TGF-β1在皮肤创伤的表达变化与损伤时间关系

损伤时间推断历来是法医病理学研究和检案工作中的重点和难点.近年来,人们发现细胞因子及其受体在创伤修复中表达变化的规律与损伤时间相关,使其用于损伤时间的早期推断成为可能[1,2].     

大鼠挫伤骨骼肌中M1/M2型巨噬细胞时间相关性研究

目的研究大鼠骨骼肌挫伤后M1/M2型巨噬细胞浸润的动态变化规律结合组织学改变建立损伤时间推断方法。方法建立大鼠骨骼肌挫伤模型,挫伤后6h、12h、24h、36h、48h、60h、72h、96h、144h、216h、336h为实验组,对照组不进行任何处理。采用HE染色法和免疫荧光多重染色方法观察骨骼肌挫伤后修复规律,运用全景组织细胞定量分析系统检测损伤区内单位面积细胞核数量、M1及M2型巨噬细胞数量和比例变化规律并建立与损伤时间的关系。结果在0.5mm×0.5mm范围内,M1型巨噬细胞比例在0.05±0.02~0.18±0.12且M2型巨噬细胞比例在0.02±0.01~0.04±0.02范围内时,推断该组织的损伤时间为伤后6h~48h;M1型巨噬细胞比例0.22±0.02且M2型巨噬细胞比例在0.09±0.02范围内时,推断该组织的损伤时间为损伤后60h;M1型巨噬细胞比例0.1±0.02且M2型巨噬细胞比例在0.16±0.07范围内时,推断该组织的损伤时间为损伤后144h;M1型巨噬细胞比例0.05±0.01~0.09±0.02且M2型巨噬细胞比例在0.07±0.02~0.09±0.01范围内时,推断该组织的损伤时间为损伤后216h~336h。结论大鼠挫伤骨骼肌中M1/M2型巨噬细胞时间相关性表达规律可作为损伤时间推断的新依据,结合病理组织学改变可进一步提高损伤时间推断的准确性。     

Fn-EIIIA金标试纸条进行损伤时间推断的效果评价

目的评价Fn-EIIIA金标单克隆抗体试纸条在人体皮肤组织损伤时间推断中的有效性和灵敏度。方法提取不同损伤时间人体皮肤组织,匀浆,用Fn-EIIIA金标单克隆抗体试纸条检测其Fn-EIIIA的表达,对其结果进行评价;同时,将大鼠挫伤皮肤组织置于自然环境中,分别提取不同自溶时间段的皮肤样本进行检测,对自溶变化对检测结果的影响进行观察。结果正常皮肤组织样本中试纸条检测线不显色,损伤1h后即显色,随损伤时间延长,试纸条检测线有显色逐渐加深的趋势;在观察时间段内,组织自溶对检测结果无显著影响。结论Fn-EIIIA金标单克隆抗体试纸条可作为法医学损伤时间推断敏感、稳定的检测手段。     

大鼠皮肤切创损伤时间与血清标志代谢物的关系

目的观察大鼠皮肤切创后血清代谢组学变化情况,推断皮肤切创的损伤时间。方法建立大鼠皮肤切创模型,将21只SD大鼠分为切创后1、2、4、8、16、24 h组和对照组,实验组大鼠于伤后相应时间点取血,对照组直接取血。使用气相色谱-质谱联用(gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)技术检测血清代谢物并筛选标志代谢物,采用正交偏最小二乘-判别分析(orthogonal partial least square-discriminantanalysis,OPLS-DA)模式建立标志代谢物含量与损伤时间关系的回归模型,对皮肤切创损伤时间进行推断。结果使用GC-MS对所取血清进行检测,初筛得到21种标志代谢物,使用多元统计分析筛选出4种标志代谢物,其含量的变化规律与损伤时间之间无对应关系,不能直接用于损伤时间推断。使用OPLS模式可得到21种标志代谢物和4种标志代谢物的含量与损伤时间的回归模型,两者均可对损伤时间进行推断,但21种标志代谢物的回归模型预测准确性明显更高。结论利用代谢组学方法建立代谢物含量与损伤时间的回归模型,有望应用于皮肤切创的损伤时间推断。     

巨噬细胞在损伤时间推断中的作用

综述了近年来巨噬细胞在损伤时间推断中的法医学作用的研究进展。论述了巨噬细胞源性细胞因子的表达、巨噬细胞表型的变化和巨噬细胞吞噬物的演化等变化与损伤时间的关系,认为巨噬细胞在损伤修复中的特征性变化可作为损伤时间推断的新指标,具有深入研究的必要。     

