鸡胚胎腺垂体促肾上腺皮质激素细胞的发生及其变化

为了研究鸡胚胎腺垂体促肾上腺皮质激素 (ACTH )细胞的发生及其在发育过程中的变化 ,分别在鸡胚胎发育的第 3.5～ 2 0 .5d采集鸡胚胎垂体 ,利用免疫组织化学方法对鸡胚胎腺垂体ACTH细胞的发生、数量和形态分布变化规律进行了研究。结果 ,鸡胚胎发育早期 (10 .5d)可观察到少量明显的ACTH细胞分布于腺垂体前叶 ,随着胚胎的发育 ,ACTH细胞的数量明显增多 ,分布于整个腺垂体前叶。早期ACTH细胞体积小、细胞浆少、细胞核较大、细胞界限不清 ,随着胚龄的增加 ,ACTH细胞体积增大、细胞浆增多、细胞浆浓染。结果证明 ,鸡胚胎腺垂体ACTH细胞发生于胚胎发育的中期 ,细胞的增殖和分化过程发生在胚胎发育的中期至出壳前 ,而ACTH细胞的分泌功能在胚胎后期最活跃     

MDV-gB重组痘苗病毒诱导免疫的检测及保护性

用MDV gB重组痘苗病毒RVV gB、HVT冻干疫苗、痘苗病毒WR株分别按试验程序对细胞免疫及体液免疫检测试验中的 1日龄SPF鸡进行免疫接种 ,并于 15日龄时对试验各组鸡用GA株强毒攻击 ,经IFA抗体检测 ,及以PHA为有丝分裂原的淋巴细胞转化检测 ,结果表明 ,重组病毒和HVT冻干疫苗免疫鸡均获得了较高保护 ,体液免疫效果差异不显著 ;细胞免疫效果在攻毒前差异不显著 ,但攻毒后第 2d开始 ,RVV gB免疫组鸡的淋巴细胞转化率明显高于HVT冻干疫苗免疫组鸡。     

鸡的内寄生螨形态的研究

鸡的内寄生螨病,国外早有报道,但对病原的分类、形态、生态及其致病性、流行因素、防制等方面的研究很不细致,还有许多疑点。目前国内对该病尚未引起足够重视。近期,我们在进行鸡的活体屠宰检验时,发现了鸡的内寄生螨寄生‘感染量很大,鸡体内多达数万条虫体。经过虫体标本的反复观察研究,现将所发现的两种内寄生螨的形态记述如后。     

鸡腹腔巨噬细胞的体外培养与活性分析

本试验旨在建立一种适用于鸡腹腔巨噬细胞体外培养的方法,并分析体外培养巨噬细胞的形态特征及活性,以获得数量多、活性高的鸡腹腔巨噬细胞。对5～6周龄伊莎褐蛋公鸡进行腹腔巨噬细胞提取,通过扫描电镜、透射电镜和荧光染色等方法对鸡腹腔巨噬细胞的形态、吞噬活性进行检测。结果显示,成功从5～6周龄伊莎褐蛋公鸡体内分离到腹腔巨噬细胞,数量为(0.62±0.51)×10~6个/羽;细胞提取前24 h向鸡腹腔注射预冷的3%的巯基乙酸盐肉汤能显著增加鸡腹腔巨噬细胞的获得量,数量为(3.54±1.05)×10~6个/羽。鸡腹腔巨噬细胞体外培养36～48 h后呈现出最佳状态,具有完整的形态结构和活跃的吞噬活性。结果表明,3%巯基乙酸盐肉汤诱导能显著提高鸡腹腔巨噬细胞的数量,腹腔巨噬细胞体外培养36～48 h后形态和吞噬活性最佳,可用于后续试验的开展。     

新型鸡痘病毒穿梭载体的构建及其体外表达

为构建用于筛选的新型鸡痘病毒载体,采用染色体步移技术对鸡痘病毒282E4株TK基因的下游序列进行测序,并结合扩增出的左右同源重组臂TKL、TKR片段、启动子、MCS及终止信号构建出三表达盒穿梭载体pTKE3。采用基因工程技术将绿色荧光蛋白EGFP基因克隆入3个启动子的下游,构建出pTKE3-A、pTKE3-B、pTKE3-C验证表达盒质粒。结果显示,构建的3个验证质粒分别与鸡痘病毒282E4株共转染鸡胚成纤维细胞,均可在转染12h后观察到绿色荧光。结果表明,构建的三表达盒载体均可成功表达外源基因,这为进一步构建多价重组鸡痘病毒活载体疫苗奠定了基础。     

