副猪嗜血杆菌部分体内诱导基因的筛选

用Sau3AⅠ酶切副猪嗜血杆菌(HPS)SC-1株基因组,回收500～2000bp的片段,并与pRSETa/b/c载体连接,构建了HPSSC-1株基因组表达文库;将攻毒后不同时间的猪血清混合,分别与体外培养的HPSSC-1和大肠杆菌BL21的全菌、超声裂解产物及热变性裂解产物进行吸附,用ELISA检测吸附效果,并用Western-blot进一步验证;再用经过吸附的混合血清对HPSSC-1基因组表达文库进行菌落原位免疫杂交筛选;对筛选出来的阳性克隆进行测序和生物信息学分析。结果显示,构建的副猪嗜血杆菌基因组文库库容量为1.2×104CFU;混合血清经过吸附后,D450nm由0.384下降到0.220。Western-blot结果显示,经吸附的血清与HPSSC-1株超声裂解产物无任何条带;通过原位免疫印迹筛选获得5个阳性克隆;阳性克隆测序结果经DNAMAN分析初步推测出5个可能具有生物学意义的开放阅读框,BLAST分析表明,这些序列与GenBank中的副猪嗜血杆菌相应基因的同源性在99%以上,分别涉及副猪嗜血杆菌的酪氨酸磷酸酯酶、异亮氨酰-tRNA合成酶、荚膜多糖输出蛋白及2个假定蛋白。结果表明,应用体内诱导抗原技术从副猪嗜血杆菌SC-1株基因组表达文库中成功筛选出5个阳性克隆,其中部分基因可能与毒力相关。     

哈尔滨创建全国文明城市存在的问题及对策

哈尔滨市创建文明城市已经取得一定的成绩,但也存在一些不容忽视的问题,如硬件建设差距较大,对“软指标”重视不够,城市环境没有较大改观,公共秩序有些混乱,等等,要查明问题存在的原因,加大治理力度,提高城市管理水平,把哈尔滨尽快建设成为全国文明城市。     

基因Ⅳ型猪戊型肝炎病毒重组ORF3蛋白抗原间接ELISA诊断方法的建立

为建立检测猪戊型肝炎病毒(HEV)抗体的间接ELISA诊断方法,将HEV ORF3片段克隆至大肠杆菌表达载体pET42a(+)中,构建了原核表达载体pET42a-ORF3,将其转化大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG诱导表达,并对表达的融合蛋白进行Ni2+-NTA柱纯化及SDS-PAGE、Western-blot鉴定,用纯化的融合蛋白作为包被抗原建立了间接ELISA检测方法.结果显示,GST-ORF3在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了高效表达,表达的蛋白质分子质量约为45.5 ku,具有良好的抗原性.用建立的间接ELISA检测190份猪血清样品,阳性率为84.7%,与试剂盒检测结果相比,阳性符合率为91.5%.表明,建立的间接ELISA方法具有较好的特异性和灵敏性,可用于猪血清HEV抗体的检测.     

齿贝栓菌的化学成分

目的 研究齿贝栓菌(Trametes cervina (Schw.) Bres)发酵液的化学成分.方法 齿贝栓菌发酵液的乙酸乙酯部位经硅胶、Rp-18、Sephadex LH-20等多种材料进行分离,波谱学鉴定化合物的化学结构.结果分离鉴定了10个化合物,分别为二甲异咯嗪(1)、麦角甾-7,22-二烯-3β,5α,6β...     

仙巴合剂治疗小儿哮喘缓解期临床研究

目的 观察中药仙巴合剂改善小儿哮喘缓解期的作用.方法 将60例哮喘患儿随机入组,两组均采用常规的糖皮质激素吸入疗法,治疗组30例加用中药汤剂仙巴合剂口服,疗程3个月.观察和比较两组3个月内哮喘发作率,急性发作时病情严重程度,并测定血浆皮质醇含量.结果 与对照组比较,3个月治疗期内治疗组哮喘急性发作率明显减少(P<0.05),皮质醇含量显著增高(P<0.05).结论 中药仙巴合剂联合使用常规吸入糖皮质激素可以明显减少哮喘患儿哮喘急性发作率,减轻哮喘急性发作时的严重程度,其作用机制可能与提高患儿血浆皮质醇含量有关.     

辨证治疗化疗相关性腹泻26例

目的 观察化疗相关性腹泻(chemotherapy induced diarrhea,CID)中医辨证论治的疗效.方法 将38例CID患者分为治疗组和对照组,治疗组26例采用中医辨证治疗,对照组12例采用黄连素、思密达或易蒙停治疗.结果 治疗组脾虚型、湿热型、脾肾阳虚型、肝郁脾虚型分别为14、10、1、1例,有效例数分别为11、7、1、1例;治疗组和对照组总有效率分别为76.9%、50.0%,两组总有效率比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 CID的常见证型为脾虚型、脾肾阳虚型,辨证治疗有较好的疗效.     

外卖平台“二选一”行为市场支配力研究

外卖平台“二选一”行为降低了社会总福利,其所产生的垄断效应直接损害了商家的多栖性,剥夺了消费者的选择权,使消费者被大数据杀熟,也使外卖骑手陷入事实层面上的“二选一”,在上游劳动力市场形成了与下游平台内经营者市场截然不同的寡头垄断。对此,外卖平台可能基于自我保护原则、统一性原则、排除搭便车原则为其行为寻找合理性,但这三种抗辩事由均不具有适用可能性。外卖平台在实施“二选一”过程中,对商家形成了佣金价格及获取消费者流量的控制力,对消费者形成了商品价格的控制力,对外卖骑手形成了劳动力雇佣价格及劳动时间的控制力。综合交叉网络外部性等因素,“二选一”行为对三方所产生的危害并不相同,对此应完善监管机构行为性救济模式,要求平台解除“二选一”独家协议,履行信息披露义务,限制收集消费者个人信息的范围,对平台配送系统进行优化,允许骑手保留数据权属。     

奇正伤湿止痛膏对大鼠皮肤角质层影响的实验研究

目的探讨奇正伤湿止痛膏用药期间和停止用药后对大鼠皮肤角质层超微结构的影响。方法选用10周龄Wistar大鼠，在其背部两侧皮肤涂抹含伤湿止痛膏药物的浸膏和不合药的对照膏剂，应用电子显微镜观察该药剂引起的皮肤角质层超微结构的变化。结果与对照膏剂比较，涂药4～12h后表皮角质层开始变薄，细胞间距增大，细胞结构变得比较疏松，外层细胞有脱落。1d后，角质层疏松减轻，细胞间距缩小。停药后第1天，表皮角质层细胞间距变小。停药3d后，表皮角质层已基本恢复正常。结论该膏剂主要通过降低皮肤角质层的屏障作用，促进药物透皮吸收效率。停止用药后表皮角质层变化可短时间内恢复正常。