Fn-EⅢA金标试纸条进行损伤时间推断的效果评价

目的评价Fn-EⅢA金标单克隆抗体试纸条在人体皮肤组织损伤时间推断中的有效性和灵敏度.方法提取不同损伤时间人体皮肤组织,匀浆,用Fn-EⅢA金标单克隆抗体试纸条检测其Fn-EⅢA的表达,对其结果进行评价;同时,将大鼠挫伤皮肤组织置于自然环境中,分别提取不同自溶时间段的皮肤样本进行检测,对自溶变化对检测结果的影响进行观察.结果正常皮肤组织样本中试纸条检测线不显色,损伤1h后即显色,随损伤时间延长,试纸条检测线有显色逐渐加深的趋势;在观察时间段内,组织自溶对检测结果无显著影响.结论Fn-EⅢA金标单克隆抗体试纸条可作为法医学损伤时间推断敏感、稳定的检测手段.     

mRNA在法医学中的应用现状与展望

近年来,随着RNA生物学性质和功能研究的日渐深入,RNA在法医学体液鉴别、斑迹形成时间推断、死亡时间推断、死亡原因分析、损伤时间推断等方面的作用受到了广大法医学研究者的重视,逐渐成为目前法医学应用研究的热点之一。本文综合介绍了mRNA在法医学中的应用现状,并对其未来应用前景进行了展望。     

兔不同时间切创中肌细胞核DNA的定量测定

为了使损伤时间推断手段更加精确化,为损伤时间推断提供新的方法,我们利用显微分光光度计测定兔皮肤切创创口内肌细胞核DNA 含量,结果发现:正常肌细胞核DNA 含量为18. 420Au,而损伤后创外周区内肌细胞核的DNA 含量立即迅速下降。伤后1h 为17. 274Au;伤后3h 为8. 672Au,达最低水平,随着损伤及经过时间的延长,DNA 含量又逐渐回升,伤后6、8、12,24h 的含量分别为12. 563、13. 608、14. 743,16. 448Au。上述结果说明,损伤区域内肌细胞核内DNA 的含量与损伤时间有明显关系,DNA定量分析可作为损伤时间推断的一个重要根据。     

细胞因子在皮肤创伤修复中的表达及其与损伤时间的关系

1现代创伤惨重知识与损伤时间的推断对损伤时间的推断历来建立在创伤修复反应的病理生理学基础之上,即以不同经历时间的创口在修复过程中所表现的生活反应（vitareaction）特点,亦即炎症反应、肉芽组织及上皮增生和疤痕修复所产生的各种形态、组化及生化变化特征作为推断损伤时间和性质的依据［’·‘］。然而,多数需司法部门立案的暴力伤害致死,受害个体的生存期短（仅数分钟或数小时）,创口缺乏形成典型组织学生活反应所必需的时间,给藉创口损伤时间来推测作案时间带来困难。加之死后早期阶段（超生反应期）的一定时间内仍然存活的…     

损伤时间推断研究部分进展

损伤时间推断研究部分进展田雪梅，孙洪涛损伤时间的推断是法医工作者们极感兴趣而又很困难的一个研究课题，几十年来世界各地的学者们从各个方面进行了人格的研究，取得了一定的成就。损伤时间的推断有两个主要内容：①生前伤与死后伤的判断；②生前损伤经过时间的推断。...     

细胞因子(IL-6、TNF-α)在损伤时间中原位杂交法研究

采用原位杂交法，研究大鼠切削皮肤中细胞团子IL－6、TNF－αmRNA表达量，旨在探讨IL－6、TNF－α推断法医损伤时间的应用价值以及其在损伤生活反应中的分子机制。研究结果表明，根据大鼠损伤皮肤中TNF－αmRNA表达量能够区别生前伤与死后伤，并可以利用TNF－αmRNA表达量改变准确区别60min内和60min后损伤时间，但IL－6mRNA表达量在研究组内均未见阳性反应，不能推断损伤时间。     

代谢组学技术结合机器学习算法在损伤时间推断中的研究进展

损伤时间推断是法医学实践中的重要内容,准确推断损伤时间是国内外法医学者亟待解决的科学问题。代谢组学技术可以有效检测机体受到体内外刺激因素作用产生的内源性代谢物,描述生物体内代谢物的动态变化,具有操作性强、检测效率高、定量结果 准确等优势。机器学习算法对高维数据集的处理具有独特优势,能够有效挖掘生物信息,真实反映机体生理、疾病或损伤状态,是高效处理高通量大数据的新型技术手段。本文综述了代谢组学技术与机器学习算法的研究现状和自身优势,探讨应用代谢组学技术结合机器学习算法在法医学损伤时间推断研究中的应用前景,为法医学损伤时间推断研究提供新思路。     

创缘周围血管生成在皮肤损伤时间推断中的应用

皮肤损伤时间推断一直以来都是法医病理学者所需解决的重要问题,免疫组织化学技术具有方便、敏感的特性,它的应用大大提高了皮肤损伤时间推断研究的发展。然而,有效指标的缺乏却限制了免疫组织化学技术的应用。血管生成在皮肤损伤愈合过程中发挥着非常重要的作用,因此,血管生成相关因子可能在皮肤损伤时间推断方面具有重要价值。     