衍纸里的天地

正衍纸又叫做卷纸,衍纸艺术就是通过卷曲、弯曲,捏压而形成原始设计形象的一门艺术。制作的基础材料是被卷曲的纸带,在纸艺大家族中比较独特。利用雕塑和绘画技艺承接载体。孩子们创作了一组24节气的作品。通过前期查阅资料解读24节气含义,到中期开始创作绘画作品提取节气元素,后期用衍纸形式进行制作。24节气实际上是一个生活时间表。尽管现代化进程对传统的文化形态造成很大冲击,但上庄中     

鸡胚胎腺垂体卵泡刺激素细胞的发育及其变化

应用免疫组织化学方法,对发育的第3.5～20.5天鸡胚腺垂体卵泡刺激素(FSH)细胞的发生及其在发育过程中的变化规律进行了研究。结果,鸡胚发育的中期(第10.5天),可观察到少量明显的FSH细胞分布于腺垂体后叶,随着胚胎的发育,FSH细胞数量显著增加(P<0.05),发育的第16.5天FSH细胞数量增加到了整个孵化期的最大值,分布于垂体后叶的腹侧,前叶仅有少量零散的FSH细胞;在发育的第18.5天至出生期FSH细胞数量显著减少。早期FSH细胞体积小、细胞浆少、细胞核大,单个或团状分布,随着胚龄的增加,细胞体积增大、细胞浆增多、细胞浆浓染。结果表明,鸡胚胎腺垂体FSH细胞发生于胚胎发育的中期,细胞的增殖和分化过程发生在胚胎发育的中后期;FSH细胞分布于垂体后叶腹侧。     

鸡传染性法氏囊病病毒的提纯和鉴定

取鸡传染性法氏囊病（ＩＢＤ）患鸡的法氏囊病料经氟利昂作用去除杂蛋白，并经甘油一酒石酸钾密度梯度离心进一步纯化；细胞适应毒在鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）上出现明显细胞病变后冻融、ＰＥＧ沉淀纯化。电镜观察、吸光庆测定和聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）的结果表明，得到了完整形态的鸡传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）。     

鸡卡氏白细胞原虫病的研究

1982～1986年调查贵州省鸡白细胞原虫病流行情况时,在黔南自治州的独山县鸡体内发现卡氏白细胞原虫。每年6～9月发病,7月为发病高潮,感染率和死亡率较高。病鸡表现精神抑郁,采食减少或食欲废绝,母鸡产蛋停止或减少,鸡冠苍白,变软变薄,排绿便,气喘、咳嗽,痰中带血,重病鸡咯血,倒提病鸡时,口流酸味绿液,末期倒地抽搐死亡。剖检病死鸡,以全身性出血和脏器表面粟粒状灰白色结节病变为特征。用乙胺嘧啶25～30ppm拌料防治具有良好效果。 病原经染色镜检可见,裂殖子在血浆或血细胞内,为圆形或纺锤形,大小相等,细胞质淡蓝色,胞核紫红色,圆点形、豆形、肾形、蒜瓣形;宿主细胞核位置正常或偏移。早期配子体寄生于宿主细胞内,圆形,宿主细胞核移位。发育至中期及后期,成熟的配子体外层具灰褐色或黄褐色略厚的宿主细胞膜,内层为圆球形的配子体,两者界限分隔明显,宿主细胞两端无菱角状突起,胞核消失,大配子体圆形,胞浆深蓝色,胞核粒状紫红色,圆形配子体平均大小12.2×14.1μm;小配子体圆形,胞浆淡蓝色,胞核淡红色,平均大小11.6×13.8μm。本文首次报道贵州鸡卡氏白细胞原虫病的传播媒介为荒川库蠓。并对荒川库蠓的活动规律及形态作了观察。     

