,对照组静滴甘利欣注射液 ,丹参组、黄芪组、联合组分别给予丹参注射液、黄芪注射液及丹参、黄芪注射液联合治疗 ,均以2 8d为 1个疗程。治疗前后分别检测肝功能丙氨酸转移酶、血浆白蛋白、血清总胆红素等指标和血清肝纤维化指标透明质酸、Ⅲ型前胶原肽、Ⅳ型胶原、层黏蛋白的含量。结果 :丹参组、黄芪组、联合组患者的肝功能改善均优于对照组 (P <0 .0 5 ) ,其中黄芪组和联合组血浆白蛋白明显高于丹参组(P <0 .0 5 ) ;丹参组、黄芪组、联合组患者的血清肝纤维化指标均明显降低 ,与对照组比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ,其中联合组降低的程度大于丹参组和黄芪组 (P <0 .0 5 )。结论 :丹参注射液和黄芪注射液对肝硬化患者肝功能及肝纤维化血清学指标均有一定的改善作用 ,联合使用效果更好。     

Z穴位注射丹参注射液治疗慢性阻塞性肺疾病缓解期34例

目的 观察穴位注射丹参注射液治疗慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease,COPD）缓解期的临床疗效。方法 将68例COPD缓解期患者随机单盲分为治疗组34例及对照组34例,治疗组在常规综合治疗基础上加用丹参注射液穴位注射（选穴：定喘、肺俞、肾俞、脾俞、足三里）,每周1次,3个月为1个疗程;对照组采用常规综合治疗,治疗3个月。两组患者均在治疗前后使用COPD评估测试（COPD assessment test TM,CAT）进行评分,并检测第1秒用力肺活量(forced expiratory volume in one second,FEV1)及其占预计值的百分比(FEV1%)、FEV1与用力肺活量（forced vital capacity,FVC）的比值（FEV1／FVC）,及检测血液T细胞亚群（CD4+、CD8+、CD4+/CD8+）的变化情况。 结果 治疗后治疗组CAT评分显著低于对照组（P<0.01）;CD4+ T细胞百分比、CD4+/CD8+比值显著高于对照组(P<0.05,或P<0.01),CD8+ T细胞百分比显著低于对照组(P<0.01)。治疗后治疗组FEV1、FEV1%、FEV1／FVC显著高于对照组（P<0.01）。结论 在常规治疗基础上穴位注射丹参注射液可以改善COPD缓解期患者生活质量,改善肺通气功能,提高患者免疫力。     

骨蚀宁胶囊联合唑来膦酸治疗早中期股骨头坏死的临床疗效观察

目的 评估骨蚀宁胶囊联合唑来膦酸治疗早中期股骨头坏死的临床疗效.方法 将股骨头坏死(早中期)患者64例随机分为对照组和观察组,每组32例,其中观察组38髋,对照组35髋.对照组予以唑来膦酸静脉滴注,口服骨化三醇及碳酸钙D3治疗;观察组在对照组治疗的基础上予以中药骨蚀宁胶囊口服.治疗1年后通过门诊随访调查患者治疗后髋关节Harris评分、基于X线片评分的疗效.结果 两组临床疗效比较,差异有统计学意义(P<0.05).与治疗前比较,两组治疗1年后髋关节功能、畸形、活动度和疼痛评分均显著升高(P<0.05);观察组治疗1年后髋关节功能、疼痛、活动度评分均显著高于对照组(P<0.05).结论 骨蚀宁胶囊联合唑来膦酸、骨化三醇及碳酸钙D3能更显著改善股骨头坏死症状,延缓股骨头进一步塌陷.