Fn-EIIIA金标单克隆抗体试纸条的试制和初步应用

目的开发可用于法医病理学损伤时间推断临案的金标Fn-EIIIA单克隆抗体试纸条。方法选取两种敏感、特异的片段特异性Fn-EIIIA单克隆抗体,ELISA方法进行效价观察,标记胶体金后分别采用渗滤法及层析法检测其效果,抽提阳性对照中目标蛋白进行初步测评,并以大鼠皮肤损伤模型进行验证。结果两种单克隆抗体均可用于Fn-EIIIA肽段的金标法检测,以IST9搭配Fn多抗效果最佳;正常皮肤组织样本中试纸条检测线不显色,损伤3h后显色,随损伤时间延长,染色逐渐加深。结论该试纸条可靠性、可重复性以及可操作性均佳,可望在法医学损伤时间推断有广阔的应用。     

根据尸蜡化尸体胃内容物推断死亡时间1例

尸蜡化尸体能保存某些生前损伤痕迹及相关物证,有助于进行死因判断、损伤分析、个人识别、查找尸源等,在法医工作实践中具有重要的意义。目前尸蜡的相关报道更多倾向于尸蜡的形成条件及机理和尸蜡保存损伤的研讨,而关于用尸蜡化尸体胃内容物情况推断死亡时间的报道不多见,本例为埋于土中2．5年的尸蜡化尸体,根据其胃内容物情况进行死亡时间推断报道如下。     

大鼠骨骼肌挫伤后Fzd2表达与损伤时间的关系

目的检测大鼠骨骼肌挫伤后卷曲受体蛋白2(frizzled-2,Fzd2)mRNA及其蛋白表达量与损伤时间的关系,探讨其是否可以作为损伤时间推断的指标。方法利用RT-qPCR和Western印迹法检测正常对照组及损伤后4~48 h每4 h大鼠骨骼肌中Fzd2 mRNA和蛋白水平的表达量。结果 Fzd2 mRNA在损伤后24 h、36 h、40 h相对表达量增高,24 h组表达量达正常对照组的两倍(P0.05);而Fzd2蛋白在损伤后相对表达量变化不明显(P0.05)。结论大鼠骨骼肌损伤后Fzd2 mRNA在一定时间内的表达变化情况可以作为多指标联合推断损伤时间的依据。     

Fn—EⅢA金标单克隆抗体试纸条的试制和初步应用

目的开发可用于法医病理学损伤时间推断临案的金标Fn-EⅢA单克隆抗体试纸条.方法选取两种敏感、特异的片段特异性Fn-EⅢA单克隆抗体,ELISA方法进行效价观察,标记胶体金后分别采用渗滤法及层析法检测其效果,抽提阳性对照中目标蛋白进行初步测评,并以大鼠皮肤损伤模型进行验证.结果两种单克隆抗体均可用于Fn-EⅢA肽段的金标法检测,以IST9搭配Fn多抗效果最佳;正常皮肤组织样本中试纸条检测线不显色,损伤3h后显色,随损伤时间延长,染色逐渐加深.结论该试纸条可靠性、可重复性以及可操作性均佳,可望在法医学损伤时间推断有广阔的应用.     

大鼠皮肤挫伤后Beclin1和LC3的表达

目的 研究大鼠皮肤损伤后Beclin1、LC3的表达,观察皮肤损伤中的自噬现象,并探讨其在损伤诊断及损伤经历时间推断的意义.方法 运用免疫组化及图像分析技术研究大鼠皮肤挫伤后、损伤不同时间段后Beclin1、LC3表达的变化.结果 大鼠正常皮肤表皮细胞Beclin1、LC3低表达,大鼠皮肤挫伤6h后局部表皮细胞Beclin1、LC3表达开始增多,挫伤3、5和7d呈强表达.结论 皮肤损伤后局部细胞Beclin1、LC3表达增多;其表达与损伤经历时间具有相关性;细胞自噬增强是对损伤的反应.     

蛋白因子与皮肤损伤时间的相关性研究

皮肤创伤愈合是一个复杂的过程,黏附分子、细胞因子等蛋白因子在该过程中发挥重要作用,常随损伤时间的延长呈现规律性表达。对这些蛋白因子在皮肤损伤后的表达变化进行深入研究,可以为法医学皮肤损伤时间推断以及临床皮肤损伤的修复提供新思路。本文对黏附分子、细胞因子等蛋白因子应用于皮肤损伤时间推断研究的国内外研究现状进行了综述,以供今后检案及研究借鉴。     

损伤时间的确定

<正> 损伤时间的确定包括:1)鉴别生前伤和死后伤;2)比较同一个体上的生前损伤,推断生前损伤形成的时间先后次序。生前伤周围,各种炎症因子不断地被激活。相继出现的炎症因子,是确定损伤时间的生物学基础。通过组织学观察证明,白细胞反应是最早出现的炎症征象。损伤后8～12小时,白细胞和激活的成纤维细胞在损伤周围形成一个明显的损伤带。靠近损伤缘的中央区,以组