藏公鸡骨骼的解剖结构特点

对西藏现有濒危品种藏鸡的骨骼进行了详细研究 ,其骨骼的形态结构 ,特别是头骨、胸廓及四肢骨具有明显的品种特征 ,与一般内地饲养的鸡品种有明显的不同。     

12株肉仔鸡包涵体肝炎病毒的分离和PCR鉴定

从临床疑似肉仔鸡包涵体肝炎病例的肝组织中,通过SPF鸡胚连续传代和鸡胚肾细胞培养,分离到12株疑似肉仔鸡包涵体肝炎病毒毒株。通过形态学、致细胞病变和PCR检测等对12株疑似肉仔鸡包涵体肝炎病毒分离物进行了鉴定。结果显示,该病毒为球形、无囊膜、二十面体对称,直径70～80nm;接种鸡胚后鸡胚肝在不同时期表现不同程度的病变;在鸡胚肾细胞(CEK)上可致细胞病变。根据Ⅰ群禽腺病毒CELO株的Hexon保守区基因序列,设计合成了1对引物。用这对引物对12株病毒的核酸模板进行了PCR扩增,结果均特异性地扩增出了与设计片段大小相一致的508bp片段,序列分析表明,分离株确为Ⅰ群禽腺病毒。从病毒形态,鸡胚及细胞病变以及PCR检测结果,证明12株分离物确为肉仔鸡包涵体肝炎病毒。建立的鸡包涵体肝炎快速PCR诊断方法可用于鸡包涵体肝炎的临床快速诊断。     

PR8流感病毒突变株的制备及其在鸡胚上生长特性的研究

在前期发现流感病毒WSN株的NS2或NP蛋白突变使病毒在细胞上增殖能力明显提高的基础上,研究了这些突变是否会使PR8病毒效价在鸡胚上进一步提高的可行性,通过反向遗传操作技术获得了NS2E67S和NPP277A两株PR8突变病毒。经过比较突变病毒与野生病毒在鸡胚中的增殖能力,发现NS2E67S突变病毒在鸡胚上增殖后的效价与HA抗原表达量均明显提高,而NPP277A突变病毒在鸡胚上的增殖能力不及野生PR8病毒。该研究结果将对进一步研究病毒基因变异与宿主互作机制奠定基础,有可能通过NS2E67S突变病毒对改良流感疫苗具有重要的应用价值。     

禽副粘病毒2型标准株和国内分离株的透射电镜及免疫电镜观察

将禽副粘病毒2型的标准毒株Yucaipa病毒和国内分离株F4、F6和F8株分别接种SPF鸡胚,收获鸡胚尿囊液;经差速离心和蔗糖密度梯度离心后,分别制备电镜样品和免疫电镜样品;经10 g/L醋酸双氧铀负染后电镜观察病毒粒子形态.电镜下病毒粒子大小差别较大,形态呈圆形或椭圆型,直径150-300 nm,有结构致密的基质蛋白膜,有的囊膜外可见纤突.免疫电镜样品中病毒明显集中,便于观察.     

鸡胚免疫器官组织学发育过程观察

通过对孵化至 12～ 2 1日龄鸡胚的免疫器官胸腺、脾及腔上囊进行组织学连续性观察 ,较为详细地描述了鸡胚免疫器官的组织发育过程。观察结果显示 ,胸腺的组织结构发育和形成较早 ,自 12日龄起胸腺就已形成原始的胸腺小叶 ;虽然脾在 12日龄时就已初具轮廓 ,但脾直到 18日龄才开始隐约形成形态可辨的红髓和白髓 ;腔上囊淋巴滤泡自鸡胚发育到 17日龄时即渐趋明显 ,但完整的滤泡皮质和髓质结构在出壳前仍然处于分化成熟阶段。     

鸡MD肿瘤细胞NOR的研究

利用石蜡切片一步银染法对１４例马立克氏病鸡肿瘤细胞核仁组成区相关嗜银蛋白（ｓｉｌｖｅｒ－ｂｉｎｄｉｎｇｎｕｃｌｅｏｌａｒｏｒｇａｉｎｉｚｅｒｒｅｇｉｏｎｓ，Ａｇ－ＮＯＲｓ）的数目、形态及分布进行研究。结果表明，ＭＤ肿瘤细胞中有２种形态的Ａｇ－ＮＯＲｓ：一种为团块状较大的Ａｇ－ＮＯＲｓ，每个肿瘤细胞平均为１．５８个／细胞；一种为较小的散在分布的Ａｇ－ＮＯＲｓ，平均为５．８１个／细胞。每个肿瘤细胞拥有７．３７个Ａｇ－ＮＯＲｓ。ＭＤ鸡肿瘤细胞中Ａｇ－ＮＯＲｓ的数量、形态特征与其分化程序和ＤＮＡ含量有关。     

红河州鸡衣原体病的研究——病原分离鉴定和人工感染试验

从采自发病或死亡小鸡的肝、脾、肺和腹水等病料中分离到４株衣原体。将分离物接种７日龄鸡胚卵黄囊，能致鸡胚规律性死亡；该分离株对磺胺嘧啶（ＳＤ）具有抵抗力，碘染色不着色，鉴定为鹦鹉热衣原体（Ｃｈｌａｍｙｄｉａｐｓｉｔａｃｉ）；毒力测定对鸡胚致死毒价为１０－１０ＥＬＤ５０／０．４ｍｌ。用该分离株对健康小雏做人工感染试验，可发生与自然病例相同的症状和病理变化。同时对分离毒株形态特征进行了电镜观察     

鸡源唾液乳杆菌的分离鉴定及生物学特性分析

为筛选出对禽沙门菌具有显著拮抗效应的益生菌,从健康肉鸡消化道分离菌株,经细菌形态观察、生化试验鉴定及16S rDNA基因序列分析,共鉴定出14株唾液乳杆菌。体外琼脂扩散试验结果显示,WLS001、WLS002、WLS003、WLS004这4株分离株分别对鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、鸡白痢沙门菌、鸡伤寒沙门菌具有明显抑制作用。pH及胆盐耐受性试验结果表明,WLS001耐受性最强,在pH为2.0、胆盐浓度0.2%条件下均能生存。药敏结果显示,4株菌均对万古霉素耐药。安全性试验表明,所有唾液乳杆菌均没有溶血环,试验组雏鸡体重较对照组增重显著(P0.05)。组织病理切片显示,脾、肝、盲肠及十二指肠形态均正常。结果表明,4株鸡源唾液乳杆菌具有良好的生物学特性和安全性,具备进一步开发微生态制剂的潜力。     

应用琼脂扩散试验诊断鸡住白细胞虫病

鸡住白细胞虫病的诊断,以往多采用病原检查,即从病鸡翅静脉血涂片中发现鸡住白细胞虫裂殖子即可确诊。由于住白细胞虫的形态与鸡异嗜性中性白细胞极相似,常会造成误诊。为此,我们建立了应用琼脂扩散试验诊断住白细胞虫病的方法,初步试验效果较好。1　抗原制备　　选末稍血片中有典型住白细胞虫裂殖体,并表现出明显症状的10只病鸡,从翅静脉采血。待血液凝集后分离血清和血凝块,与其肝、脾、肾等内脏混合,匀浆;用0.01ｍｏｌ/Ｌ(ｐＨ8.0)ＰＢＳ离心洗涤3次,在沉淀物中加5倍体积的ＰＢＳ,在振荡器上振荡5ｍｉｎ;然后分别在50、100、150……500ｇ…     

日粮钒水平对闽中麻鸡血细胞的影响

将256只1日龄健康闽中麻鸡预饲1周后随机分为A、B、C、D 4个组,基础日粮中分别添加钒0、20、40和80mg/kg,试验期42d,于14、21、28、35、42日龄每组随机抽取6只,鸡冠采血制作血涂片,Wright's染色,观察血细胞形态,并进行白细胞分类计数,研究了钒对动物血细胞的影响.结果显示,日粮中添加钒80mg/kg时鸡的红细胞变化明显,呈梭形或三角形,胞核呈球形或长条形,后期有的出现胞核偏移、畸形、破裂乃至溶解等;白细胞形态及胞核也有不同程度的改变,白细胞分类计数结果显示,各试验组鸡的淋巴细胞比例下降,异嗜性粒细胞比例升高,但与对照组差异不显著(P0.05).证实,日粮中添加80mg/kg的钒对闽中麻鸡的血细胞形态有一定程度的影响.     

鸡住白细胞虫病及病原形态观察

鸡住白细胞虫病及病原形态观察刘文亚，王竹霞，魏拣选，屈康子，李建华，赵公斌，张金良，章少秋，傅平西（陕西省商洛地区畜牧局商州７２６０００）（商洛地区畜牧站）（商洛农校）１９９０～１９９１年先后在商州市白杨店乡、大荆区及洛南县石门区等地发生鸡性白细胞虫...